公开(公告)号：CN1828275A

公开(公告)日：2006-09-06

申请号：CN200510048724.4

申请日：2005-12-22

申请人： 云南农业大学

发明人： 李凡 ,  王钰丽 ,  陈海如 ,  孙健 ,  蔡红 ,  吴德喜 ,  程建勇 ,  杨根华 ,  马琨玲 ,  钱宁刚

IPC分类号： G01N21/64 ,  G01N21/78 ,  B01D57/02 ,  C12Q1/00

摘要： 本发明提供一种烟草丛顶病毒检测方法，属植物保护领域。根据烟草丛顶病毒核苷酸序列设计特异性引物TB2F/TB2R，提取总RNA后采用RT－PCR的方法，直接检测烟草丛顶病毒。本发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术以及总核酸提取法的缺点，方便、特异、灵敏的检测烟草丛顶病毒。

公开(公告)号：CN100357451C

公开(公告)日：2007-12-26

申请号：CN200510048736.7

申请日：2005-12-22

申请人： 云南农业大学

发明人： 李凡 ,  王钰丽 ,  陈海如 ,  孙健 ,  蔡红 ,  吴建宇 ,  秦西云 ,  孔宝华 ,  兰平秀 ,  杨金广

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明提供一种烟草扭脉病毒检测方法，属植物保护领域。根据烟草扭脉病毒核苷酸序列设计的特异性引物TVCPF/TVCPR，提取植株组织的总RNA后，采用RT-PCR的方法，检测烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术和总核酸提取法的缺点，方便、特异、灵敏的检测烟草扭脉病毒。

公开(公告)号：CN1793858A

公开(公告)日：2006-06-28

申请号：CN200510048726.3

申请日：2005-12-22

申请人： 云南农业大学

发明人： 李凡 ,  孙健 ,  陈海如 ,  李正跃 ,  王钰丽 ,  刘云龙 ,  范静华 ,  姬广海 ,  孔宝华 ,  王扬 ,  杨斌 ,  蒋小龙 ,  白松 ,  蔡红 ,  胡先奇

IPC分类号： G01N21/64 ,  G01N21/78 ,  G01N27/447 ,  C12Q1/02 ,  G01N1/28

摘要： 本发明提供了一种同步检测百合斑驳病毒(LMoV)、百合无症病毒(LSV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的方法，属植物保护领域。其方案是，通过提取总RNA、多重RT－PCR以及电泳检测等步骤，在同一反应管及同一个热循环条件下对百合感染的LMoV、LSV和CMV三种病毒中的1～3种进行扩增，并通过凝胶电泳进行分离和检测。该方法除了具有普通RT－PCR具有的快速、特异、灵敏的优点外，主要是实现了三种病毒同步检测，降低了成本。

公开(公告)号：CN100430715C

公开(公告)日：2008-11-05

申请号：CN200510048724.4

申请日：2005-12-22

申请人： 云南农业大学

发明人： 李凡 ,  王钰丽 ,  陈海如 ,  孙健 ,  蔡红 ,  吴德喜 ,  程建勇 ,  杨根华 ,  马琨玲 ,  钱宁刚

IPC分类号： G01N21/64 ,  G01N21/78 ,  B01D57/02 ,  C12Q1/00

摘要： 本发明提供一种烟草丛顶病毒检测方法，属植物保护领域。根据烟草丛顶病毒核苷酸序列设计特异性引物TB2F/TB2R，提取总RNA后采用RT-PCR的方法，直接检测烟草丛顶病毒。本发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术以及总核酸提取法的缺点，方便、特异、灵敏的检测烟草丛顶病毒。

公开(公告)号：CN1827779A

公开(公告)日：2006-09-06

申请号：CN200510048736.7

申请日：2005-12-22

申请人： 云南农业大学

发明人： 李凡 ,  王钰丽 ,  陈海如 ,  孙健 ,  蔡红 ,  吴建宇 ,  秦西云 ,  孔宝华 ,  兰平秀 ,  杨金广

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明提供一种烟草扭脉病毒检测方法，属植物保护领域。根据烟草扭脉病毒核苷酸序列设计的特异性引物TVCPF/TVCPR，提取植株组织的总RNA后，采用RT－PCR的方法，检测烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术和总核酸提取法的缺点，方便、特异、灵敏的检测烟草扭脉病毒。

