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公开(公告)号：CN114958790B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202110192424.2
申请日：2021-02-20
申请人： 山东大学 , 华熙生物科技股份有限公司
摘要： 本发明涉及一种肝素骨架合酶及其突变体与应用。本发明中的肝素骨架合酶来源于动物奈瑟菌，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，重组表达水平是现有大肠杆菌K5肝素骨架合酶KfiA重组表达水平的6.8倍，每升发酵液的总酶活是肝素骨架合酶KfiA的5.22倍。对上述肝素骨架合酶氨基酸序列的第16位、25位、30位、111位、165位、172位进行定点突变，所得肝素骨架合酶突变体均具有较高的表达水平。本发明中的肝素骨架合酶及其突变体提高了肝素骨架合成中GlcNAc转移合成效率，极大地促进了肝素仿生合成应用化发展，为糖胺聚糖的研究发展开启了全新的一页。
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公开(公告)号：CN114277012B
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202111674176.1
申请日：2021-12-31
申请人： 华熙生物科技股份有限公司 , 山东大学
IPC分类号： C12N9/10
摘要： 本发明公开了一种糖胺聚糖合成酶的冻干保护剂及其应用，所述冻干保护剂由海藻糖、羟丙基‑β‑环糊精和四氢嘧啶组成。本发明冻干保护剂的配方与传统的冻干保护剂配方不同，该配方成分简单，冻干后的糖胺聚糖合成酶结构疏松，形状外观规则，溶解度好，尤其是冻干后糖胺聚糖合成酶的酶活力与冻干前酶活力相差不大，且在4℃和25℃下储存90天后酶活力可保持90%以上，这表明本发明冻干保护剂可以有效降低糖胺聚糖合成酶在冻干过程中的活力损失，有利于该类酶的储存和运输。
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公开(公告)号：CN114277012A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111674176.1
申请日：2021-12-31
申请人： 华熙生物科技股份有限公司 , 山东大学
IPC分类号： C12N9/10
摘要： 本发明公开了一种糖胺聚糖合成酶的冻干保护剂及其应用，所述冻干保护剂由海藻糖、羟丙基‑β‑环糊精和四氢嘧啶组成。本发明冻干保护剂的配方与传统的冻干保护剂配方不同，该配方成分简单，冻干后的糖胺聚糖合成酶结构疏松，形状外观规则，溶解度好，尤其是冻干后糖胺聚糖合成酶的酶活力与冻干前酶活力相差不大，且在4℃和25℃下储存90天后酶活力可保持90%以上，这表明本发明冻干保护剂可以有效降低糖胺聚糖合成酶在冻干过程中的活力损失，有利于该类酶的储存和运输。
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公开(公告)号：CN114958790A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202110192424.2
申请日：2021-02-20
申请人： 山东大学 , 华熙生物科技股份有限公司
摘要： 本发明涉及一种肝素骨架合酶及其突变体与应用。本发明中的肝素骨架合酶来源于动物奈瑟菌，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，重组表达水平是现有大肠杆菌K5肝素骨架合酶KfiA重组表达水平的6.8倍，每升发酵液的总酶活是肝素骨架合酶KfiA的5.22倍。对上述肝素骨架合酶氨基酸序列的第16位、25位、30位、111位、165位、172位进行定点突变，所得肝素骨架合酶突变体均具有较高的表达水平。本发明中的肝素骨架合酶及其突变体提高了肝素骨架合成中GlcNAc转移合成效率，极大地促进了肝素仿生合成应用化发展，为糖胺聚糖的研究发展开启了全新的一页。
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公开(公告)号：CN118530960A
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202410709126.X
申请日：2024-06-03
申请人： 华熙生物科技股份有限公司
摘要： 本发明提供了一种α‑1,3‑岩藻糖基转移酶突变体及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明通过突变获得了α‑1,3岩藻糖基转移酶突变体，并筛选获得了能够提高α‑1,3‑岩藻糖基转移酶酶活的有益突变，具体包括第126位、第150位、第158位、第160位和第224位突变。并且，本申请将α‑1,3岩藻糖基转移酶突变体转入工程菌中进行表达，进而获得了用于3‑岩藻糖基乳糖高效生产的新菌种，有效推进3‑岩藻糖基乳糖大规模工业化生产进程。另外，本申请提供的工程菌用于生产3‑岩藻糖基乳糖时发酵全程无需添加抗生素和诱导，具有放大生产潜力，且具有较高的商业应用价值和良好的产业化前景。
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公开(公告)号：CN118028206A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410236736.2
