公开(公告)号：CN111849852A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010936756.2

申请日：2020-09-08

Applicant: 华东理工大学 ,  华东理工大学青岛创新研究院

Inventor： 田锡炜 ,  张一凡 ,  杭海峰 ,  王永红 ,  储炬 ,  夏建业 ,  庄英萍

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/113 ,  C12N15/74 ,  C12N15/90 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明涉及一种高光学纯L-乳酸工程菌的构建方法，包括多个步骤，本发明选取拟干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei NCBIO01)作为出发菌株，参照其全基因组序列，基于CRISPR/Cas9基因编辑方法构建了pNcasA-△ldhD敲除质粒，无痕敲除D-乳酸脱氢酶(ldhD)的同时过表达一个L-乳酸脱氢酶基因(ldhL)，得到一株高光学纯L-乳酸工程菌，使其L-乳酸光学纯度从原来的95.6％提高到99％以上，并且生产速率达到5.5g/L/h以上，成为潜在的工业L-乳酸高效生产菌株。