公开(公告)号：CN108169479A

公开(公告)日：2018-06-15

申请号：CN201711463072.X

申请日：2017-12-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  王锋 ,  沈玉栋 ,  张瑾如 ,  杨金易 ,  李然 ,  梁一凡 ,  肖治理

IPC: G01N33/543 ,  G01N33/535 ,  G01N21/31 ,  G01N33/02

Abstract: 本发明公开了一种检测氟苯尼考的免疫学试剂盒。本发明首先以氟苯尼考衍生物与载体蛋白的偶联物为氟苯尼考完全抗原，然后免疫骆驼科动物制备了氟苯尼考免疫检测抗体。本发明制备获得的高亲和力的氟苯尼考骆驼科动物抗体，氟苯尼考的羊驼多克隆抗体为1:32000，氟苯尼考的双峰驼多克隆抗体效价为1:256000；可研究开发出氟苯尼考酶联免疫检测试剂盒，该试剂盒对氟苯尼考检测限为0.3 ng/mL，半数抑制浓度为13.3 ng/mL，能够实现氟苯尼考的高通量、快速、灵高敏的检测要求。该试剂盒可用于畜禽、水产品等动物性食品中氟苯尼考的残留检测，操作简便、灵敏度高、价格低廉，非常适合大量样品的筛查，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN108169479B

公开(公告)日：2020-08-07

申请号：CN201711463072.X

申请日：2017-12-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  王锋 ,  沈玉栋 ,  张瑾如 ,  杨金易 ,  李然 ,  梁一凡 ,  肖治理

IPC: C07K16/06 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种检测氟苯尼考的免疫学试剂盒。本发明首先以氟苯尼考衍生物与载体蛋白的偶联物为氟苯尼考完全抗原，然后免疫骆驼科动物制备了氟苯尼考免疫检测抗体。本发明制备获得的高亲和力的氟苯尼考骆驼科动物抗体，氟苯尼考的羊驼多克隆抗体为1:32000，氟苯尼考的双峰驼多克隆抗体效价为1:256000；可研究开发出氟苯尼考酶联免疫检测试剂盒，该试剂盒对氟苯尼考检测限为0.3 ng/mL，半数抑制浓度为13.3 ng/mL，能够实现氟苯尼考的高通量、快速、灵高敏的检测要求。该试剂盒可用于畜禽、水产品等动物性食品中氟苯尼考的残留检测，操作简便、灵敏度高、价格低廉，非常适合大量样品的筛查，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN108250110A

公开(公告)日：2018-07-06

申请号：CN201711484698.9

申请日：2017-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李然 ,  王弘 ,  徐振林 ,  林泽佳 ,  杨金易 ,  韦晓群 ,  孙远明

IPC: C07C317/32 ,  C07K14/795 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/535 ,  G01N21/33

Abstract: 本发明公开了氟苯尼考及甲砜霉素抗原、抗体及其同时检测酶联免疫分析方法。本发明的一种半抗原FFM是通过氟苯尼考分子结构的苄羟基上衍生马来酸半酯偶联手臂得到，另一种半抗原FFD是在氟苯尼考分子苄羟基上衍生丁二酸半酯偶联手臂得到，分别与载体蛋白偶联得到氟苯尼考人工抗原作为包被原和免疫原；制备了检测抗体，并建立了酶联免疫检测方法，对于氟苯尼考的IC50=1.32 ng/mL，线性检测范围为0.29～5.91 ng/mL，对于甲砜霉素IC50=2.13 ng/mL，线性检测范围为0.41～11.20 ng/mL，具有灵敏度高，特异性好等显著优势，可用于快速检测食品中残留的氟苯尼考及氟苯尼考胺，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN108218747A

公开(公告)日：2018-06-29

申请号：CN201711484702.1

申请日：2017-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李然 ,  王弘 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  韦晓群 ,  孙远明

IPC: C07C317/40 ,  C07C315/04 ,  C07K14/795 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/94

Abstract: 本发明公开了氟苯尼考及其类似物的半抗原、人工抗原与单克隆抗体及其酶联免疫检测方法。本发明首先在氟苯尼考分子苄羟基上衍生丁二酸半酯偶联手臂得到氟苯尼考半抗原，进一步与载体蛋白偶联得到氟苯尼考人工抗原，然后免疫动物获得氟苯尼考单克隆抗体，可用于氟苯尼考及其类似物氟苯尼考胺、甲砜霉素等的检测。本发明利用所述单克隆抗体建立了氟苯尼考的酶联免疫检测方法，可用于氟苯尼考残留的特异性检测，该方法对于氟苯尼考的IC50=5.85 ng/mL，线性检测范围为1.67～20.49 ng/mL，具有灵敏度高，特异性好等显著优势，可用于快速检测食品中残留的氟苯尼考，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN108558718B

公开(公告)日：2021-04-23

申请号：CN201711489726.6

申请日：2017-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李然 ,  王弘 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  韦晓群 ,  孙远明

IPC: C07C317/40 ,  C07K14/795 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  G01N33/531 ,  G01N33/94

Abstract: 本发明公开了氟苯尼考及氟苯尼考胺抗原、抗体及其同时检测酶联免疫分析方法。本发明利用氟苯尼考作为半抗原与载体蛋白偶联获得人工抗原，作为包被原；同时在氟苯尼考分子苄羟基上衍生丁二酸半酯偶联手臂得到氟苯尼考半抗原，与载体蛋白偶联得到氟苯尼考人工抗原，作为免疫原；制备了检测抗体，并建立了酶联免疫检测方法，对于氟苯尼考的IC50=37.10 ng/mL，线性检测范围为12.03～114.49 ng/mL，对于氟苯尼考胺IC50=45.3 ng/mL，线性检测范围为10.76～190.69 ng/mL，具有灵敏度高，特异性好等显著优势，可用于快速检测食品中残留的氟苯尼考及氟苯尼考胺，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN108558718A

公开(公告)日：2018-09-21

申请号：CN201711489726.6

申请日：2017-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李然 ,  王弘 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  韦晓群 ,  孙远明

IPC: C07C317/40 ,  C07K14/795 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  G01N33/531 ,  G01N33/94

Abstract: 本发明公开了氟苯尼考及氟苯尼考胺抗原、抗体及其同时检测酶联免疫分析方法。本发明利用氟苯尼考作为半抗原与载体蛋白偶联获得人工抗原，作为包被原；同时在氟苯尼考分子苄羟基上衍生丁二酸半酯偶联手臂得到氟苯尼考半抗原，与载体蛋白偶联得到氟苯尼考人工抗原，作为免疫原；制备了检测抗体，并建立了酶联免疫检测方法，对于氟苯尼考的IC50=37.10 ng/mL，线性检测范围为12.03～114.49 ng/mL，对于氟苯尼考胺IC50=45.3 ng/mL，线性检测范围为10.76～190.69 ng/mL，具有灵敏度高，特异性好等显著优势，可用于快速检测食品中残留的氟苯尼考及氟苯尼考胺，具有广阔的应用前景。