公开(公告)号：CN105755030B

公开(公告)日：2019-06-21

申请号：CN201610130757.1

申请日：2016-03-08

Applicant: 中国水产科学研究院南海水产研究所

Inventor： 吴燕燕 ,  马永凯 ,  李来好 ,  杨贤庆 ,  王锦旭 ,  林婉玲 ,  赵永强 ,  戚勃 ,  邓建朝 ,  马海霞 ,  荣辉 ,  胡晓 ,  杨少玲

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种合浦珠母贝肉抗氧化肽的制备方法，包括以下步骤：(1)根据合浦珠母贝肉抗氧化肽的氨基酸序列，构建出其目的基因，经双酶切后，与同样经双酶切的原核表达质粒PGEX‑6P‑1相连接，制得原核重组表达载体，将原核重组表达载体经热激转化至大肠杆菌感受态细胞，制得重组工程菌株；(2)将重组工程菌株培养，并添加IPTG诱导培养后，离心收集菌体，将菌体超声破碎后收集沉淀，获得含有目的蛋白的沉淀；(3)利用GST琼脂糖亲和层析分离纯化，即得到合浦珠母贝肉抗氧化肽。该方法高效、专一性强、成本低，获得的合浦珠母贝肉抗氧化肽纯度高，抗氧化活性强。

公开(公告)号：CN105755030A

公开(公告)日：2016-07-13

申请号：CN201610130757.1

申请日：2016-03-08

Applicant: 中国水产科学研究院南海水产研究所

Inventor： 吴燕燕 ,  马永凯 ,  李来好 ,  杨贤庆 ,  王锦旭 ,  林婉玲 ,  赵永强 ,  戚勃 ,  邓建朝 ,  马海霞 ,  荣辉 ,  胡晓 ,  杨少玲

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

CPC classification number: C07K7/06 ,  C12N15/70 ,  C12N2800/101 ,  C12N2800/22

Abstract: 本发明公开了一种合浦珠母贝肉抗氧化肽的制备方法，包括以下步骤：(1)根据合浦珠母贝肉抗氧化肽的氨基酸序列，构建出其目的基因，经双酶切后，与同样经双酶切的原核表达质粒PGEX?6P?1相连接，制得原核重组表达载体，将原核重组表达载体经热激转化至大肠杆菌感受态细胞，制得重组工程菌株；(2)将重组工程菌株培养，并添加IPTG诱导培养后，离心收集菌体，将菌体超声破碎后收集沉淀，获得含有目的蛋白的沉淀；(3)利用GST琼脂糖亲和层析分离纯化，即得到合浦珠母贝肉抗氧化肽。该方法高效、专一性强、成本低，获得的合浦珠母贝肉抗氧化肽纯度高，抗氧化活性强。

公开(公告)号：CN106995484A

公开(公告)日：2017-08-01

申请号：CN201710175030.X

申请日：2017-03-22

Applicant: 中国水产科学研究院南海水产研究所

Inventor： 吴燕燕 ,  马永凯 ,  李来好 ,  杨贤庆 ,  陈胜军 ,  林婉玲 ,  胡晓 ,  郝淑贤 ,  杨少玲 ,  荣辉 ,  邓建朝

IPC: C07K7/06 ,  C12N15/70 ,  A61P39/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了利用定点突变和分子修饰技术改造的珍珠贝肉抗氧化肽，其氨基酸序列如下：Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg‑Asn‑Gly‑Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg‑Glu‑Arg‑Asn‑Gly‑Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg‑Asn‑Gly‑Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg‑Glu‑Arg‑Asn‑Gly‑Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg。本发明还公开了所述珍珠贝肉抗氧化肽的构建方法及制备方法。本发明的抗氧化肽活性高、纯度高，制备速度快、成本低，提供构建方法和制备方法自动化程度高，可以实现全程自动化无人管理，大大节约了人力成本。

公开(公告)号：CN106995484B

公开(公告)日：2020-06-16

申请号：CN201710175030.X

申请日：2017-03-22

Applicant: 中国水产科学研究院南海水产研究所

Inventor： 吴燕燕 ,  马永凯 ,  李来好 ,  杨贤庆 ,  陈胜军 ,  林婉玲 ,  胡晓 ,  郝淑贤 ,  杨少玲 ,  荣辉 ,  邓建朝

IPC: C07K7/06 ,  C12N15/70 ,  A61P39/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了利用定点突变和分子修饰技术改造的珍珠贝肉抗氧化肽，其氨基酸序列如下：Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg‑Asn‑Gly‑Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg‑Glu‑Arg‑Asn‑Gly‑Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg‑Asn‑Gly‑Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg‑Glu‑Arg‑Asn‑Gly‑Gly‑Ala‑Gly‑Ile‑Pro‑Gly‑Lys‑Arg‑Glu‑Arg。本发明还公开了所述珍珠贝肉抗氧化肽的构建方法及制备方法。本发明的抗氧化肽活性高、纯度高，制备速度快、成本低，提供构建方法和制备方法自动化程度高，可以实现全程自动化无人管理，大大节约了人力成本。

公开(公告)号：CN105331626A

公开(公告)日：2016-02-17

申请号：CN201510599401.8

申请日：2015-09-18

Applicant: 中国水产科学研究院南海水产研究所

Inventor： 吴燕燕 ,  马永凯 ,  李来好 ,  杨贤庆 ,  赵永强 ,  王锦旭 ,  林婉玲 ,  杨少玲 ,  邓建朝 ,  马海霞 ,  魏涯

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种利用分子生物学和基因工程的方法构建多倍体串联基因pBluescriptⅡKS-nPFWM、构建毕赤酵母串联表达载体pPICZαA-pBluescriptⅡKS-nPFWM及毕赤酵母工程菌株GS115-pPICZαA-pBluescriptⅡKS-nPFWM1的方法，其中n为1、2、4、6或12；为其后期高效、稳定表达抗氧化肽、工业化规模生产及其在化妆品、保健食品等领域应用奠定基础。