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公开(公告)号：CN111850139A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010788014.X
申请日：2020-08-07
申请人： 华南农业大学 , 温氏食品集团股份有限公司
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11
摘要： 本发明属于分子生物技术和分子标记技术领域，具体涉及一种位于猪12号染色体上与猪单睾形成相关的分子标记及应用。所述的位于猪12号染色体上与猪单睾形成相关的分子标记的SNP位点对应于国际猪基因组11.1版本参考序列12号染色体上第26276230位T>C突变。该分子标记是通过全基因组关联分析得到，该分子标记与杜洛克猪单睾性状显著相关。本发明还提供了一种用于鉴定该分子标记的引物对，利用该分子标记和引物对可建立高效准确的分子标记辅助育种技术，将其应用于种猪单睾性状遗传改良中，从而保障企业利润，增加核心竞争力。
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公开(公告)号：CN110846337B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN201911170226.5
申请日：2019-11-26
申请人： 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC分类号： C12N15/62 , C12N15/873 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种多功能融合酶XABT基因及构建方法和应用，该多功能融合酶XABT基因，可以同时表达表达木聚糖酶、植酸酶、葡聚糖酶和纤维素酶，并具有高效的酶活，该多功能融合酶强化了葡聚糖酶活性，对含葡聚糖较高的大麦、燕麦、黑麦、小麦及其麸皮类日粮具有更强的消化能力。亦可以用于制备节粮环保转基因经济动物，消除饲料中主要抗营养因子，达到提高饲料消化率，减少污染排放的目的。
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公开(公告)号：CN110846337A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911170226.5
申请日：2019-11-26
申请人： 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC分类号： C12N15/62 , C12N15/873 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种多功能融合酶XABT基因及构建方法和应用，该多功能融合酶XABT基因，可以同时表达表达木聚糖酶、植酸酶、葡聚糖酶和纤维素酶，并具有高效的酶活，该多功能融合酶强化了葡聚糖酶活性，对含葡聚糖较高的大麦、燕麦、黑麦、小麦及其麸皮类日粮具有更强的消化能力。亦可以用于制备节粮环保转基因经济动物，消除饲料中主要抗营养因子，达到提高饲料消化率，减少污染排放的目的。
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公开(公告)号：CN109628494A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201910062079.3
申请日：2019-01-23
申请人： 华南农业大学 , 温氏食品集团股份有限公司
IPC分类号： C12N15/90 , C12N9/22 , A01K67/027
CPC分类号： C12N15/907 , A01K67/0276 , A01K2207/15 , A01K2217/07 , A01K2227/108 , A01K2267/02 , C12N9/22
摘要： 本发明涉及一种基于CRISPR/Cas9基因编辑技术的冠状病毒抗性克隆猪及其制备方法，该克隆猪的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)获取特异性靶向pAPN基因第2外显子和第3外显子的gRNA序列，其核苷酸序列依次如SEQ ID No.1‑2所示；制备获得对应gRNA序列的CRISPR‑Cas9打靶载体PX330‑pAPN2和PX330‑pAPN3；(2)将获得的打靶载体PX330‑pAPN2或打靶载体PX330‑pAPN3转入猪胎儿成纤维细胞中，获得pAPN基因编辑细胞系；(3)对pAPN基因编辑细胞系进行体细胞核移植操作，并将重构胚胎移植入代孕受体，通过自然妊娠出生所述克隆猪。本发明可获得猪冠状病毒受体pAPN完全缺失表达的克隆猪，具有抵抗猪冠状病毒感染的能力。
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公开(公告)号：CN110846336B
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN201911170220.8
申请日：2019-11-26
申请人： 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种多功能融合酶XAET和多功能融合酶定点整合真核特异表达载体及其构建方法，该多功能融合酶可以表达木聚糖酶，植酸酶，双葡聚糖酶和双纤维素酶活性，将其用于后期制备相应的转基因动物，该动物将自身分泌这些酶，起到消化饲料中木聚糖、植酸、葡聚糖，纤维素等抗营养因子，达到提高饲料利用率，减少污染排放的功效。同时，解决刚性肽介导两个以上融合蛋白共表达时相互干扰问题；解决2A连接肽多基因共表达效率低，基因位置确定困难问题，及多基因共表达中2A多肽残基对上游酶蛋白干扰的问题，达到增强多基因高效共表达效率的目的。此外，还可以解决单个来源的纤维素酶基因表达和水解纤维素效果差的问题。
