公开(公告)号：CN101892262A

公开(公告)日：2010-11-24

申请号：CN201010000731.8

申请日：2010-01-15

Applicant: 北京科技大学

Inventor： 杜宏武 ,  李传宝 ,  金海明 ,  华甜

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N15/18 ,  C12N15/12 ,  A61K48/00 ,  A61P5/00

Abstract: 本发明是IRES介导的GH四种亚型与IGF-I双顺反子真核共表达载体的构建与应用，根据GH和IGF-I的mRNA序列和蛋白序列对比得出GH四种亚型和IGF-I的编码序列设计引物，以实验室的GH和IGF-I的DNA为模板通过PCR的方法得到GH四种亚型和IGF-I的目标DNA，将PCR产物连接到pBS-T载体中，获得GH和IGF-I的TA载体，然后将TA载体经XhO I和EcoR I双酶切将GH四种亚型的基因定向插入pCI-IRES中，成功构建了GH四种亚型的重组质粒pCI-22-IRES、pCI-20-IRES、pCI-17-IRES和pCI-5-IRES。然后将IGF-I的TA载体经Sam I和Not I双酶切将IGF-I的基因分别定向插入上述重组质粒中，成功构建了IRES介导的人生长激素(GH)四种亚型与IGF-I的双顺反子真核共表达载体：pCI-22-IRES-IGF-I、pCI-20-IRES-IGF-I、pCI-17-IRES-IGF-I、pCI-5-IRES-IGF-I。为进一步研究GH的四种亚型和IGF-I基因的生物学特性和功能提供了方便有效的基本资料。

公开(公告)号：CN101602794A

公开(公告)日：2009-12-16

申请号：CN200910083899.7

申请日：2009-05-08

Applicant: 北京科技大学

Inventor： 杜宏武 ,  金海明 ,  王爽 ,  李传宝

IPC: C07K7/08 ,  C07K16/22

Abstract: 本发明公开了一种人MGF多肽及其抗体制备方法，涉及以抗体为特征的体外试验用的生物制品。本发明利用经典的表位预测软件DNAstar进行综合分析，确定抗原表位分析与拮抗位置，确定第76到第88位为该抗体的靶标，其氨基酸序列为QRHTDMPKTQKYQ，经过多肽合成，多肽与载体蛋白交联，免疫家兔制备抗体和抗体纯化，得到目标抗体。本发明制备的高质量多肽抗体效价高、亲和力强，可与天然人MGF分子发生特异性结合反应。用多肽制备抗体的成本较常规的重组抗原制备抗体方法低，抗体特异性好，经亲和层析纯化后可以用于各种酶免检测和WB试验要求，可用于建立体外免疫分析。

公开(公告)号：CN101603963A

公开(公告)日：2009-12-16

申请号：CN200910085580.8

申请日：2009-05-26

Applicant: 北京科技大学

Inventor： 王爽 ,  杜宏武 ,  金海明 ,  李传宝

IPC: G01N33/551 ,  G01N33/52

Abstract: 一种高通量斑点酶联免疫阵列检测方法，用于检测药物滥用，属于免疫分析测定领域。本方法将膜相材质制成适当大小的膜片，根据实际检测需要排布膜相阵列，粘覆于固体支持物上，在同一膜片上点入不同的药物抗原，通过多种药物的混合抗体进行高通量筛选。与传统检测试剂盒的单人份测定方式相比，本方法不仅可对测试样品多种非相关性分析物测试，还可对一组关系紧密的分析物进行测试比较，从而挖掘复杂数据间的具体信息，有效解决了目前对于药物滥用的测试通常一次只能针对一种药物，而对于大规模人群以及滥用者可能在一段时间内同时吸食几种药物，进行多种药物排查时费时费力和需要大量检测用品的问题。