一种酵母菌落PCR试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN114231652B

    公开(公告)日:2023-08-01

    申请号:CN202111480407.5

    申请日:2021-12-06

    摘要: 本发明公开了一种酵母菌落PCR试剂盒及其应用,属于分子生物学技术领域;酵母菌落PCR试剂盒包括酵母裂解液和酵母PCR扩增Mix;酵母裂解液包括20mM KOH,质量分数0.5%BSA,1M甜菜碱;酵母PCR扩增Mix包括含Mg2+PCR buffer、dNTP、甘油、硫酸铵和Phusion Taq酶。本发明试剂盒使用过程简便,2h内完成扩增,且扩增效率高,适于推广应用。

    一种高通量酵母双杂交文库筛选方法

    公开(公告)号:CN114934106A

    公开(公告)日:2022-08-23

    申请号:CN202210673461.X

    申请日:2022-06-14

    摘要: 本发明公开了一种高通量酵母双杂交文库筛选方法。属于分子生物技术领域。该方法包括如下步骤:酵母诱饵菌株的制备;酵母诱饵菌株与文库菌的杂交;交配后培养物的培养与检测:将交配后培养物置于半固态培养基中,冰上培养,使液态培养基凝固成半固态胶冻状,之后培养收集酵母细胞,并提取酵母细胞质粒进行PCR扩增,凝胶电泳检测。该方法采用半固态凝胶培养基培养来代替经典方法中涂板培养的步骤,缩减了工作量,也免去挑选单克隆进行检测时的大量重复操作。

    水稻细胞分裂素氧化酶基因OsCKX4的应用

    公开(公告)号:CN112626106A

    公开(公告)日:2021-04-09

    申请号:CN202011480071.8

    申请日:2020-12-15

    摘要: 本发明公开了一种利用水稻细胞分裂素氧化酶基因OsCKX4调节水稻每穗粒数的方法,以特异启动子驱动,降低所述基因OsCKX4的表达水平,控制水稻每穗粒数。本发明利用反义抑制的技术策略,构建反义抑制载体,将OsCKX4导入到受体品种中花11,在中花11背景中反义抑制OsCKX4的表达,可以显著降低其转录水平,并增加穗粒数,其他主要农艺性状并未受影响。本发明首次提出了利用调节OsCKX4表达水平来增加穗粒数,对水稻的产量性状改良具有重要意义。

    一种磷酸化蛋白激酶SAPK10突变体及其方法

    公开(公告)号:CN108467856B

    公开(公告)日:2021-05-04

    申请号:CN201810310596.3

    申请日:2018-04-09

    IPC分类号: C12N9/12

    摘要: 本发明公开了一种磷酸化蛋白激酶SAPK10突变体及其方法,该突变体通过将SAPK10的第177位由丝氨酸突变为丙氨酸得到,具体为将SAPK10蛋白序列可能的磷酸化位点进行基因工程修饰;将第177处氨基酸残基丝氨酸突变为丙氨酸;得修饰过的SAP10蛋白。本发明包括对水稻蔗糖非酵解型蛋白激酶SAPK10的磷酸化位点的确定;对磷酸化位点进行基因工程修饰,通过玉米的Ubiquitin启动子的驱动,转基因后较磷酸化位点未修饰的转基因水稻相比,对ABA的敏感性降低,具体表现在农艺性状上,株高、粒型、结实率、千粒重、有效穗数、穗长能恢复至野生型的水平,同时在ABA影响种子的萌发能力方面也表现出相同的趋势。

    一种用于构建高通量互作蛋白分析的引物组及分析方法

    公开(公告)号:CN116083548A

    公开(公告)日:2023-05-09

    申请号:CN202211726964.5

    申请日:2022-12-30

    摘要: 本发明公开了一种用于构建高通量互作蛋白分析的引物组及分析方法,创建plate barcode引物和blockbarcode引物,设计Plate前端引物12种,Plate后端引物10种,Block前端引物20种,Block后端引物20种。再利用该引物组构建高通量互作蛋白的分析方法,通过“文库对文库”mating的方式随机筛选互作组合,对蛋白互作阳性克隆中的诱饵和靶基因片段进行两轮PCR扩增,使每一条PCR扩增产物附带唯一的四种barcode组合;最后采用Pacbio高读长和高通量测序方法对所有阳性克隆的PCR产物进行混合测序;携带相同四种barcode组合,且分别来源于诱饵和猎物载体的蛋白被认定为互作蛋白组合。本发明具有通量高、效率高、成本低且适用物种广泛等优点。

    一种酵母菌落PCR试剂盒及其应用
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN114231652A

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202111480407.5

    申请日:2021-12-06

    摘要: 本发明公开了一种酵母菌落PCR试剂盒及其应用,属于分子生物学技术领域;酵母菌落PCR试剂盒包括酵母裂解液和酵母PCR扩增Mix;酵母裂解液包括20mM KOH,质量分数0.5%BSA,1M甜菜碱;酵母PCR扩增Mix包括含Mg2+PCR buffer、dNTP、甘油、硫酸铵和Phusion Taq酶。本发明试剂盒使用过程简便,2h内完成扩增,且扩增效率高,适于推广应用。

    一种水稻糖诱导启动子SRN1及其应用

    公开(公告)号:CN112980848A

    公开(公告)日:2021-06-18

    申请号:CN202110441890.X

    申请日:2021-04-23

    摘要: 本发明公开了一种水稻糖诱导启动子SRN1及其应用。属于基因工程技术领域。水稻糖诱导启动子SRN1的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。启动子SRN1属于一种受蔗糖、葡萄糖诱导的组织特异性启动子,在植物基因工程领域以及研究生物体内糖信号分子的传导机制具有重要的应用价值。启动子SRN1为水稻或其他粮食作物重要农艺性状和应对逆境胁迫的基因工程育种提供了定向表达基因的工具,同时也可用于科研上指示植物体内可溶性糖的水平。

    一种磷酸化蛋白激酶SAPK10突变体及其方法

    公开(公告)号:CN108467856A

    公开(公告)日:2018-08-31

    申请号:CN201810310596.3

    申请日:2018-04-09

    IPC分类号: C12N9/12

    摘要: 本发明公开了一种磷酸化蛋白激酶SAPK10突变体及其方法,该突变体通过将SAPK10的第177位由丝氨酸突变为丙氨酸得到,具体为将SAPK10蛋白序列可能的磷酸化位点进行基因工程修饰;将第177处氨基酸残基丝氨酸突变为丙氨酸;得修饰过的SAP10蛋白。本发明包括对水稻蔗糖非酵解型蛋白激酶SAPK10的磷酸化位点的确定;对磷酸化位点进行基因工程修饰,通过玉米的Ubiquitin启动子的驱动,转基因后较磷酸化位点未修饰的转基因水稻相比,对ABA的敏感性降低,具体表现在农艺性状上,株高、粒型、结实率、千粒重、有效穗数、穗长能恢复至野生型的水平,同时在ABA影响种子的萌发能力方面也表现出相同的趋势。