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公开(公告)号：CN118598989A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410825590.5
申请日：2024-06-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒单克隆抗体5D7及其在制备猪流行性腹泻病毒阻断ELISA抗体检测试剂或试剂盒中的应用，猪流行性腹泻病毒单克隆抗体5D7可用于猪流行性腹泻病毒抗体阻断ELISA检测。本发明的目的在于提供一株抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体，与抗原结合能力强、反应性好、特异性好，可用于建立猪流行性腹泻病毒抗体检测方法，能够有效评价抗体水平。本发明建立的猪流行性腹泻病毒抗体阻断ELISA检测方法能够对血清、乳汁中的猪流行性腹泻病毒抗体进行定量检测，该方法检测限度为1﹕2560，批间差异系数与批内差异系数均小于10％，符合率良好，运用该方法能够评价疫苗的免疫效果，在PED的防控中至关重要。
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公开(公告)号：CN117711485A
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202311397671.1
申请日：2023-10-24
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了猪80K功能位点基因芯片及其应用，首次在利用猪基因组启动子、增强子、编码区关键突变等信息设计基因芯片，基于大规模多组学高通量测序数据，对功能位点按照重要性进行分类，开发以功能位点为主的功能位点基因芯片，打破了连锁依赖理论，解决了现有商业化芯片由于不同群体间因连锁程度不同，在不同群体间的通用性较差的问题。本芯片还具有捕获特性高、成本低、灵活，适用于不同品种猪种遗传育种研究及选种选配等商业化应用。
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公开(公告)号：CN115948363B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202211045564.8
申请日：2022-08-26
Applicant: 武汉影子基因科技有限公司 , 华中农业大学
Abstract: 转座酶片段化位点基本无偏好性，无宿主污染，本发明公开了Tn5转座酶突变体及其制备方 更好地满足了高通量建库要求。法和应用，对Tn5转座酶的402和403位点的氨基酸进行突变，第402位的半胱氨酸突变为色氨酸，第403位的谷氨酰胺突变为赖氨酸，与野生型Tn5(56)对比文件Jiangang Hu 等.“Identification ofnovel biofilm genes in avian pathogenicEscherichia coli by Tn5 transposon mutantlibrary”《.World J Microbiol Biotechnol》.2022,第38卷(第8期),doi: 10.1007/s11274-022-03314-4.唐江涛 等.“细菌转座子 Tn5 转座机理的研究进展”《.广西农业生物科学》.2003,(第4期),第316-321页.
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公开(公告)号：CN116987675A
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202310910055.5
申请日：2023-07-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒CHN‑YC及其二联灭活疫苗和制备方法，CHN‑YC的保藏编号为CCTCC NO:V202371。该疫苗包括灭活的鸭坦布苏病毒CHN‑YC和灭活的新型鸭呼肠孤病毒QR‑China/2020。本发明得到了强致病力的鸭坦布苏病毒毒株，对5日龄SPF鸭接毒量为107TCID50时，致死率达55％。且该毒株免疫原性强，适宜用作疫苗株。本发明的二联灭活疫苗性质较为稳定，使得注射了疫苗的鸭子体内能够产生高水平血清中和抗体，进而使得免疫新型鸭呼肠孤病毒和鸭坦布苏病毒的效果较佳，从而使得注射了二联灭活疫苗的鸭子不容易患由两种病毒产生的疾病，运用该疫苗可同时免疫两种疾病。
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公开(公告)号：CN115746130B
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202211259773.2
申请日：2022-10-14
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种鸭呼肠孤病毒单克隆抗体NDRV‑σC及其检测试剂盒和应用；它是由保藏编号为CCTCC NO：C2022276的杂交瘤细胞株NDRV‑MAb‑7C6所分泌得到。所述试剂盒包括上述的鸭呼肠孤病毒单克隆抗体NDRV‑σC。本发明采用原核表达系统表达和纯化了鸭呼肠孤病毒σC蛋白，该蛋白主要以包涵体的形式存在，纯化效果良好。本发明经间接Elisa筛选到的单克隆抗体7C6，具有很强的特异性和很高的效价，效价可达28。本发明使用单克隆抗体7C6作为阻断抗体建立了阻断ELISA抗体检测的方法，该方法能特异性地识别NDRV阳性血清，而与其它鸭常见病抗体阳性血清无交叉反应，具有良好的特异性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111471745B
