公开(公告)号：CN108949665A

公开(公告)日：2018-12-07

申请号：CN201810762195.1

申请日：2018-07-12

申请人： 北京林业大学

发明人： 孙明 ,  石雪珺 ,  张启翔 ,  张腾旬 ,  钟剑 ,  陈俊通 ,  程堂仁 ,  潘会堂 ,  王佳

IPC分类号： C12N5/04

CPC分类号： C12N5/04

摘要： 本发明公开了百合花瓣原生质体的制备方法，包括步骤：(1)取带有未开放花蕾的百合植株，进行暗处理；(2)取植株的内轮花瓣，清洗、消毒；(3)向花瓣材料中加入酶解溶液，于暗处真空抽提，然后暗处静置酶解数小时，得到含有花瓣原生质体的酶解液；(4)所得酶解液用W5溶液稀释，网筛过滤，所得滤液经低速离心，弃上清，用W5溶液重悬原生质体沉淀，低速离心，弃上清，重复洗一次；用MMG溶液重悬原生质体沉淀。本发明克服了百合花瓣原生质体分离效率低的问题，有效建立了百合花瓣原生质体制备的方法。

公开(公告)号：CN109136167B

公开(公告)日：2022-03-08

申请号：CN201810762876.8

申请日：2018-07-12

申请人： 北京林业大学

发明人： 孙明 ,  石雪珺 ,  张启翔 ,  张腾旬 ,  钟剑 ,  陈俊通 ,  程堂仁 ,  潘会堂 ,  王佳

IPC分类号： C12N5/04

摘要： 本发明公开了百合叶肉原生质体的制备方法，包括步骤：(1)取带有未开放花蕾的百合植株，进行暗处理；(2)取植株的叶片，清洗、消毒；(3)向叶肉材料中加入酶解溶液，于暗处真空抽提，然后暗处静置酶解数小时，得到含有叶肉原生质体的酶解液；(4)所得酶解液用W5溶液稀释，网筛过滤，所得滤液经低速离心，弃上清，用W5溶液重悬原生质体沉淀，低速离心，弃上清，重复洗一次；用MMG溶液重悬原生质体沉淀。本发明克服了百合叶肉原生质体分离效率低的问题，有效建立了百合叶肉原生质体制备的方法。

公开(公告)号：CN111837689B

公开(公告)日：2022-03-04

申请号：CN202010530599.5

申请日：2020-06-11

申请人： 北京林业大学

发明人： 孙明 ,  石雪珺 ,  李萍 ,  郭彦宏 ,  张腾旬 ,  钟剑 ,  张启翔 ,  程堂仁

IPC分类号： A01G5/00

摘要： 本发明提供一种调控百合萜类化合物含量的方法。所述调控为下调。该方法包括：使百合与BTH接触。本发明通过不同浓度的外源BTH瓶插液处理百合，显著抑制了百合单萜类物质的释放，且BTH处理后的百合花被片的单萜类物质代谢路径中的主要三个关键酶基因LiDXS、LiDXR和LiTPS的表达量在BTH的处理下均有下降。通过下调相关基因和减少萜类物质的释放，最终达到调节百合花香浓度的需求。

公开(公告)号：CN108949665B

公开(公告)日：2022-03-04

申请号：CN201810762195.1

申请日：2018-07-12

申请人： 北京林业大学

发明人： 孙明 ,  石雪珺 ,  张启翔 ,  张腾旬 ,  钟剑 ,  陈俊通 ,  程堂仁 ,  潘会堂 ,  王佳

IPC分类号： C12N5/04

摘要： 本发明公开了百合花瓣原生质体的制备方法，包括步骤：(1)取带有未开放花蕾的百合植株，进行暗处理；(2)取植株的内轮花瓣，清洗、消毒；(3)向花瓣材料中加入酶解溶液，于暗处真空抽提，然后暗处静置酶解数小时，得到含有花瓣原生质体的酶解液；(4)所得酶解液用W5溶液稀释，网筛过滤，所得滤液经低速离心，弃上清，用W5溶液重悬原生质体沉淀，低速离心，弃上清，重复洗一次；用MMG溶液重悬原生质体沉淀。本发明克服了百合花瓣原生质体分离效率低的问题，有效建立了百合花瓣原生质体制备的方法。

公开(公告)号：CN111837689A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010530599.5

申请日：2020-06-11

申请人： 北京林业大学

发明人： 孙明 ,  石雪珺 ,  李萍 ,  郭彦宏 ,  张腾旬 ,  钟剑 ,  张启翔 ,  程堂仁

IPC分类号： A01G5/00

摘要： 本发明提供一种调控百合萜类化合物含量的方法。所述调控为下调。该方法包括：使百合与BTH接触。本发明通过不同浓度的外源BTH瓶插液处理百合，显著抑制了百合单萜类物质的释放，且BTH处理后的百合花被片的单萜类物质代谢路径中的主要三个关键酶基因LiDXS、LiDXR和LiTPS的表达量在BTH的处理下均有下降。通过下调相关基因和减少萜类物质的释放，最终达到调节百合花香浓度的需求。

公开(公告)号：CN109136167A

公开(公告)日：2019-01-04

申请号：CN201810762876.8

申请日：2018-07-12

申请人： 北京林业大学

发明人： 孙明 ,  石雪珺 ,  张启翔 ,  张腾旬 ,  钟剑 ,  陈俊通 ,  程堂仁 ,  潘会堂 ,  王佳

IPC分类号： C12N5/04

CPC分类号： C12N5/04

摘要： 本发明公开了百合叶肉原生质体的制备方法，包括步骤：(1)取带有未开放花蕾的百合植株，进行暗处理；(2)取植株的叶片，清洗、消毒；(3)向叶肉材料中加入酶解溶液，于暗处真空抽提，然后暗处静置酶解数小时，得到含有叶肉原生质体的酶解液；(4)所得酶解液用W5溶液稀释，网筛过滤，所得滤液经低速离心，弃上清，用W5溶液重悬原生质体沉淀，低速离心，弃上清，重复洗一次；用MMG溶液重悬原生质体沉淀。本发明克服了百合叶肉原生质体分离效率低的问题，有效建立了百合叶肉原生质体制备的方法。