公开(公告)号：CN109627313B

公开(公告)日：2020-07-10

申请号：CN201710927849.7

申请日：2017-10-09

Applicant: 华中科技大学

Inventor： 曹轩 ,  刘安冬 ,  余悦琪 ,  邓婕 ,  罗丹妮

IPC: C07K14/47 ,  C07K19/00 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  A61K38/17 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明对IRS‑1的PTB结构域野生型蛋白的氨基酸残基进行定点突变，将第99位的R突变为L,将第102位的S突变为A，构建出突变体载体并进行蛋白表达和纯化，在大肠杆菌中表达IRS‑1的PTB融合蛋白突变体GST‑PTB‑R99L/S102A，大大增强了其跟酪氨酸残基磷酸化的IGF‑1R特异性结合的亲和力。构建重组质粒表达IRS‑1的PTB融合蛋白突变体与细胞穿透肽(Arg)9的融合蛋白(Arg)9‑GST‑PTB‑MUTANT能够穿透并进入癌细胞，取代癌细胞中的内源性IRS‑1蛋白跟IGF‑1R的结合，阻断内源性IRS‑1蛋白涉及的多条信号通路，抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭，具有显著的抗肿瘤效果。

公开(公告)号：CN109627313A

公开(公告)日：2019-04-16

申请号：CN201710927849.7

申请日：2017-10-09

Applicant: 华中科技大学

Inventor： 曹轩 ,  刘安冬 ,  余悦琪 ,  邓婕 ,  罗丹妮

IPC: C07K14/47 ,  C07K19/00 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  A61K38/17 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明对IRS‑1的PTB结构域野生型蛋白的氨基酸残基进行定点突变，将第99位的R突变为L,将第102位的S突变为A，构建出突变体载体并进行蛋白表达和纯化，在大肠杆菌中表达IRS‑1的PTB融合蛋白突变体GST‑PTB‑R99L/S102A，大大增强了其跟酪氨酸残基磷酸化的IGF‑1R特异性结合的亲和力。构建重组质粒表达IRS‑1的PTB融合蛋白突变体与细胞穿透肽(Arg)9的融合蛋白(Arg)9‑GST‑PTB‑MUTANT能够穿透并进入癌细胞，取代癌细胞中的内源性IRS‑1蛋白跟IGF‑1R的结合，阻断内源性IRS‑1蛋白涉及的多条信号通路，抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭，具有显著的抗肿瘤效果。