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公开(公告)号:CN102952901B
公开(公告)日:2014-02-12
申请号:CN201210492173.0
申请日:2012-11-28
申请人: 云南农业大学
摘要: 本发明涉及一种同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法,属植物保护领域。通过分别设计合成TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA正反向引物,CTAB法提取染病植物组织或传毒介体昆虫总RNA,采用一步法四重RT-PCR,达到对这4种病原物的同步快速检测。所设计的引物特异性强,能同时扩增出4种病原物。用CTAB法提取染病植物组织及传毒介体昆虫的总RNA,既能保证所提RNA的质量,也能降低检测成本。反转录与多重PCR一步完成,极大地节约了检测时间。本发明具有快速、高效、特异性强、灵敏度高和成本低廉等优点,能一次实现对与烟草丛顶病相关的4种病原物的同步检测,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN102952901A
公开(公告)日:2013-03-06
申请号:CN201210492173.0
申请日:2012-11-28
申请人: 云南农业大学
摘要: 本发明涉及一种同步检测TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA的方法,属植物保护领域。通过分别设计合成TBTV、TVDV、Sat-TBTV和TVDVaRNA正反向引物,CTAB法提取染病植物组织或传毒介体昆虫总RNA,采用一步法四重RT-PCR,达到对这4种病原物的同步快速检测。所设计的引物特异性强,能同时扩增出4种病原物。用CTAB法提取染病植物组织及传毒介体昆虫的总RNA,既能保证所提RNA的质量,也能降低检测成本。反转录与多重PCR一步完成,极大地节约了检测时间。本发明具有快速、高效、特异性强、灵敏度高和成本低廉等优点,能一次实现对与烟草丛顶病相关的4种病原物的同步检测,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN108157074A
公开(公告)日:2018-06-15
申请号:CN201810008545.5
申请日:2018-01-04
申请人: 云南农业大学
摘要: 本发明涉及一种促进仙茅开花结果的种植方法,属于野生中药材繁殖种植技术领域,所述的促进仙茅开花结果的种植方法具体包括以下步骤:1)选地整地;2)施基肥;3)土壤消毒;4)种植;5)生长期的田间管理;6)采收管理;通过在仙茅的现蕾期、初花期和盛花期,向植株花序部位喷施营养液,并配合以合理的田间管理,使其花期趋同、花发育正常,能够有效提高其结果率、种子产量;与常规种植相比,其花序结果率提高了30%,果实种子单产增加20%,大大增加了其繁殖系数,具有操作简单、优质高产、经济效益好等优点,利于仙茅的规模化、规范化和标准化种植。
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公开(公告)号:CN108094984A
公开(公告)日:2018-06-01
申请号:CN201810081312.8
申请日:2018-01-29
申请人: 云南农业大学
摘要: 本发明涉及一种诃子果实的加工方法,属于食品果蔬加工技术领域,所述一种诃子果实加工方法,本发明通过对果实进行拣选、分级、清洗、去皮、去核和调味处理等一系列处理,去掉了诃子粗厚的果皮和约占近一半的坚硬果核,制备方法科学合理,操作简便、质量可控,便于运输、保藏和携带及食用;有效提高了诃子的附加值,保留了诃子原有功效,祛除了诃子果实硬、涩等口感,使其不反盐,不粘手,吃起来柔软、适口、味美爽脆、回甘、生津长久,适用人群更为广泛,尤其适合老人和糖尿病病人食用。
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公开(公告)号:CN104726617A
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201510174302.5
申请日:2015-04-14
申请人: 云南农业大学
CPC分类号: C12Q1/6851 , C12Q1/701 , C12Q2531/113 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107
摘要: 本发明公开了一种实时荧光定量PCR检测病毒核酸的方法,包括RNA提取、PCR反应、检测步骤,具体包括:提取感病烟草总RNA,提纯TMV-RNA反转录得到第一链cDNA;根据Gen bank数据库,以TMV外壳蛋白基因系列作为病毒核酸检测的指标,设计合成特异引物,以cDNA为作为模板,进行PCR扩增,回收和纯化PCR产物;对回收和纯化的PCR产物进行实时荧光定量PCR检测。本发明可直接应用于体系构建,进行体系中病毒核酸的定量检测,检测结果具有可靠性。同时也显示出采用实时荧光定量PCR技术通过扩增循环的Ct值变化来进行天然物抗病毒药理和活性筛选的良好前景。
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公开(公告)号:CN1828275A