公开(公告)号：CN100538339C

公开(公告)日：2009-09-09

申请号：CN200510048726.3

申请日：2005-12-22

申请人： 云南农业大学

发明人： 李凡 ,  孙健 ,  陈海如 ,  李正跃 ,  王钰丽 ,  刘云龙 ,  范静华 ,  姬广海 ,  孔宝华 ,  王扬 ,  杨斌 ,  蒋小龙 ,  白松 ,  蔡红 ,  胡先奇

IPC分类号： G01N21/64 ,  G01N21/78 ,  G01N27/447 ,  C12Q1/02 ,  G01N1/28

摘要： 本发明提供了一种同步检测百合斑驳病毒(LMoV)、百合无症病毒(LSV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的方法，属植物保护领域。其方案是，通过提取总RNA、多重RT-PCR以及电泳检测等步骤，在同一反应管及同一个热循环条件下对百合感染的LMoV、LSV和CMV三种病毒中的1～3种进行扩增，并通过凝胶电泳进行分离和检测。该方法除了具有普通RT-PCR具有的快速、特异、灵敏的优点外，主要是实现了三种病毒同步检测，降低了成本。

公开(公告)号：CN100487431C

公开(公告)日：2009-05-13

申请号：CN200510048727.8

申请日：2005-12-22

申请人： 云南农业大学

发明人： 李凡 ,  王钰丽 ,  陈海如 ,  蔡红 ,  孙健 ,  吴建宇 ,  吴德喜 ,  秦西云 ,  杨根华 ,  程建勇 ,  马琨玲 ,  钱宁刚 ,  兰平秀 ,  杨金广

IPC分类号： G01N21/64 ,  G01N21/78 ,  G01N27/447 ,  C12Q1/00 ,  G01N1/28

摘要： 本发明提供一种同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒的方法，属植物保护领域。根据烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒核苷酸序列分别设计两对特异性引物TB2F/TB2R(检测烟草丛顶病毒)及TVCPF/TVCPR(检测烟草扭脉病毒)。提取植株组织的总RNA后，采用双重RT-PCR的方法，同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术以及总核酸提取法和传统RT-PCR方法的缺点，只用相当于一次普通RT-PCR的时间和试剂，就可以方便、特异、灵敏的同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。

公开(公告)号：CN1824800A

公开(公告)日：2006-08-30

申请号：CN200510048772.3

申请日：2005-12-27

申请人： 云南农业大学

发明人： 李凡 ,  陈精兰 ,  陈海如 ,  李正跃 ,  孙健 ,  王钰丽 ,  刘云龙 ,  范静华 ,  王扬 ,  姬广海 ,  孔宝华 ,  蔡红 ,  杨斌 ,  蒋小龙 ,  白松

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明提供了一种免疫捕获反转录PCR检测李坏死环斑病毒(PNRSV)的方法，属植物保护领域。其方案是，通过抗体特异捕获抗原、RT－PCR以及电泳检测等步骤，对植物中感染的李坏死环斑病毒进行扩增，并通过凝胶电泳进行分离和检测。该方法除了具有普通RT－PCR所具有的快速、特异的优点外，主要是实现了血清学与分子生物学技术的结合，先通过病毒抗体对抗原病毒的特异吸附，将植物中低浓度的病毒进行富集，再通过PCR进行扩增，从而使检测的灵敏度和特异性得到极大的提高，并降低了病毒的漏检率。

公开(公告)号：CN1793859A

公开(公告)日：2006-06-28

申请号：CN200510048727.8

申请日：2005-12-22

申请人： 云南农业大学

发明人： 李凡 ,  王钰丽 ,  陈海如 ,  蔡红 ,  孙健 ,  吴建宇 ,  吴德喜 ,  秦西云 ,  杨根华 ,  程建勇 ,  马琨玲 ,  钱宁刚 ,  兰平秀 ,  杨金广

IPC分类号： G01N21/64 ,  G01N21/78 ,  G01N27/447 ,  C12Q1/00 ,  G01N1/28

摘要： 本发明提供一种同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒的方法，属植物保护领域。根据烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒核苷酸序列分别设计两对特异性引物TB2F/TB2R(检测烟草丛顶病毒)及TVCPF/TVCPR(检测烟草扭脉病毒)。提取植株组织的总RNA后，采用双重RT－PCR的方法，同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术以及总核酸提取法和传统RT－PCR方法的缺点，只用相当于一次普通RT－PCR的时间和试剂，就可以方便、特异、灵敏的同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。