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公开(公告)号：CN110265089B
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN201910538333.2
申请日：2019-06-20
申请人： 北京科技大学
IPC分类号： G16B45/00 , G16B40/00 , C12Q1/6844
摘要： 本发明提供一种基于智能设备辅助的核酸定量分析方法及其应用，所述方法通过设计构建由核酸目标物引发对pH敏感的核酸扩增反应体系，采用pH指示剂甲酚红，变色范围为黄色7.2‑粉红色8.8，实现肉眼对核酸的可视化快速分析；在此基础上，利用智能设备辅助的三原色图像扫描模式，以智能设备检测终端实现对核酸的快速检测及定量分析，所用到的智能设备包括智能手机、平板等具有拍照功能的智能设备。
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公开(公告)号：CN110265089A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910538333.2
申请日：2019-06-20
申请人： 北京科技大学
IPC分类号： G16B45/00 , G16B40/00 , C12Q1/6844
摘要： 本发明提供一种基于智能设备辅助的核酸定量分析方法及其应用，所述方法通过设计构建由核酸目标物引发对pH敏感的核酸扩增反应体系，采用pH指示剂甲酚红，变色范围为黄色7.2-粉红色8.8，实现肉眼对核酸的可视化快速分析；在此基础上，利用智能设备辅助的三原色图像扫描模式，以智能设备检测终端实现对核酸的快速检测及定量分析，所用到的智能设备包括智能手机、平板等具有拍照功能的智能设备。
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公开(公告)号：CN114807316B
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202210239301.4
申请日：2022-03-11
申请人： 北京科技大学
IPC分类号： C12Q1/6825 , C12Q1/70 , C12R1/93
摘要： 本发明提供了一种无核酸扩增可视化的RNA定量检测方法，包括：S1：设计制备RNA交联的DNA水凝胶；S2：制备自驱动DNA水凝胶传感器；S3：设计合成的特异性的crRNA；S4：将crRNA、Cas13a蛋白和靶标RNA共同孵育含有已知浓度的靶标RNA分子样品溶液；S5：将自驱动DNA水凝胶传感器水平浸入含有已知浓度的靶标RNA分子样品溶液；S6：通过S5中样品溶液在毛细管中的移动距离，构建靶标RNA分子浓度与移动距离之间的线性对应关系；S7：进行可视化检测及定量分析，本发明利用溶液在毛细管中的距离便可实现无需核酸扩增，可视化的RNA定量检测，为RNA为靶标的分子诊断、疾病检测提供新工具。
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公开(公告)号：CN116144738B
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202211020049.4
申请日：2022-08-24
申请人： 北京科技大学
IPC分类号： C12Q1/6825
摘要： 本发明提供了一种单微球空间限域增强的CRISPR/Cas12a传感系统及其应用，所述传感系统包括：单微球空间限域增强反应器和CRISPR/Cas12a体系，所述单微球空间限域增强反应器包括单微球和单链DNA荧光报告探针；所述单微球用于增加局部分子浓度、促进CRISPR/Cas12a反式切割反应效率和负载单链DNA荧光报告探针；所述单链DNA荧光报告探针用于输出荧光信号；所述CRISPR/Cas12a体系用于特异性识别Activator DNA和通过反式酶切活性水解负载在单微球表面的单链DNA荧光报告探针，在单微球表面产生荧光信号；所述单链DNA荧光报告探针固定在单微球外表面，所述CRISPR/Cas12a体系反式切割反应在单微球空间限域增强反应器表面进行本发明设计简单、无需核酸扩增就可以实现单分子水平目标DNA定量检测。
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公开(公告)号：CN116144738A
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202211020049.4
申请日：2022-08-24
申请人： 北京科技大学
IPC分类号： C12Q1/6825
摘要： 本发明提供了一种单微球空间限域增强的CRISPR/Cas12a传感系统及其应用，所述传感系统包括：单微球空间限域增强反应器和CRISPR/Cas12a体系，所述单微球空间限域增强反应器包括单微球和单链DNA荧光报告探针；所述单微球用于增加局部分子浓度、促进CRISPR/Cas12a反式切割反应效率和负载单链DNA荧光报告探针；所述单链DNA荧光报告探针用于输出荧光信号；所述CRISPR/Cas12a体系用于特异性识别Activator DNA和通过反式酶切活性水解负载在单微球表面的单链DNA荧光报告探针，在单微球表面产生荧光信号；所述单链DNA荧光报告探针固定在单微球外表面，所述CRISPR/Cas12a体系反式切割反应在单微球空间限域增强反应器表面进行本发明设计简单、无需核酸扩增就可以实现单分子水平目标DNA定量检测。
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公开(公告)号：CN115386658A
公开(公告)日：2022-11-25
申请号：CN202211021369.1
申请日：2022-08-24
申请人： 北京科技大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12Q1/06 , C12R1/93
摘要： 本发明提供了一种无核酸扩增的单分子RNA定量检测方法及系统，包括：S1：制备单链RNA荧光报告探针功能化修饰的微球；S2：设计靶标RNA特异性的crRNA；S3：将已知浓度的靶标RNA、crRNA、Cas13蛋白、反应缓冲溶液和S1制备微球在适宜的温度下共同孵育；S4：将S3孵育后的微球进行荧光成像，建立微球荧光强度和RNA浓度之间线性对应关系；S5：利用S4建立的线性对应关系对样品中RNA定量检测。本发明所述的RNA检测方法可实现单分子水平RNA定量分析，无需逆转录及核酸预扩增步骤，检测条件温且操作步骤简单，为RNA诊断分析提供了一种高灵敏度简便、通用新策略。
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公开(公告)号：CN114807316A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210239301.4
申请日：2022-03-11
申请人： 北京科技大学
IPC分类号： C12Q1/6825 , C12Q1/70 , C12R1/93
摘要： 本发明提供了一种无核酸扩增可视化的RNA定量检测方法，包括：S1：设计制备RNA交联的DNA水凝胶；S2：制备自驱动DNA水凝胶传感器；S3：设计合成的特异性的crRNA；S4：将crRNA、Cas13a蛋白和靶标RNA共同孵育含有已知浓度的靶标RNA分子样品溶液；S5：将自驱动DNA水凝胶传感器水平浸入含有已知浓度的靶标RNA分子样品溶液；S6：通过S5中样品溶液在毛细管中的移动距离，构建靶标RNA分子浓度与移动距离之间的线性对应关系；S7：进行可视化检测及定量分析，本发明利用溶液在毛细管中的距离便可实现无需核酸扩增，可视化的RNA定量检测，为RNA为靶标的分子诊断、疾病检测提供新工具。
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公开(公告)号：CN115386658B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202211021369.1
申请日：2022-08-24
申请人： 北京科技大学
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6806 , C12Q1/06 , C12R1/93
摘要： 本发明提供了一种无核酸扩增的单分子RNA定量检测方法及系统，包括：S1：制备单链RNA荧光报告探针功能化修饰的微球；S2：设计靶标RNA特异性的crRNA；S3：将已知浓度的靶标RNA、crRNA、Cas13蛋白、反应缓冲溶液和S1制备微球在适宜的温度下共同孵育；S4：将S3孵育后的微球进行荧光成像，建立微球荧光强度和RNA浓度之间线性对应关系；S5：利用S4建立的线性对应关系对样品中RNA定量检测。本发明所述的RNA检测方法可实现单分子水平RNA定量分析，无需逆转录及核酸预扩增步骤，检测条件温且操作步骤简单，为RNA诊断分析提供了一种高灵敏度简便、通用新策略。
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