一种牛副流感3型病毒3种基因型多重RT-PCR检测方法

    公开(公告)号:CN107058630B

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN201710314596.6

    申请日:2017-05-06

    Abstract: 根据Genbank上发表的牛副流感3型病毒(Bovine parainfluenza 3 virus,BPI3V)3种基因型分离株的HN基因进行序列比较分析,参考3个基因型分离株NM09、TVMDL15、SD0835各自的HN基因序列保守区设计特异性引物,建立了在同一体系内检测BPI3V的3种基因型的多重RT‑PCR方法。方法可同时检测出A型BPI3V长度为150bp、B型BPI3V长度为253bp和C型BPI3V长度为342bp的特异性片段,且最低阳性质粒检测分别为0.89×104copies/µL、0.92×104copies/µL、1.53×104copies/µL,具有良好的稳定性和特异性。

    一种鉴别实验用动物牛羊布鲁氏菌的试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN107723374A

    公开(公告)日:2018-02-23

    申请号:CN201710033160.X

    申请日:2017-01-18

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q1/6851 C12Q2531/113 C12Q2545/113

    Abstract: 本发明涉及细菌检测技术领域,具体涉及一种鉴别实验用动物牛羊布鲁氏菌的试剂盒及其检测方法;包括:PCR反应液,标准阳性模板、阴性质控标准品,所述PCR反应液包括鉴定牛种、羊种布鲁氏菌的两对引物:羊布鲁菌上游:5’-CGC TGT CAC TGT TGC AAG TAT G-3’;羊布鲁菌下游:5’-TCT CGC ATG CGC TAT GAT CT-3’;牛布鲁菌上游:5’-TTG AAG TCT GGC GAG CAT GA-3’;牛布鲁菌下游:5’-TCT CGC ATG CGC TAT GAT CT-3’;所述标准阳性模板包括牛种标准阳性模板和羊种标准阳性模板:所述牛种布鲁氏菌标准阳性模板含有牛布鲁氏菌高度保守基因的113个碱基的核苷酸片段构成的pMD19-T重组质粒;所述羊种布鲁氏菌标准阳性模板含有羊布鲁氏菌高度保守基因的128个碱基的核苷酸片段构成的pMD19-T重组质粒,上诉2个重组质粒在大肠杆菌DH5α感受态细胞中增值。

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