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公开(公告)号：CN114410750B
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202210073540.7
申请日：2022-01-21
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/6825
Abstract: 本发明公开了一种基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒，该试剂盒包括Probe A、Probe B、Probe D、Probe E、聚合酶、切刻内切酶、辅酶因子、Tris‑HCl、EDTA、TCEP、NaCl、巯基己醇、磷酸缓冲液、dNTPs以及NEB buffer 2.1。本发明提供的基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒，构建了可再生的DNA修饰金电极界面，通过茎环结构与哑铃结构DNA在目标核酸与相关酶催化反应下构建的环状DNA结构，能进行电极界面的双足步行反应，可实现目标核酸的超灵敏定量分析，检测限能够达到2.2aM，且具有高选择性特点，能很好的应用于核酸分析检测。
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公开(公告)号：CN114410750A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202210073540.7
申请日：2022-01-21
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/6825
Abstract: 本发明公开了一种基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒，该试剂盒包括Probe A、Probe B、Probe D、Probe E、聚合酶、切刻内切酶、辅酶因子、Tris‑HCl、EDTA、TCEP、NaCl、巯基己醇、磷酸缓冲液、dNTPs以及NEB buffer 2.1。本发明提供的基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒，构建了可再生的DNA修饰金电极界面，通过茎环结构与哑铃结构DNA在目标核酸与相关酶催化反应下构建的环状DNA结构，能进行电极界面的双足步行反应，可实现目标核酸的超灵敏定量分析，检测限能够达到2.2aM，且具有高选择性特点，能很好的应用于核酸分析检测。
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公开(公告)号：CN110487867B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN201910620789.3
申请日：2019-07-10
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: G01N27/327
Abstract: 本发明公开了一种T4多聚核苷酸激酶的定量检测方法，包括步骤：首先设计巯基化单链DNA探针a、探针b和5’端修饰氨基的探针c，探针a通过金‑巯键固定于金电极表面；探针a 5’端的羟基可被T4多聚核苷酸激酶催化磷酸化，DNA探针a接着与探针b、探针c杂交，探针c的3’端与探针a的5’端的磷酸基团在T4 DNA连接酶作用下发生连接反应；再进行加热变性处理，探针c仍然保留在电极表面，探针c末端的氨基可进一步捕获银纳米颗粒，最后通过检测银纳米颗粒的溶出伏安信号得到T4多聚核苷酸激酶的定量检测结果。本发明具有灵敏度高，选择性好，快速以及成本低的特点，检测限为0.01U/mL。
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公开(公告)号：CN114231597B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202111437510.1
申请日：2021-11-29
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6825
Abstract: 本发明公开了一种基于DNAzyme循环激活的循环肿瘤DNA检测方法，该方法中：末端修饰了二茂铁的探针A修饰于金电极表面，探针B‑C杂交体连接在探针A上，在目标核酸的驱动下可将探针C置换，使探针B末端修饰的亚甲基蓝信号分子靠近金电极表面，并通过激活DNAzyme催化探针A裂解释放二茂铁信号分子，游离的探针序列还能够进一步激活其他DNAzyme，从而放大信号，通过研究双信号的强度变化对比可实现对目标核酸的定量分析。本发明通过对目标循环肿瘤DNA触发的双重电化学信号变化的综合分析后能够实现循环肿瘤DNA浓度的超灵敏定量分析，且检测方法简单，易于操作，对循环肿瘤DNA特异性强，具有很好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113495091A
公开(公告)日：2021-10-12
申请号：CN202110590940.0
申请日：2021-05-28
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 天津国科医工科技发展有限公司
