一种高效表达重组鸡α干扰素的工程菌

    公开(公告)号:CN108220214A

    公开(公告)日:2018-06-29

    申请号:CN201711444595.X

    申请日:2017-12-27

    摘要: 本发明公开了一种高效表达重组鸡α干扰素的工程菌,其获得包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对Genebank中发表的鸡α干扰素基因序列进行密码子优化合成;S2、根据优化后的鸡α干扰素基因,设计特异性引物;S3、将鸡α干扰素基因PCR扩增;PCR产物经EcoRI、HindIII双酶切克隆到原核表达载体pET‑41a;S4、将测序正确的pET‑41a‑ChIFN‑α重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞;S5、重组鸡α干扰素的原核表达及抗病毒活性测定。本发明公开的工程菌可以实现鸡α干扰素的高效表达,获得的鸡α干扰素抗病毒活性达到1.71×107UI/mg。

    一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用

    公开(公告)号:CN105331601A

    公开(公告)日:2016-02-17

    申请号:CN201510790960.7

    申请日:2015-11-17

    摘要: 本发明公开了一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用,属于细菌遗传改造技术领域。本发明中通过在上游引物中添加USS序列ACCGCTTG,使的PCR产物含有这个USS序列,副猪嗜血杆菌会识别并带入菌体内部进行重组,无需构建突变常用的自杀质粒,本方法把抗性基因直接引入到PCR产物中,直接用PCR产物就能实现筛选,同时在引物中引入USS,细菌就会直接吞噬这个重组模版用于同源重组。本发明的基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法在构建副猪嗜血杆菌双组分系统突变体中应用。

    一种提高禽用CpG产量的方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118147030A

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202410321892.9

    申请日:2024-03-20

    摘要: 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种提高禽用CpG产量的方法。本发明提供了一种大豆蛋白胨的应用量范围为16~30g/L,酵母粉的应用量范围为8~20g/L,甘油为8~25g/L的培养基。使用该培养基培养CpG合成工程菌,可以有效提高CpG的产量。此外,通过将溶氧量维持在30%,通过采取指数流法加补料策略进行高密度发酵,以及30℃到42℃的变温培养策略,进一步的提高了CpG的产量,最高能达到853mg/L的最高质粒产量,平均质粒产量达到538mg/L。对比摇瓶培养的质粒产量,本发明的发酵工艺将质粒产量提高了50~100倍。