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公开(公告)号：CN105463005A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201410450056.7
申请日：2014-09-04
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
摘要： 本发明涉及基因工程与生物能源领域，具体而言是一种检测微生物细胞中脂肪烃的构建体及利用构建体原位检测脂肪烃的方法。构建体包含至少一个脂肪烃检测元件和一个报告蛋白元件；脂肪烃检测元件由具有脂肪烃响应特性的转录激活因子和启动子组成；所述报告蛋白元件为能够在宿主中功能性表达和被检测的蛋白质。测定方法，利用所述构建体将其导入宿主细胞，再将宿主细胞进行培养并诱导其合成脂肪烃，而后通过检测报告蛋白的表达，从而实现对细胞内脂肪烃的检测。本发明方法操作步骤简单，设备要求低，可同时检测大量样品，也可用于对已知脂肪烃生物合成相关的酶和蛋白质或潜在产烃途径的进化和高通量筛选中。
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公开(公告)号：CN105463005B
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201410450056.7
申请日：2014-09-04
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
IPC分类号： C12N15/70 , C12Q1/6897 , C12Q1/02
摘要： 本发明涉及基因工程与生物能源领域，具体而言是一种检测微生物细胞中脂肪烃的构建体及利用构建体原位检测脂肪烃的方法。构建体包含至少一个脂肪烃检测元件和一个报告蛋白元件；脂肪烃检测元件由具有脂肪烃响应特性的转录激活因子和启动子组成；所述报告蛋白元件为能够在宿主中功能性表达和被检测的蛋白质。测定方法，利用所述构建体将其导入宿主细胞，再将宿主细胞进行培养并诱导其合成脂肪烃，而后通过检测报告蛋白的表达，从而实现对细胞内脂肪烃的检测。本发明方法操作步骤简单，设备要求低，可同时检测大量样品，也可用于对已知脂肪烃生物合成相关的酶和蛋白质或潜在产烃途径的进化和高通量筛选中。
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公开(公告)号：CN105586351A
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201410660371.2
申请日：2014-11-18
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
摘要： 本发明公开了一种源于蓝细菌的脂肪烃合成关键基因及其应用。所述脂肪烃合成基因包括脂酰ACP还原酶(Fatty acyl-acyl carrier protein reductase,AAR)和脂肪醛脱甲酰基加氧酶(Fatty aldehyde deformylating oxygenase,ADO)的编码基因。本发明还涉及构建体，所述构建体包含有活性的启动子和受该启动子控制的脂肪烃合成关键基因。将所述构建体转化大肠杆菌，可使基因工程大肠杆菌获得脂肪烃合成能力。将至少一种构建体转化蓝细菌，可显著提高基因工程蓝细菌的脂肪烃产量。本发明公开的蓝细菌产烃关键基因将为微生物直接合成脂肪烃类新型生物燃料提供新的候选基因资源。
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公开(公告)号：CN105802983B
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201610183720.5
申请日：2016-03-28
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
摘要： 本发明公开了一种产脂肪烃基因的高通量筛选方法及获得的突变体与应用，属于生物工程技术领域。本发明所提供的方法是将携带潜在产脂肪烃基因的载体导入到携带有检测元件的宿主细胞中，培养宿主细胞，通过对检测元件信号响应鉴别目的基因的表达情况，并分离高产脂肪烃的突变体。同时，本发明还提供了利用所述筛选方法获得的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体。本发明提供的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体具有较该酶野生型具有更高的脂肪烃合成效率。本发明提供的高产脂肪烃基因的高通量筛选方法有助于快速的从具有潜在产烃能力的备选基因及其突变体文库中筛选出具有更高产烃效率的特定基因或突变体。
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公开(公告)号：CN105624179A
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201410660346.4
申请日：2014-11-18
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
摘要： 本发明涉及生物能源与合成生物学领域，具体而言是一种生物合成生产脂肪端烯的系统及其应用。系统包含脂肪端烯合成元件、脂肪酸高产元件和还原伴侣蛋白；或，系统包含脂肪端烯合成元件、脂肪酸高产元件、还原伴侣蛋白和胞内过氧化氢水平调控元件。本发明构建的微生物能够稳定生产脂肪端烯，原料成本低廉，构建步骤简单。利用本发明方法制备脂肪端烯节能环保，且不受石油短缺制约，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN105586351B
