一种糖胺聚糖合成酶的冻干保护剂及其应用

    公开(公告)号:CN114277012B

    公开(公告)日:2024-02-23

    申请号:CN202111674176.1

    申请日:2021-12-31

    IPC分类号: C12N9/10

    摘要: 本发明公开了一种糖胺聚糖合成酶的冻干保护剂及其应用,所述冻干保护剂由海藻糖、羟丙基‑β‑环糊精和四氢嘧啶组成。本发明冻干保护剂的配方与传统的冻干保护剂配方不同,该配方成分简单,冻干后的糖胺聚糖合成酶结构疏松,形状外观规则,溶解度好,尤其是冻干后糖胺聚糖合成酶的酶活力与冻干前酶活力相差不大,且在4℃和25℃下储存90天后酶活力可保持90%以上,这表明本发明冻干保护剂可以有效降低糖胺聚糖合成酶在冻干过程中的活力损失,有利于该类酶的储存和运输。

    一种糖胺聚糖合成酶的冻干保护剂及其应用

    公开(公告)号:CN114277012A

    公开(公告)日:2022-04-05

    申请号:CN202111674176.1

    申请日:2021-12-31

    IPC分类号: C12N9/10

    摘要: 本发明公开了一种糖胺聚糖合成酶的冻干保护剂及其应用,所述冻干保护剂由海藻糖、羟丙基‑β‑环糊精和四氢嘧啶组成。本发明冻干保护剂的配方与传统的冻干保护剂配方不同,该配方成分简单,冻干后的糖胺聚糖合成酶结构疏松,形状外观规则,溶解度好,尤其是冻干后糖胺聚糖合成酶的酶活力与冻干前酶活力相差不大,且在4℃和25℃下储存90天后酶活力可保持90%以上,这表明本发明冻干保护剂可以有效降低糖胺聚糖合成酶在冻干过程中的活力损失,有利于该类酶的储存和运输。

    肝素骨架合酶及其突变体与应用

    公开(公告)号:CN114958790B

    公开(公告)日:2023-07-21

    申请号:CN202110192424.2

    申请日:2021-02-20

    摘要: 本发明涉及一种肝素骨架合酶及其突变体与应用。本发明中的肝素骨架合酶来源于动物奈瑟菌,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,重组表达水平是现有大肠杆菌K5肝素骨架合酶KfiA重组表达水平的6.8倍,每升发酵液的总酶活是肝素骨架合酶KfiA的5.22倍。对上述肝素骨架合酶氨基酸序列的第16位、25位、30位、111位、165位、172位进行定点突变,所得肝素骨架合酶突变体均具有较高的表达水平。本发明中的肝素骨架合酶及其突变体提高了肝素骨架合成中GlcNAc转移合成效率,极大地促进了肝素仿生合成应用化发展,为糖胺聚糖的研究发展开启了全新的一页。

    肝素骨架合酶及其突变体与应用

    公开(公告)号:CN114958790A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202110192424.2

    申请日:2021-02-20

    摘要: 本发明涉及一种肝素骨架合酶及其突变体与应用。本发明中的肝素骨架合酶来源于动物奈瑟菌,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,重组表达水平是现有大肠杆菌K5肝素骨架合酶KfiA重组表达水平的6.8倍,每升发酵液的总酶活是肝素骨架合酶KfiA的5.22倍。对上述肝素骨架合酶氨基酸序列的第16位、25位、30位、111位、165位、172位进行定点突变,所得肝素骨架合酶突变体均具有较高的表达水平。本发明中的肝素骨架合酶及其突变体提高了肝素骨架合成中GlcNAc转移合成效率,极大地促进了肝素仿生合成应用化发展,为糖胺聚糖的研究发展开启了全新的一页。