IPC: G01N27/26 , G01N27/327 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明公开了一种痕量微小核糖核酸的电化学检测方法，包括以下步骤：1)在电极表面修饰Probe A；2)将电极置于样品中；3)向步骤2)的样品中再加入Probe B和Probe C；4)将电极浸泡到表面修饰有DNA探针Probe D的金纳米颗粒溶液中；5)对电极进行电化学分析，通过电化学信号计算出样品中的待检测的miRNA的浓度。本发明利用目标miRNA在电极界面诱导的茎环结构DNA开环，释放杂交链式反应的触发链，实现电极表面的原位DNA纳米结构生长，同时在产物侧链捕获修饰有互补DNA序列的金纳米颗粒，最终通过检测纳米颗粒表面DNA末端修饰的电信号分子，能实现对靶miRNA浓度的高灵敏检测。
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公开(公告)号：CN110487867A
公开(公告)日：2019-11-22
申请号：CN201910620789.3
申请日：2019-07-10
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: G01N27/327
Abstract: 本发明公开了一种T4多聚核苷酸激酶的定量检测方法，包括步骤：首先设计巯基化单链DNA探针a、探针b和5’端修饰氨基的探针c，探针a通过金-巯键固定于金电极表面；探针a 5’端的羟基可被T4多聚核苷酸激酶催化磷酸化，DNA探针a接着与探针b、探针c杂交，探针c的3’端与探针a的5’端的磷酸基团在T4 DNA连接酶作用下发生连接反应；再进行加热变性处理，探针c仍然保留在电极表面，探针c末端的氨基可进一步捕获银纳米颗粒，最后通过检测银纳米颗粒的溶出伏安信号得到T4多聚核苷酸激酶的定量检测结果。本发明具有灵敏度高，选择性好，快速以及成本低的特点，检测限为0.01U/mL。
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公开(公告)号：CN115807060A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202211555601.X
申请日：2022-12-06
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/6825 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , G01N27/48
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器、试剂盒及检测方法，该miRNA检测传感器包括：侧链上具有茎环结构序列的DNA四面体以及修饰在所述DNA四面体上的连接基团和捕获基团，所述连接基团用于与电极偶联，所述捕获基团用于捕获电化学探针。本发明成果构建了一种新的miRNA检测策略，通过目标miRNA与特殊构造的DNA四面体反应，来形成部分DNA/RNA杂合体，在触发双链特异性核酸酶的活性进行切割后，可实现DNA四面体局部结构的降解，同时释放用于捕获银纳米颗粒信号探针的单链区域，能实现miRNA的高灵敏度、高特异性电化学检测。
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公开(公告)号：CN114231597A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202111437510.1
申请日：2021-11-29
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6825
Abstract: 本发明公开了一种基于DNAzyme循环激活的循环肿瘤DNA检测方法，该方法中：末端修饰了二茂铁的探针A修饰于金电极表面，探针B‑C杂交体连接在探针A上，在目标核酸的驱动下可将探针C置换，使探针B末端修饰的亚甲基蓝信号分子靠近金电极表面，并通过激活DNAzyme催化探针A裂解释放二茂铁信号分子，游离的探针序列还能够进一步激活其他DNAzyme，从而放大信号，通过研究双信号的强度变化对比可实现对目标核酸的定量分析。本发明通过对目标循环肿瘤DNA触发的双重电化学信号变化的综合分析后能够实现循环肿瘤DNA浓度的超灵敏定量分析，且检测方法简单，易于操作，对循环肿瘤DNA特异性强，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113495091B
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202110590940.0
申请日：2021-05-28
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 天津国科医工科技发展有限公司
IPC: G01N27/26 , G01N27/327 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明公开了一种痕量微小核糖核酸的电化学检测方法，包括以下步骤：1)在电极表面修饰Probe A；2)将电极置于样品中；3)向步骤2)的样品中再加入Probe B和Probe C；4)将电极浸泡到表面修饰有DNA探针Probe D的金纳米颗粒溶液中；5)对电极进行电化学分析，通过电化学信号计算出样品中的待检测的miRNA的浓度。本发明利用目标miRNA在电极界面诱导的茎环结构DNA开环，释放杂交链式反应的触发链，实现电极表面的原位DNA纳米结构生长，同时在产物侧链捕获修饰有互补DNA序列的金纳米颗粒，最终通过检测纳米颗粒表面DNA末端修饰的电信号分子，能实现对靶miRNA浓度的高灵敏检测。
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