一种TRV载体介导病毒诱导梅花花芽基因沉默的方法

    公开(公告)号:CN116904499A

    公开(公告)日:2023-10-20

    申请号:CN202310973152.9

    申请日:2023-08-04

    摘要: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种TRV载体介导病毒诱导基因沉默的方法,采用含有特定目标基因片段的TRV2载体与TRV1载体分别转化到农杆菌感受态中,并将含有这两种载体的单克隆菌体混合,利用侵染液重悬得到混合侵染液,在抽真空状态下侵染梅花花芽,实现对梅花花芽目标基因的沉默。本发明深入探究了提高目标基因沉默效率的关键因素,筛选出了侵染梅花花芽时TRV1和TRV2最佳的混合比例、含有菌体的侵染液的OD600值、侵染时间以及侵染后花芽的培养温度。实施例结果表明,利用本发明提供的方法对梅花花芽进行侵染,可使梅花花芽的目标基因沉默40%以上。

    用于确定月季花瓣释香部位的组织化学染色方法

    公开(公告)号:CN116558927A

    公开(公告)日:2023-08-08

    申请号:CN202310616548.8

    申请日:2023-05-29

    IPC分类号: G01N1/30 G01N21/84

    摘要: 本发明涉及植物生物技术领域,具体涉及用于确定月季花瓣释香部位的组织化学染色方法。本发明提供的组织化学染色方法包括:先采用中性红染色法对月季花瓣的释香部位进行初步定位,再对初步定位确定的组织分别进行苏丹Ⅲ染色、Nadi染色和FeCl3染色。该方法联合使用中性红染色、苏丹Ⅲ染色、Nadi染色和FeCl3染色对月季花瓣中的特定花香物质进行染色,提高了染色效果和成功率,极大地增加了染色结果以及释香部位确定的准确性和全面性,材料用量少、步骤简单,极大地提高了月季花瓣释香部位确定的便捷性和效率,为确定月季花瓣释香部位提供了有效的方法,对于芳香月季的生产应用具有重要意义。

    一种腺毛委陵菜的组织培养方法

    公开(公告)号:CN114711145A

    公开(公告)日:2022-07-08

    申请号:CN202210505299.0

    申请日:2022-05-10

    IPC分类号: A01H4/00

    摘要: 本发明提供一种腺毛委陵菜的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:以幼嫩叶片为外植体,表面灭菌后接种于愈伤组织诱导培养基诱导出愈伤组织,诱导出的愈伤组织接种于不定芽分化培养基分化出不定芽,其中,所述的愈伤组织诱导培养基为MS+NAA0.1~05mg/L+TDZ0.1~1.0mg/L,所述的不定芽分化培养基为MS+NAA0.5mg/L+TDZ0.1~1.0mg/L。本发明首次在委陵菜属植物的组织培养的愈伤组织诱导阶段应用NAA+TDZ的激素组合,该诱导方法能使腺毛委陵菜叶片愈伤组织诱导率达到90.00%以上,且愈伤组织生长状态良好,培养后期表面可见明显芽点。使用本发明的愈伤组织分化培养基,可使分化率达到46.67%,且不定芽生长健壮,能够为腺毛委陵菜组培成功奠定良好基础。

    一种芍药带侧芽芽基组织培养获取丛生芽的方法

    公开(公告)号:CN114403006A

    公开(公告)日:2022-04-29

    申请号:CN202210098319.7

    申请日:2022-01-27

    IPC分类号: A01H4/00

    摘要: 本发明公开了一种芍药带侧芽芽基组织培养获取丛生芽的方法,属于组织培养技术领域,所述方法的步骤如下:(1)挖取芍药地下芽,放入真空袋抽真空放入4℃冰箱保存。(2)消毒:洗洁精浸泡,流水冲洗后放入加有羧苄青霉素的锥形瓶摇30min,超净台中使用75%酒精、4%次氯酸钠、无菌水依次消毒;(3)启动培养:切除顶芽,选择带良好侧芽的芽基接种入启动培养基中。培养基为WPM添加6‑BA 1.0mg/L、赤霉素0.5mg/L和抗生素羧苄青霉素或硫酸链霉素或头孢霉素钠;(4)增殖培养:培养基为WPM+6‑BA浓度1mg/L+PVP浓度0.2‑1.5g/L。本发明通过添加抗生素并优化培养基配方,有效降低芍药带侧芽芽基组织培养的污染率,提高丛生芽的增殖率,以便于分切丛生芽苗,诱导生根。

    百合叶肉原生质体的制备方法

    公开(公告)号:CN109136167B

    公开(公告)日:2022-03-08

    申请号:CN201810762876.8

    申请日:2018-07-12

    IPC分类号: C12N5/04

    摘要: 本发明公开了百合叶肉原生质体的制备方法,包括步骤:(1)取带有未开放花蕾的百合植株,进行暗处理;(2)取植株的叶片,清洗、消毒;(3)向叶肉材料中加入酶解溶液,于暗处真空抽提,然后暗处静置酶解数小时,得到含有叶肉原生质体的酶解液;(4)所得酶解液用W5溶液稀释,网筛过滤,所得滤液经低速离心,弃上清,用W5溶液重悬原生质体沉淀,低速离心,弃上清,重复洗一次;用MMG溶液重悬原生质体沉淀。本发明克服了百合叶肉原生质体分离效率低的问题,有效建立了百合叶肉原生质体制备的方法。

    一种紫薇原生质体的制备方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN113652390A

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN202111108086.6

    申请日:2021-09-22

    摘要: 本发明涉及植物原生质体技术领域,具体涉及一种紫薇原生质体的制备方法。本发明针对紫薇提供原生质体的制备方法,该方法以紫薇叶片为材料,将紫薇叶片去除下表皮,将去除下表皮的叶片在酶解液中酶解处理,得到酶解溶液,将所述酶解溶液经分离得到叶肉酶解产物,经洗涤后分离得到叶肉原生质体。该方法能够高效地从紫薇叶片中提取获得原生质体,制备的原生质体具有较高的完整性和活性,为紫薇的分子育种提供了基础。