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201410660371.2
申请日：2014-11-18
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
摘要： 本发明公开了一种源于蓝细菌的脂肪烃合成关键基因及其应用。所述脂肪烃合成基因包括脂酰ACP还原酶(Fatty acyl‑acyl carrier protein reductase,AAR)和脂肪醛脱甲酰基加氧酶(Fatty aldehyde deformylating oxygenase,ADO)的编码基因。本发明还涉及构建体，所述构建体包含有活性的启动子和受该启动子控制的脂肪烃合成关键基因。将所述构建体转化大肠杆菌，可使基因工程大肠杆菌获得脂肪烃合成能力。将至少一种构建体转化蓝细菌，可显著提高基因工程蓝细菌的脂肪烃产量。本发明公开的蓝细菌产烃关键基因将为微生物直接合成脂肪烃类新型生物燃料提供新的候选基因资源。
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公开(公告)号：CN105802983A
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201610183720.5
申请日：2016-03-28
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
摘要： 本发明公开了一种产脂肪烃基因的高通量筛选方法及获得的突变体与应用，属于生物工程技术领域。本发明所提供的方法是将携带潜在产脂肪烃基因的载体导入到携带有检测元件的宿主细胞中，培养宿主细胞，通过对检测元件信号响应鉴别目的基因的表达情况，并分离高产脂肪烃的突变体。同时，本发明还提供了利用所述筛选方法获得的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体。本发明提供的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体具有较该酶野生型具有更高的脂肪烃合成效率。本发明提供的高产脂肪烃基因的高通量筛选方法有助于快速的从具有潜在产烃能力的备选基因及其突变体文库中筛选出具有更高产烃效率的特定基因或突变体。
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公开(公告)号：CN118909975A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411123284.3
申请日：2024-08-15
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
摘要： 本发明涉及一种噬藻体A‑Lf14，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCC No.45971，保藏日期为2024年4月26日。本发明提供的噬藻体分离自鱼腥藻丰度较高的人工湿地，培养方法简单，可规模化制备，是水环境领域具备开发潜力的控藻生物制剂，可预防、控制以鱼腥藻为优势种的蓝藻水华。该技术有望在富营养化水体治理、环境保护和水产养殖等领域发挥重要作用，并可为解决鱼腥藻属蓝藻引发的其他环境问题提供一种新的解决方案。此外，该噬藻体还可以用于从含有鱼腥藻的环境样品中去除鱼腥藻，以分离纯化其他微生物，在生物种质资源分纯领域具有应用价值。
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公开(公告)号：CN115927427B
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202210878230.2
申请日：2022-07-25
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
摘要： 本发明涉及一种可合成瓦伦烯的工程藻及其制备方法，通过以PCC6803为底盘藻，导入法尼基焦磷酸合酶基因表达框、异戊烯焦磷酸异构酶基因表达框和1脱氧‑D‑木酮糖‑5‑磷酸合酶基因表达框，并导入瓦伦烯合酶基因表达框。该方案提高了瓦伦烯生物合成的效率，工程藻株在培养前3天瓦伦烯产量最高达到7.58mg/L/Day，较目前已知蓝细菌合成瓦伦烯产量的最高报道提高了5.4倍。在此基础上，通过培养策略优化，将藻株的生产周期延长至36天，总产量为154.81mg/L，产率达到4.3mg/L/Day。
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公开(公告)号：CN118667784A
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202310243123.7
申请日：2023-03-14
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
IPC分类号： C12N9/10 , A23K20/189 , A23L29/00 , C12N15/74 , C12N1/21 , C12P7/6409 , C12R1/01
摘要： 本发明涉及一种耐热型环丙烷脂肪酸合成酶；还涉及利用该酶构建的具有环丙烷脂肪酸合成能力的工程菌及其构建方法；还涉及上述酶和菌株在生产环丙烷脂肪酸中的应用。本发明的环丙烷脂肪酸合成酶具有宽泛的温度适应性，能够直接用于合成环丙烷脂肪酸或者构建具有合成环丙烷脂肪酸能力的工程菌，可提高催化效率和产品纯度，节省催化时间，同时高温制备可避免细胞培养污染，降低催化成本，在生物催化合成环丙烷脂肪酸领域具有很广阔的工业应用前景。本发明的耐热型环丙烷脂肪酸合成酶在饲料、食品、医药、生物仿生和合成生物学及耐热生物育种等行业中具有广泛应用价值，在生物催化合成环丙烷脂肪酸领域具有很广阔的工业应用前景。
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