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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111265506A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN202010136216.6
申请日：2020-03-02
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K31/20 , A61K31/201 , A61P31/04
Abstract: 本发明提供了棉籽油酸在制备质粒接合转移抑制剂和/或抗菌药物中的应用。本发明首次发现了棉籽油酸可有效抑制耐药质粒接合转移，在安全浓度范围内，棉籽油酸抗质粒接合转移效率达80％以上，并且抗质粒转移效果最好。同时，本发明研究发现棉籽油酸半数细胞毒性浓度为5.401mM，较现有技术中的其他植物油酸毒性更低、更为安全。本发明还发现了棉籽油酸有良好的抗菌活性，尤其是对革兰氏阳性菌的抗菌活性显著，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN110129246B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201910355278.3
申请日：2019-04-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一株供体菌、其构建方法与应用以及质粒抑制剂筛选方法。所述的供体菌包含自杀型荧光质粒和pCRISPR‑LUX质粒，该供体菌本身不表达荧光；而所述的自杀型荧光质粒可通过接合转移进入受体菌，由于接合子脱离了失去核酸内切酶活性的Cas9蛋白的抑制而可以表达荧光。本发明还提供了所述的供体菌的构建方法及应用，所述的应用为通过分析接合子的荧光表达情况对接合转移效率进行定量分析或质粒抑制剂的筛选。同时，本发明还提供了一种基于CRISPR/dCas9筛选质粒抑制剂的方法，可实现高通量筛选抑制耐药质粒接合转移的物质，筛选过程高效、方便、快捷，适用范围较为广泛，为克服细菌耐药性提供新的思路和方法。
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公开(公告)号：CN110117605B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201910282847.6
申请日：2019-04-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于IS26插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法。该自杀型质粒的构建方法如下：通过AflII和XhoI双酶切pUC26‑tpm质粒和pUC26‑RP4质粒，然后将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建p26‑RP4质粒；然后通过EcoRI和Spel双酶切p26‑RP4质粒和pBBR1MCS4‑LuxCDAB质粒，再将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建能表达荧光的自杀型质粒。将本发明中获得的自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞，得到荧光标记的大肠杆菌；最后将其与目标菌株共培养，可构建荧光菌株。本发明方法效率高，可用于构建耐药菌株、药动药效学评价或筛选药物中。
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公开(公告)号：CN110129246A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910355278.3
申请日：2019-04-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一株供体菌、其构建方法与应用以及质粒抑制剂筛选方法。所述的供体菌包含自杀型荧光质粒和pCRISPR-LUX质粒，该供体菌本身不表达荧光；而所述的自杀型荧光质粒可通过接合转移进入受体菌，由于接合子脱离了失去核酸内切酶活性的Cas9蛋白的抑制而可以表达荧光。本发明还提供了所述的供体菌的构建方法及应用，所述的应用为通过分析接合子的荧光表达情况对接合转移效率进行定量分析或质粒抑制剂的筛选。同时，本发明还提供了一种基于CRISPR/dCas9筛选质粒抑制剂的方法，可实现高通量筛选抑制耐药质粒接合转移的物质，筛选过程高效、方便、快捷，适用范围较为广泛，为克服细菌耐药性提供新的思路和方法。
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公开(公告)号：CN110117605A
公开(公告)日：2019-08-13
申请号：CN201910282847.6
申请日：2019-04-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于IS26插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法。该自杀型质粒的构建方法如下：通过AflII和XhoI双酶切pUC26-tpm质粒和pUC26-RP4质粒，然后将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建p26-RP4质粒；然后通过EcoRI和Spel双酶切p26-RP4质粒和pBBR1MCS4-LuxCDAB质粒，再将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建能表达荧光的自杀型质粒。将本发明中获得的自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞，得到荧光标记的大肠杆菌；最后将其与目标菌株共培养，可构建荧光菌株。本发明方法效率高，可用于构建耐药菌株、药动药效学评价或筛选药物中。
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