公开(公告)号：CN110129246B

公开(公告)日：2021-02-19

申请号：CN201910355278.3

申请日：2019-04-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙坚 ,  李龚 ,  黄昊旻 ,  邹文瑾 ,  吉俊柔 ,  刁晓苑 ,  江颖琳 ,  何玉张 ,  廖晓萍 ,  刘雅红

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/10 ,  G01N21/64 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一株供体菌、其构建方法与应用以及质粒抑制剂筛选方法。所述的供体菌包含自杀型荧光质粒和pCRISPR‑LUX质粒，该供体菌本身不表达荧光；而所述的自杀型荧光质粒可通过接合转移进入受体菌，由于接合子脱离了失去核酸内切酶活性的Cas9蛋白的抑制而可以表达荧光。本发明还提供了所述的供体菌的构建方法及应用，所述的应用为通过分析接合子的荧光表达情况对接合转移效率进行定量分析或质粒抑制剂的筛选。同时，本发明还提供了一种基于CRISPR/dCas9筛选质粒抑制剂的方法，可实现高通量筛选抑制耐药质粒接合转移的物质，筛选过程高效、方便、快捷，适用范围较为广泛，为克服细菌耐药性提供新的思路和方法。

公开(公告)号：CN111265506A

公开(公告)日：2020-06-12

申请号：CN202010136216.6

申请日：2020-03-02

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙坚 ,  黄昊旻 ,  邹雯瑾 ,  江颖琳 ,  刁晓苑 ,  吉俊柔 ,  李龚

IPC: A61K31/20 ,  A61K31/201 ,  A61P31/04

Abstract: 本发明提供了棉籽油酸在制备质粒接合转移抑制剂和/或抗菌药物中的应用。本发明首次发现了棉籽油酸可有效抑制耐药质粒接合转移，在安全浓度范围内，棉籽油酸抗质粒接合转移效率达80％以上，并且抗质粒转移效果最好。同时，本发明研究发现棉籽油酸半数细胞毒性浓度为5.401mM，较现有技术中的其他植物油酸毒性更低、更为安全。本发明还发现了棉籽油酸有良好的抗菌活性，尤其是对革兰氏阳性菌的抗菌活性显著，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN110129246A

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201910355278.3

申请日：2019-04-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙坚 ,  李龚 ,  黄昊旻 ,  邹文瑾 ,  吉俊柔 ,  刁晓苑 ,  江颖琳 ,  何玉张 ,  廖晓萍 ,  刘雅红

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/10 ,  G01N21/64 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一株供体菌、其构建方法与应用以及质粒抑制剂筛选方法。所述的供体菌包含自杀型荧光质粒和pCRISPR-LUX质粒，该供体菌本身不表达荧光；而所述的自杀型荧光质粒可通过接合转移进入受体菌，由于接合子脱离了失去核酸内切酶活性的Cas9蛋白的抑制而可以表达荧光。本发明还提供了所述的供体菌的构建方法及应用，所述的应用为通过分析接合子的荧光表达情况对接合转移效率进行定量分析或质粒抑制剂的筛选。同时，本发明还提供了一种基于CRISPR/dCas9筛选质粒抑制剂的方法，可实现高通量筛选抑制耐药质粒接合转移的物质，筛选过程高效、方便、快捷，适用范围较为广泛，为克服细菌耐药性提供新的思路和方法。