一种鉴别实验用动物牛羊布鲁氏菌的试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN107723374A

    公开(公告)日:2018-02-23

    申请号:CN201710033160.X

    申请日:2017-01-18

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q1/6851 C12Q2531/113 C12Q2545/113

    Abstract: 本发明涉及细菌检测技术领域,具体涉及一种鉴别实验用动物牛羊布鲁氏菌的试剂盒及其检测方法;包括:PCR反应液,标准阳性模板、阴性质控标准品,所述PCR反应液包括鉴定牛种、羊种布鲁氏菌的两对引物:羊布鲁菌上游:5’-CGC TGT CAC TGT TGC AAG TAT G-3’;羊布鲁菌下游:5’-TCT CGC ATG CGC TAT GAT CT-3’;牛布鲁菌上游:5’-TTG AAG TCT GGC GAG CAT GA-3’;牛布鲁菌下游:5’-TCT CGC ATG CGC TAT GAT CT-3’;所述标准阳性模板包括牛种标准阳性模板和羊种标准阳性模板:所述牛种布鲁氏菌标准阳性模板含有牛布鲁氏菌高度保守基因的113个碱基的核苷酸片段构成的pMD19-T重组质粒;所述羊种布鲁氏菌标准阳性模板含有羊布鲁氏菌高度保守基因的128个碱基的核苷酸片段构成的pMD19-T重组质粒,上诉2个重组质粒在大肠杆菌DH5α感受态细胞中增值。

    一种牛冠状病毒病毒样颗粒的制备方法

    公开(公告)号:CN118894911A

    公开(公告)日:2024-11-05

    申请号:CN202410985959.9

    申请日:2024-07-23

    Abstract: 本发明公开了一种牛冠状病毒病毒样颗粒的制备方法,涉及牛冠状病毒病毒样颗粒制备技术领域。以BCoV的S、M、E基因片段转化至感受态细胞中,获得杆粒DNA,命名为Bac‑S、Bac‑M、Bac‑E;转染至Sf9细胞液,收集P2代病毒液,裂解,得到重组杆状病毒rBac‑S、rBac‑M、rBac‑E;按照1:1.72:0.36的比例进行混合,滴加于Sf9细胞液中培养,4~5d后收取活力在60~80%时的细胞培养上清,离心,收获上清,纯化,获得BCoV VLPs。通过免疫小鼠后发现BCoV VLPs中高剂量可诱导机体产生体液免疫与细胞免疫,具有一定的免疫原性,为进一步开发牛冠状病毒新型疫苗提供基础。

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