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公开(公告)号：CN105463005B
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201410450056.7
申请日：2014-09-04
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
IPC分类号： C12N15/70 , C12Q1/6897 , C12Q1/02
摘要： 本发明涉及基因工程与生物能源领域，具体而言是一种检测微生物细胞中脂肪烃的构建体及利用构建体原位检测脂肪烃的方法。构建体包含至少一个脂肪烃检测元件和一个报告蛋白元件；脂肪烃检测元件由具有脂肪烃响应特性的转录激活因子和启动子组成；所述报告蛋白元件为能够在宿主中功能性表达和被检测的蛋白质。测定方法，利用所述构建体将其导入宿主细胞，再将宿主细胞进行培养并诱导其合成脂肪烃，而后通过检测报告蛋白的表达，从而实现对细胞内脂肪烃的检测。本发明方法操作步骤简单，设备要求低，可同时检测大量样品，也可用于对已知脂肪烃生物合成相关的酶和蛋白质或潜在产烃途径的进化和高通量筛选中。
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公开(公告)号：CN105802983A
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201610183720.5
申请日：2016-03-28
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
摘要： 本发明公开了一种产脂肪烃基因的高通量筛选方法及获得的突变体与应用，属于生物工程技术领域。本发明所提供的方法是将携带潜在产脂肪烃基因的载体导入到携带有检测元件的宿主细胞中，培养宿主细胞，通过对检测元件信号响应鉴别目的基因的表达情况，并分离高产脂肪烃的突变体。同时，本发明还提供了利用所述筛选方法获得的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体。本发明提供的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体具有较该酶野生型具有更高的脂肪烃合成效率。本发明提供的高产脂肪烃基因的高通量筛选方法有助于快速的从具有潜在产烃能力的备选基因及其突变体文库中筛选出具有更高产烃效率的特定基因或突变体。
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公开(公告)号：CN105463005A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201410450056.7
申请日：2014-09-04
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
摘要： 本发明涉及基因工程与生物能源领域，具体而言是一种检测微生物细胞中脂肪烃的构建体及利用构建体原位检测脂肪烃的方法。构建体包含至少一个脂肪烃检测元件和一个报告蛋白元件；脂肪烃检测元件由具有脂肪烃响应特性的转录激活因子和启动子组成；所述报告蛋白元件为能够在宿主中功能性表达和被检测的蛋白质。测定方法，利用所述构建体将其导入宿主细胞，再将宿主细胞进行培养并诱导其合成脂肪烃，而后通过检测报告蛋白的表达，从而实现对细胞内脂肪烃的检测。本发明方法操作步骤简单，设备要求低，可同时检测大量样品，也可用于对已知脂肪烃生物合成相关的酶和蛋白质或潜在产烃途径的进化和高通量筛选中。
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公开(公告)号：CN105802983B
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201610183720.5
申请日：2016-03-28
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 , 波音(中国)投资有限公司
摘要： 本发明公开了一种产脂肪烃基因的高通量筛选方法及获得的突变体与应用，属于生物工程技术领域。本发明所提供的方法是将携带潜在产脂肪烃基因的载体导入到携带有检测元件的宿主细胞中，培养宿主细胞，通过对检测元件信号响应鉴别目的基因的表达情况，并分离高产脂肪烃的突变体。同时，本发明还提供了利用所述筛选方法获得的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体。本发明提供的脂肪醛脱甲酰加氧酶突变体具有较该酶野生型具有更高的脂肪烃合成效率。本发明提供的高产脂肪烃基因的高通量筛选方法有助于快速的从具有潜在产烃能力的备选基因及其突变体文库中筛选出具有更高产烃效率的特定基因或突变体。
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公开(公告)号：CN105296410A
公开(公告)日：2016-02-03
申请号：CN201510704874.X
申请日：2015-10-27
申请人： 中国科学院青岛生物能源与过程研究所
摘要： 本发明公开了一种利用缬氨酸途径合成丙烷的大肠杆菌及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明所提供的大肠杆菌敲除了9种醛还原酶基因以及乳酸脱氢酶基因、延胡索酸还原酶基因、甲酸裂解酶基因和全局转录因子基因。同时过表达乙酰乳酸合成酶基因、酮酸还原异构酶基因、二羟基酸脱水酶基因、2-酮酸脱羧酶基因和脂肪醛去甲酰加氧酶基因。本发明同时还提供了该大肠杆菌的构建方法。通过在改造后的菌株中过表达丙烷合成途径，该菌株成功地实现了丙烷的生物合成。
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