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公开(公告)号：CN115053983B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210816889.5
申请日：2022-07-12
申请人： 云南省烟草农业科学研究院 , 昆明理工大学
摘要： 一种利用高地芽孢杆菌J54菌株降低烟叶TSNAs的方法，包括以下步骤：A、烟叶粉碎：将烤干后的硃砂烟烟叶研磨成粉末，过筛；B、菌液制备：将甘油管保存的高地芽孢杆菌J54菌种于LB固体培养基上划线，然后置于28‑30℃恒温培养箱中培养，挑选一颗单菌落转接至LB液体培养基中，置于恒温振荡培养箱中培养20‑50h得到发酵菌剂，然后用无菌去离子水将菌剂的OD值调至OD600＝1.8‑2.0，得到菌液；C、发酵：将烟叶粉末加入到无机盐基础培养基中作为菌株的营养源，经高压蒸汽灭菌后再加入菌液，所述菌液的使用量为发酵体系总体积的0.8‑1.2％，置于28‑30℃恒温振荡培养箱中以150‑160rpm/min的转速培养6‑8天或置于35‑37℃恒温振荡培养箱中以150‑160rpm/min的转速培养7‑21天。本发明开拓性的通过接种菌种降低烟叶TSNAs。
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公开(公告)号：CN115989892A
公开(公告)日：2023-04-21
申请号：CN202210848716.1
申请日：2022-07-19
申请人： 云南省烟草农业科学研究院 , 昆明理工大学
IPC分类号： A24B15/20
摘要： 本发明公开一种利用短小芽孢杆菌05‑5402降低烟叶TSNAs的发酵方法，为液态发酵方式，将烘烤后的烟叶磨成粉末，加入无机盐基础培养基中配制液态发酵体系用烟草培养基，在发酵开始时向烟草培养基中加入短小芽孢杆菌05‑5402菌液，置于25‑28℃恒温振荡培养箱中发酵5‑10天，以降解烟叶中TSNAs；短小芽孢杆菌05‑5402菌株的保藏编号为CGMCCNo.7418。本发明通过选用能显著降低烟叶特有亚硝胺的短小芽孢杆菌05‑5402发酵制备菌液并运用于烟叶的液态发酵过程，结合发酵过程中对温度控制和发酵时间的控制，实现烟叶特有亚硝胺的高效定向降解，环境友好、操作简便，具有较高的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN115053983A
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN202210816889.5
申请日：2022-07-12
申请人： 云南省烟草农业科学研究院 , 昆明理工大学
摘要： 一种利用高地芽孢杆菌J54菌株降低烟叶TSNAs的方法，包括以下步骤：A、烟叶粉碎：将烤干后的硃砂烟烟叶研磨成粉末，过筛；B、菌液制备：将甘油管保存的高地芽孢杆菌J54菌种于LB固体培养基上划线，然后置于28‑30℃恒温培养箱中培养，挑选一颗单菌落转接至LB液体培养基中，置于恒温振荡培养箱中培养20‑50h得到发酵菌剂，然后用无菌去离子水将菌剂的OD值调至OD600＝1.8‑2.0，得到菌液；C、发酵：将烟叶粉末加入到无机盐基础培养基中作为菌株的营养源，经高压蒸汽灭菌后再加入菌液，所述菌液的使用量为发酵体系总体积的0.8‑1.2％，置于28‑30℃恒温振荡培养箱中以150‑160rpm/min的转速培养6‑8天或置于35‑37℃恒温振荡培养箱中以150‑160rpm/min的转速培养7‑21天。本发明开拓性的通过接种菌种降低烟叶TSNAs。
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公开(公告)号：CN115058356B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202210628009.1
申请日：2022-06-06
申请人： 云南省烟草农业科学研究院 , 华南理工大学
摘要： 一种用于提升烟草品质的微生物发酵方法，包括以下步骤：(1)以烤烟作为接种源接种于烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h；(2)将步骤(1)中的菌液接入到新鲜的烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h，循环15‑25个周期，获得稳定的烤烟微生物菌群；(3)将步骤(2)获得的微生物菌群接种到新鲜的烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h，得到微生物菌群的种子液；(4)对步骤(3)获得的菌液进行离心并收集菌体；(5)对步骤(4)收集的菌体进行洗涤；(6)对步骤(5)洗涤后的菌体进行重悬，得到菌悬液；(7)往烟叶上喷施步骤(6)的菌悬液，发酵6‑8天。本发明利用从烤烟中富集驯化的微生物菌群进行烟叶发酵，能够多方面提升烟草的品质。
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公开(公告)号：CN115058356A
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN202210628009.1
申请日：2022-06-06
申请人： 云南省烟草农业科学研究院 , 华南理工大学
摘要： 一种用于提升烟草品质的微生物发酵方法，包括以下步骤：(1)以烤烟作为接种源接种于烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h；(2)将步骤(1)中的菌液接入到新鲜的烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h，循环15‑25个周期，获得稳定的烤烟微生物菌群；(3)将步骤(2)获得的微生物菌群接种到新鲜的烟草粉末培养基中，在20‑40℃中培养20‑50h，得到微生物菌群的种子液；(4)对步骤(3)获得的菌液进行离心并收集菌体；(5)对步骤(4)收集的菌体进行洗涤；(6)对步骤(5)洗涤后的菌体进行重悬，得到菌悬液；(7)往烟叶上喷施步骤(6)的菌悬液，发酵6‑8天。本发明利用从烤烟中富集驯化的微生物菌群进行烟叶发酵，能够多方面提升烟草的品质。
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公开(公告)号：CN113430215A
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202110619574.7
申请日：2021-06-03
申请人： 昆明理工大学
摘要： 本发明公开了一种乙酰CoA合成酶基因RKACS1，其核苷酸序列如SEQID NO:1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；该基因是红冬胞酵母（Rhodosporidium kratochvilovae）YM25235中分离获得的乙酰CoA合成酶基因，将该基因转化到红冬孢酵母YM25235中，实验结果显示，乙酰CoA合成酶基因RKACS1的过表达能引起红冬孢酵母YM25235菌株中总类胡萝卜素和油脂含量的增加，本发明通过基因工程手段对微生物进行改造，来提高微生物体内类胡萝卜素和油脂的产量，为大规模商业化生产类胡萝卜素和油脂奠定基础。
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公开(公告)号：CN113430215B
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202110619574.7
申请日：2021-06-03
申请人： 昆明理工大学
摘要： 本发明公开了一种乙酰CoA合成酶基因RKACS1，其核苷酸序列如SEQID NO:1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；该基因是红冬胞酵母（Rhodosporidium kratochvilovae）YM25235中分离获得的乙酰CoA合成酶基因，将该基因转化到红冬孢酵母YM25235中，实验结果显示，乙酰CoA合成酶基因RKACS1的过表达能引起红冬孢酵母YM25235菌株中总类胡萝卜素和油脂含量的增加，本发明通过基因工程手段对微生物进行改造，来提高微生物体内类胡萝卜素和油脂的产量，为大规模商业化生产类胡萝卜素和油脂奠定基础。
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