公开(公告)日:2006-09-06
申请号:CN200510048724.4
申请日:2005-12-22
申请人: 云南农业大学
摘要: 本发明提供一种烟草丛顶病毒检测方法,属植物保护领域。根据烟草丛顶病毒核苷酸序列设计特异性引物TB2F/TB2R,提取总RNA后采用RT-PCR的方法,直接检测烟草丛顶病毒。本发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术以及总核酸提取法的缺点,方便、特异、灵敏的检测烟草丛顶病毒。
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公开(公告)号:CN107041219A
公开(公告)日:2017-08-15
申请号:CN201611259849.6
申请日:2016-12-30
申请人: 云南农业大学
摘要: 本发明涉及一种生态种植抚育野生弥勒獐牙菜的方法,属中药材野生引种驯化种植技术领域。本方法特征在于选择活力大于50%,籽粒饱满的野生成熟弥勒獐牙菜种子,进行生态种植抚育,并通过对从野生弥勒獐牙菜采集收获的成熟种子进行处理和种植地的选择,提高弥勒獐牙菜种子的萌发率和成活率,增强弥勒獐牙菜的植株的抗逆性,增加产量。本发明的优点在于:操作简便,技术稳定可靠,易于推广;出苗快,育苗周期短;出苗整齐,成苗率高,生产成本低,优质高产,经济效益好,能够生产大量弥勒獐牙菜种子,促进弥勒獐牙菜材人工种植,实现弥勒獐牙菜的可持续发展和利用。
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公开(公告)号:CN100487431C
公开(公告)日:2009-05-13
申请号:CN200510048727.8
申请日:2005-12-22
申请人: 云南农业大学
IPC分类号: G01N21/64 , G01N21/78 , G01N27/447 , C12Q1/00 , G01N1/28
摘要: 本发明提供一种同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒的方法,属植物保护领域。根据烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒核苷酸序列分别设计两对特异性引物TB2F/TB2R(检测烟草丛顶病毒)及TVCPF/TVCPR(检测烟草扭脉病毒)。提取植株组织的总RNA后,采用双重RT-PCR的方法,同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术以及总核酸提取法和传统RT-PCR方法的缺点,只用相当于一次普通RT-PCR的时间和试剂,就可以方便、特异、灵敏的同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。
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公开(公告)号:CN1793859A
公开(公告)日:2006-06-28
申请号:CN200510048727.8
申请日:2005-12-22
申请人: 云南农业大学
IPC分类号: G01N21/64 , G01N21/78 , G01N27/447 , C12Q1/00 , G01N1/28
摘要: 本发明提供一种同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒的方法,属植物保护领域。根据烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒核苷酸序列分别设计两对特异性引物TB2F/TB2R(检测烟草丛顶病毒)及TVCPF/TVCPR(检测烟草扭脉病毒)。提取植株组织的总RNA后,采用双重RT-PCR的方法,同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术以及总核酸提取法和传统RT-PCR方法的缺点,只用相当于一次普通RT-PCR的时间和试剂,就可以方便、特异、灵敏的同步检测烟草丛顶病毒和烟草扭脉病毒。
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公开(公告)号:CN104745524B
公开(公告)日:2018-02-16
申请号:CN201510173987.1
申请日:2015-04-14
申请人: 云南农业大学
IPC分类号: C12N5/04
摘要: 本发明公开了一种植物核糖体的制备方法,包括麦胚的制备、核糖体麦胚抽提物的制备步骤,具体包括:取小麦种子,干燥粉碎过筛,收集麦粉颗粒,悬浮,挑选,洗涤,裂解,超声处理,震摇处理,干燥,置于离心管中,抽提,洗脱,纯化处理,作洗脱曲线,核酸琼脂电泳,鉴定洗脱液,确定含核糖体的麦胚抽提物并收集,得到目标物,置液氮中保存备用。本发明解决了核酸核糖体离体结合体系的构建及药物的抗病毒活性筛选中材料的来源与质量,本发明制备得到的植物核糖体质量纯净,纯度较高且提取完整,可用于病毒TMV‑RNA离体蛋白翻译体系,用于靶向性药物筛选,作为核糖体的一个来源。
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