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202010239831.X
申请日：2020-03-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9系统介导的DNA靶向捕获方法，针对目标DNA区域的上下游分别设计一条sgRNA，在两条sgRNA序列的3'末端添加不同的捕获序列和一段与sgRNA反向互补的序列从而构成pegRNA，当pegRNA‑Cas9蛋白复合物靶向结合目标DNA时，通过pegRNA介导的定点插入，在目标DNA区域上下游分别插入不同的捕获序列，然后通过含捕获序列的引物进行PCR扩增，从DNA文库或全基因组中靶向富集并分离目标DNA，可直接用于后续的捕获测序。本发明提供的方法与其它富集方法相比，简单、快速、特异性强、灵敏度高，在DNA序列分析上有广阔的应用优势。
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公开(公告)号：CN111471745A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010239831.X
申请日：2020-03-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9系统介导的DNA靶向捕获方法，针对目标DNA区域的上下游分别设计一条sgRNA，在两条sgRNA序列的3'末端添加不同的捕获序列和一段与sgRNA反向互补的序列从而构成pegRNA，当pegRNA-Cas9蛋白复合物靶向结合目标DNA时，通过pegRNA介导的定点插入，在目标DNA区域上下游分别插入不同的捕获序列，然后通过含捕获序列的引物进行PCR扩增，从DNA文库或全基因组中靶向富集并分离目标DNA，可直接用于后续的捕获测序。本发明提供的方法与其它富集方法相比，简单、快速、特异性强、灵敏度高，在DNA序列分析上有广阔的应用优势。
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公开(公告)号：CN119120654A
公开(公告)日：2024-12-13
申请号：CN202411240125.1
申请日：2024-09-04
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6806 , C40B50/06 , C12Q1/6886 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于修饰Tn5的甲基化目标区域捕获测序文库的构建方法及其应用，所述构建方法基于Tn5转座子的转座特性，直接将修饰的带有双端barcode的测序接头包埋进Tn5转座酶中，形成一批带有不同序列标签的Tn5转座子；利用不同的Tn5转座子对多个样本进行片段化可以使得不同样本携带有不同的序列标签，以达到区分样本的目的，实现多个低起始量样本的混合，通过对混合的文库处理最终获得捕获序列的测序结果。相较于传统的甲基化目标区域捕获方法，本发明不需要任何复杂精密的仪器，即可实现批量检测大量样品，克服了常规甲基化捕获测序方法在此方面的局限。此外，该方法仅仅需要1天时间即可将低起始量样本转变为高质量的待测序样品。
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公开(公告)号：CN115785283B
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202211373863.4
申请日：2022-11-02
Applicant: 武汉影子基因科技有限公司 , 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了PAG‑Tn5转座酶突变体及其应用，PAG‑Tn5转座酶突变体是对PAG‑Tn5转座酶的669和670位点的氨基酸进行突变，第669位的半胱氨酸突变为色氨酸，第670位的谷氨酰胺突变为赖氨酸，与野生型PAG‑Tn5转座酶相比，突变后的PAG‑Tn5转座酶构建后的文库核小体特征峰更为明显。测序显示PAG‑Tn5转座酶突变体片段化位点基本无偏好性，无宿主污染，更好地满足了CUT&Tag技术的要求。
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公开(公告)号：CN115353564B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210944925.6
申请日：2022-08-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/535 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种鸭坦布苏病毒单克隆抗体EDIII‑Mab及其检测试剂盒和应用；该单克隆抗体是由保藏编号为CCTCC NO：C2022176的杂交瘤细胞株DTMUV‑Mab‑6A7所分泌得到。单抗作为检测抗体的阻断ELISA，建立检测试剂盒，该试剂盒能特异性地识别DTMUV阳性血清，而与其它鸭中常见病毒抗体阳性血清无交叉反应；重复性实验表明，批间和批内的变异系数均小于10％；敏感性结果显示该方法的检测限度可达1：1280，且与间接ELISA的符合率为79.198％，与IFA的符合率为82.707％，符合率为100％；表明该试剂盒在临床应用中具有良好的可行性。
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