一种斑马鱼仔鱼肝肿大模型的构建方法

    公开(公告)号:CN105832747B

    公开(公告)日:2018-08-07

    申请号:CN201610278422.4

    申请日:2016-04-28

    IPC分类号: A61K31/573 A61P1/16

    摘要: 本发明提供了一种斑马鱼仔鱼肝肿大模型的构建方法,其包括如下步骤:(1)、将地塞米松用DMSO溶解,制成浓度为12.5‑40mg/ml地塞米松母液;(2)、将地塞米松母液加入至盛有斑马鱼仔鱼的培养液中,使培养液中的地塞米松的终浓度为12.5‑40μg/ml;(3)、将斑马鱼仔鱼置于恒温培养箱内进行培养,以诱导斑马鱼仔鱼肝肿大。本发明提供的斑马鱼仔鱼肝肿大模型的构建方法能够有效诱导斑马鱼仔鱼肝肿大,可用于鱼类肝肿大药物的筛选。

    建鲤原代肝细胞的分离培养方法

    公开(公告)号:CN104293731A

    公开(公告)日:2015-01-21

    申请号:CN201410535197.9

    申请日:2014-10-13

    IPC分类号: C12N5/071

    摘要: 本发明公开了建鲤原代肝细胞的分离培养方法,选取健康无伤的建鲤,从建鲤尾静脉处采血,完毕后对鱼体表面消毒,放入超净台内无菌采集建鲤肝脏;用含双抗的PBS溶液漂洗,加入胰酶消化液,消化处理温度为26~28℃,时间为15-20min;消化结束后加入培养基A终止消化,消化液经过200目过滤网进行过滤,收集滤液;分别用50g和30g各离心5min,然后用培养基B进行洗涤2次,去除上清液,得到沉淀即为提取的肝细胞,制成细胞悬液,铺板培养。本实验方法简单快捷,能很大程度上节约分离时间,本实验所用分离时间大约为40min,且获得的肝细胞生长状况良好,红细胞数量少,细胞存活率在95%左右。

    基于全血培养法处理鱼类染色体技术所用全血的方法

    公开(公告)号:CN103992984A

    公开(公告)日:2014-08-20

    申请号:CN201410215094.4

    申请日:2014-05-21

    IPC分类号: C12N5/0783

    摘要: 本发明提供了一种基于全血培养法处理鱼类染色体技术所用全血的方法,先将试验鱼麻醉,采血,将所得血液与ACD抗凝剂混合,得混合血液;再将所得混合血液与培养基混合,得混合液;将所得混合液叠加至Percoll分离液上,离心,去掉上层血浆,得到血浆层与分离液层交界处的淋巴细胞;然后将所得淋巴细胞加入培养基中,充分混匀,离心洗涤,得到细胞沉淀物;最后将所得细胞沉淀物转至培养基中,20~30℃培养72~96h。本发明提供的基于全血培养法制备鱼类染色体技术的全血的处理方法,能成功有效的分离出淋巴细胞,排除红细胞干扰,提高制备成功率,为保证试验结果奠定基础。