公开(公告)号：CN118792329A

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN202411241570.X

申请日：2024-09-05

申请人： 内蒙古驰影医疗设备有限公司 ,  广西大学

发明人： 王楠 ,  邢浩男 ,  高昕宇 ,  王隽男 ,  罗素兰 ,  朱晓鹏

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C12N15/90 ,  C12N15/89 ,  C12N5/10 ,  G01N33/53 ,  G01N27/49 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种Nav1.8重组质粒、异源表达系统及构建方法和应用。一种用于电压门控钠离子通道Nav1.8异源表达的重组质粒的构建方法包括以下步骤：1）将从背根神经节中提取的总RNA反转录为cDNA；2）以cDNA为模板，通过第一引物、第二引物对Nav1.8进行基因扩增，得到Nav1.8目的基因；3）以步骤2）的Nav1.8目的基因为模板，在该目的基因两端添加同源臂，得到带有同源臂的Nav1.8目的基因；4）将步骤3）的带有同源臂的Nav1.8目的基因和线性化载体进行同源重组，得到同源重组产物；将同源重组产物转化至大肠杆菌中，得到重组质粒。本发明的重组质粒可以在蛙卵中实现异源表达。

公开(公告)号：CN118755746A

公开(公告)日：2024-10-11

申请号：CN202411239839.0

申请日：2024-09-05

申请人： 内蒙古驰影医疗设备有限公司 ,  广西大学

发明人： 邢浩男 ,  王楠 ,  高昕宇 ,  王隽男 ,  朱晓鹏 ,  罗素兰 ,  长孙东亭

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C07K14/435 ,  C12R1/19

摘要： 本发明公开了一种重组质粒、构建方法及μ‑芋螺毒素肽的原核表达方法。一种用于μ‑芋螺毒素肽原核表达的重组质粒的构建方法包括以下步骤：1）将μ‑芋螺毒素肽的氨基酸序列进行改造；2）将改造后的氨基酸序列进行密码子优化，得到优化后的碱基序列；3）根据碱基序列进行基因合成，并克隆到载体上，得到合成质粒；4）将合成质粒经过大肠杆菌进行转化，获得转化质粒；5）将转化质粒通过第一引物、第二引物和第三引物扩增，获得扩增目标产物；6）将线性化的合成质粒和扩增目标产物进行同源重组，得到同源重组产物；将同源重组产物转化到大肠杆菌中，得到重组质粒。本发明的重组质粒有利于μ‑芋螺毒素肽的原核表达。