公开(公告)号：CN117660510A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311519617.X

申请日：2023-11-15

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙娟 ,  冯赛祥 ,  戴宁 ,  林依珍 ,  胡佳莲 ,  赵一珊 ,  曹雪薇 ,  贺格

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种副鸡禽杆菌基因缺失与筛选系统的构建方法，具体包括如下步骤：步骤10：将质粒pSJ001导入副鸡禽杆菌，经与抗性基因相对应的抗生素筛选，得到第一次同源重组的菌株；步骤20：将质粒pSJ002导入第一次重组菌株，经蓝白斑筛选系统筛选得到第二次同源重组的菌株；该方法应用到菌株筛选后，通过正向筛选使用所对应的抗生素筛选出含有lacZ基因和抗性基因的目标菌株，反向筛选使用X‑Gal蓝白系统进行筛选。两种方法的结合后，可以直观、简便且高效地筛选出副鸡禽杆菌基因缺失突变株。同时本发明还公开了该采用重组表达载体系统敲除副鸡禽杆菌的基因的应用。

公开(公告)号：CN119307529A

公开(公告)日：2025-01-14

申请号：CN202411299265.6

申请日：2024-09-18

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 戴宁 ,  冯赛祥 ,  罗昌启 ,  李倩瑜 ,  胡佳莲 ,  王珂 ,  张沁莹 ,  罗琛滢

IPC: C12N15/74 ,  C07K14/195 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  A61K39/102 ,  A61P31/04 ,  C12R1/21

Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种副猪嗜血杆菌内毒素减毒疫苗菌株的制备方法，采用含优化后的LpxE基因的质粒电击转化到副猪嗜血杆菌中，得到内毒素减毒疫苗菌株；所述优化后的LpxE基因的序列如SEQ ID NO.1所示。其通过对LpxE基因采用不同的策略进行优化，得到全新的质粒，使副猪嗜血杆菌成功实现内毒素减毒。同时，本发明还公开了该菌株应用。