申请日：2024-03-01
申请人： 华熙生物科技股份有限公司 , 华熙生物科技(天津)有限公司
IPC分类号： C12N1/21 , C12N9/24 , C12N15/56 , C12N15/61 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/53 , C12N15/70 , C12P19/02 , C12R1/19
摘要： 本发明提供了一种用于制备L‑岩藻糖的工程菌及其应用，涉及微生物基因工程技术领域。本发明以改造后的高产2′‑岩藻糖基乳糖的工程菌为出发菌株，对L‑岩藻糖的竞争通路进行敲除，并在此位点整合高效的α‑L‑岩藻糖苷酶，最终得到的重组大肠杆菌在摇瓶发酵时不添加抗生素的条件下实现高产量生产L‑岩藻糖，为L‑岩藻糖提供了一种新的工程菌，有利于L‑岩藻糖的大规模工业生产。
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公开(公告)号：CN111551513B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202010547909.4
申请日：2020-06-16
申请人： 华熙生物科技股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种快速测定发酵液中透明质酸含量的方法，该方法将发酵液进行吸附纯化，将吸附纯化后的上清液稀释后进行酶解，使发酵液中的透明质酸彻底酶解为4,5‑不饱和双糖，然后检测酶解前后发酵液的紫外吸收值，将酶解前后发酵液紫外吸收值的差值带入4,5‑不饱和双糖浓度与紫外吸收值的标准曲线中，计算得到发酵液中透明质酸的含量。该方法操作简便，专一性高，无需对发酵液中的透明质酸进行纯化，批次检测样品数量多，可以广泛应用于透明质酸发酵领域中对透明质酸含量的检测，为透明质酸发酵工艺的优化与过程监控提供了便捷高效的工具。
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公开(公告)号：CN112353800A9
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202011249538.8
申请日：2020-11-10
申请人： 华熙生物科技股份有限公司 , 山东华熙海御生物医药有限公司
IPC分类号： A61K31/4172 , A61K47/36 , A61K47/26 , A61P39/06 , A61P17/16
摘要： 本申请提供透明质酸或其盐和/或海藻糖在稳定麦角硫因中的用途，一种用于稳定麦角硫因的添加剂，所述添加剂包括透明质酸或其盐和/或海藻糖，以及一种组合物，所述组合物包括麦角硫因、透明质酸或其盐和海藻糖。本发明所提供的透明质酸或其盐和海藻糖相较其他辅料，可明显缓解高温对麦角硫因的破坏，提高麦角硫因粉末产品的收率。本发明得到的组合物具有较好的抗氧化作用和抗凋亡功效。同时使用透明质酸或其盐和海藻糖复合作辅料得到的组合物对细胞内活性氧自由基的抑制和清除作用明显高于单一的透明质酸或其盐或海藻糖作辅料得到的组合物。
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公开(公告)号：CN112353800A
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN202011249538.8
申请日：2020-11-10
申请人： 华熙生物科技股份有限公司 , 山东华熙海御生物医药有限公司
IPC分类号： A61K31/4172 , A61K47/36 , A61K47/26 , A61P39/06 , A61P17/16
摘要： 本申请提供透明质酸或其盐和/或海藻糖在稳定麦角硫因中的用途，一种用于稳定麦角硫因的添加剂，所述添加剂包括透明质酸或其盐和/或海藻糖，以及一种组合物，所述组合物包括麦角硫因、透明质酸或其盐和海藻糖。本发明所提供的透明质酸或其盐和海藻糖相较其他辅料，可明显缓解高温对麦角硫因的破坏，提高麦角硫因粉末产品的收率。本发明得到的组合物具有较好的抗氧化作用和抗凋亡功效。同时使用透明质酸或其盐和海藻糖复合作辅料得到的组合物对细胞内活性氧自由基的抑制和清除作用明显高于单一的透明质酸或其盐或海藻糖作辅料得到的组合物。
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公开(公告)号：CN109939027A
公开(公告)日：2019-06-28
申请号：CN201910157074.9
申请日：2019-03-01
申请人： 华熙生物科技股份有限公司 , 山东华熙海御生物医药有限公司
IPC分类号： A61K8/9728 , A61K8/49 , A61Q19/00 , A61Q17/04 , A61Q19/08
摘要： 本发明公开了一种猴头菌发酵获得含麦角硫因的化妆品原液的制备方法，包括如下步骤：步骤1：将猴头菌菌丝接种到液体种子培养基中培养，得到种子液；步骤2：将种子液接种到发酵培养基中发酵并添加麦角硫因前体物质，发酵至终点，得到发酵液；步骤3：对含有菌丝体的发酵液进行处理，得到含麦角硫因的发酵原液作为含麦角硫因的化妆品原液，该原液产品含有300mg/L以上的麦角硫因，具有较强抗氧化、防辐射、抗炎功效，可作为原料添加到水、乳、膏霜等中，广泛应用于化妆品领域中。
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