-
公开(公告)号：CN103374541A
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201210110348.7
申请日：2012-04-16
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明公开了一种阿嗪霉素B的基因工程菌WSD2CP及制备方法和应用，其步骤：A、StreptomycessahachiroiATCC33158中aziD2基因缺失突变株构建：将用于缺失aziD2基因的重组质粒导入到野生型菌株，获得aziD2基因缺失突变菌株，其总DNA能扩增出1.0kb的特征带；B、aziD2基因表达质粒的构建：aziD2基因表达质粒的构建是基于链霉菌表达质粒进行，用XbaI+SpeI酶切处理aziD2基因片段后，以正确的方向插入到载体组成型强启动子PermE*下游的XbaI位点上，获得aziD2基因的表达质粒；C、aziD2基因互补表达菌株的构建：通过接合转移的方法将aziD2基因表达质粒导入到aziD2基因缺失的菌株中，以互补菌株的总DNA为模板，扩增出1.1kb的特征带，得到互补aziD2基因的菌株WSD2CP。方法易行，操作简便，增强该基因的表达量，从而提高了阿嗪霉素B的产量。
-
公开(公告)号：CN103290032A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310177365.7
申请日：2013-05-14
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明公开了一种硫藤黄链霉菌抗生素调控基因ORF4，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示，或与SEQ ID NO：1所示核苷酸编码相同蛋白的核苷酸序列。本发明还公开了所述基因在制备抗生素高产链霉菌基因突变株中的应用以及一种提高链霉菌抗生素产量的方法。本发明通过使用硫藤黄链霉菌抗生素调控基因ORF4，解决了传统链霉菌育种的高工作量、高盲目性的问题，在多种抗生素产生菌中发挥作用，得到了利用基因工程培育的抗生素高产菌株，应用前景广阔。
-
公开(公告)号：CN112852858B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202110167055.1
申请日：2021-02-05
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明公开了一种链霉菌分泌型表达载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域，本发明提供了一种链霉菌分泌型表达载体，所述链霉菌分泌型表达载体中包含如SEQ ID NO.1所示的序列，该表达载体具体为：将强启动子PA4以及特定的分泌信号肽与待表达目的基因N端融合，并插入至常规载体中构建得到重组质粒，可使目的基因表达并将表达的目的蛋白分泌至胞外，在重组菌株的发酵培养过程中，可以直接从发酵液中收集得到分泌表达的外源目的蛋白。所述载体的构建方法简单快速，并且可直接将目的蛋白分泌至胞外，利于目的蛋白的收集，避免了异源蛋白积累造成的细胞毒性。
-
公开(公告)号：CN112852858A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110167055.1
申请日：2021-02-05
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明公开了一种链霉菌分泌型表达载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域，本发明提供了一种链霉菌分泌型表达载体，所述链霉菌分泌型表达载体中包含如SEQ ID NO.1所示的序列，该表达载体具体为：将强启动子PA4以及特定的分泌信号肽与待表达目的基因N端融合，并插入至常规载体中构建得到重组质粒，可使目的基因表达并将表达的目的蛋白分泌至胞外，在重组菌株的发酵培养过程中，可以直接从发酵液中收集得到分泌表达的外源目的蛋白。所述载体的构建方法简单快速，并且可直接将目的蛋白分泌至胞外，利于目的蛋白的收集，避免了异源蛋白积累造成的细胞毒性。
-
公开(公告)号：CN112921045B
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202110154771.6
申请日：2021-02-04
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/56 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12N15/31 , C12N15/76 , C12N1/21 , C12P19/46 , C12R1/55
摘要： 本发明涉及一种氨基糖苷类抗生素的生物合成基因簇，其核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，或与SEQ ID NO.1所示核苷酸编码相同蛋白的核苷酸序列。本发明还公开了该基因簇在宿主变铅青链霉菌ZX1中异源表达系统的构建以及制备表达产物的方法。并且，本发明获得的可产生有效霉素A的基因工程菌株具有显著抑制丝状真菌生长的能力。本发明所提供的基因簇可应用于药物产生菌的基因工程育种，在医药或农药开发中具有广阔的应用前景。
-
公开(公告)号：CN103290032B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201310177365.7
申请日：2013-05-14
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明公开了一种硫藤黄链霉菌抗生素调控基因ORF4，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示，或与SEQ ID NO：1所示核苷酸编码相同蛋白的核苷酸序列。本发明还公开了所述基因在制备抗生素高产链霉菌基因突变株中的应用以及一种提高链霉菌抗生素产量的方法。本发明通过使用硫藤黄链霉菌抗生素调控基因ORF4，解决了传统链霉菌育种的高工作量、高盲目性的问题，在多种抗生素产生菌中发挥作用，得到了利用基因工程培育的抗生素高产菌株，应用前景广阔。
-
公开(公告)号：CN112921045A
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN202110154771.6
申请日：2021-02-04
申请人： 华中农业大学
IPC分类号： C12N15/56 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12N15/31 , C12N15/76 , C12N1/21 , C12P19/46 , C12R1/55
摘要： 本发明涉及一种氨基糖苷类抗生素的生物合成基因簇，其核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，或与SEQ ID NO.1所示核苷酸编码相同蛋白的核苷酸序列。本发明还公开了该基因簇在宿主变铅青链霉菌ZX1中异源表达系统的构建以及制备表达产物的方法。并且，本发明获得的可产生有效霉素A的基因工程菌株具有显著抑制丝状真菌生长的能力。本发明所提供的基因簇可应用于药物产生菌的基因工程育种，在医药或农药开发中具有广阔的应用前景。
-
公开(公告)号：CN103374541B
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201210110348.7
申请日：2012-04-16
申请人： 华中农业大学
摘要： 本发明公开了一种阿嗪霉素B的基因工程菌WSD2CP及制备方法和应用，其步骤：A、StreptomycessahachiroiATCC33158中aziD2基因缺失突变株构建：将用于缺失aziD2基因的重组质粒导入到野生型菌株，获得aziD2基因缺失突变菌株，其总DNA能扩增出1.0kb的特征带；B、aziD2基因表达质粒的构建：aziD2基因表达质粒的构建是基于链霉菌表达质粒进行，用XbaI+SpeI酶切处理aziD2基因片段后，以正确的方向插入到载体组成型强启动子PermE*下游的XbaI位点上，获得aziD2基因的表达质粒；C、aziD2基因互补表达菌株的构建：通过接合转移的方法将aziD2基因表达质粒导入到aziD2基因缺失的菌株中，以互补菌株的总DNA为模板，扩增出1.1kb的特征带，得到互补aziD2基因的菌株WSD2CP。方法易行，操作简便，增强该基因的表达量，从而提高了阿嗪霉素B的产量。
-
-
-
-
-
-
-
搜索结果
8 条记录 (耗时 0.02 秒)