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公开(公告)号：CN107988388B
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201711310397.4
申请日：2017-12-11
申请人： 华南农业大学 , 广东温氏食品集团股份有限公司
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种与猪悬蹄过度生长性状相关的SNP标记，所述SNP标记的位点为国际猪参考基因组11.1版本13号染色体上第133470903个核苷酸位点，该位点的碱基是T或G。本发明通过优选该SNP的优势等位基因，能够减少大白悬蹄过度生长的发生，加快遗传进展，有效提高种猪育种的经济效益。
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公开(公告)号：CN108285906A
公开(公告)日：2018-07-17
申请号：CN201711477805.5
申请日：2017-12-29
申请人： 广东温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC分类号： C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
CPC分类号： C12N15/85 , A01K67/0275 , A01K2227/108 , A01K2267/02
摘要： 本发明公开了一种定点整合外源DNA转基因猪的构建方法，包括以下步骤：S1、安全靶点筛选及靶点绑定gRNA切割效率验证；S2、构建同源臂供体质粒，并获得定点整合转基因细胞系；S3、外源DNA定点整合转基因猪的构建。本发明在供体质粒中引入gRNA靶点序列，利用细胞内转录gRNA诱导Cas9核酸酶切割靶基因同时，线性化供体质粒，大大简化试验步骤，节约人力，且有利于提高共转染效率。本发明定点整合所用载体较少，同源臂大小适中，更有利于获得转基因细胞系，将高效定点整合技术，高活力定点转基因细胞培育技术与体细胞克隆技术结合，有利于定点整合转基因动物高效制备，加快转基因动物新品种培育速度。
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公开(公告)号：CN111850139B
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202010788014.X
申请日：2020-08-07
申请人： 华南农业大学 , 温氏食品集团股份有限公司
IPC分类号： C12Q1/6888 , C12N15/11
摘要： 本发明属于分子生物技术和分子标记技术领域，具体涉及一种位于猪12号染色体上与猪单睾形成相关的分子标记及应用。所述的位于猪12号染色体上与猪单睾形成相关的分子标记的SNP位点对应于国际猪基因组11.1版本参考序列12号染色体上第26276230位T>C突变。该分子标记是通过全基因组关联分析得到，该分子标记与杜洛克猪单睾性状显著相关。本发明还提供了一种用于鉴定该分子标记的引物对，利用该分子标记和引物对可建立高效准确的分子标记辅助育种技术，将其应用于种猪单睾性状遗传改良中，从而保障企业利润，增加核心竞争力。
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公开(公告)号：CN108285906B
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN201711477805.5
申请日：2017-12-29
申请人： 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC分类号： C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种定点整合外源DNA转基因猪的构建方法，包括以下步骤：S1、安全靶点筛选及靶点绑定gRNA切割效率验证；S2、构建同源臂供体质粒，并获得定点整合转基因细胞系；S3、外源DNA定点整合转基因猪的构建。本发明在供体质粒中引入gRNA靶点序列，利用细胞内转录gRNA诱导Cas9核酸酶切割靶基因同时，线性化供体质粒，大大简化试验步骤，节约人力，且有利于提高共转染效率。本发明定点整合所用载体较少，同源臂大小适中，更有利于获得转基因细胞系，将高效定点整合技术，高活力定点转基因细胞培育技术与体细胞克隆技术结合，有利于定点整合转基因动物高效制备，加快转基因动物新品种培育速度。
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公开(公告)号：CN110846336A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911170220.8
申请日：2019-11-26
申请人： 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种多功能融合酶XAET和多功能融合酶定点整合真核特异表达载体及其构建方法，该多功能融合酶可以表达木聚糖酶，植酸酶，双葡聚糖酶和双纤维素酶活性，将其用于后期制备相应的转基因动物，该动物将自身分泌这些酶，起到消化饲料中木聚糖、植酸、葡聚糖，纤维素等抗营养因子，达到提高饲料利用率，减少污染排放的功效。同时，解决刚性肽介导两个以上融合蛋白共表达时相互干扰问题；解决2A连接肽多基因共表达效率低，基因位置确定困难问题，及多基因共表达中2A多肽残基对上游酶蛋白干扰的问题，达到增强多基因高效共表达效率的目的。此外，还可以解决单个来源的纤维素酶基因表达和水解纤维素效果差的问题。
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