一种可拆分的紧凑型CRISPR/Cas基因编辑系统

    公开(公告)号:CN117683805A

    公开(公告)日:2024-03-12

    申请号:CN202311681903.6

    申请日:2023-12-08

    摘要: 本发明提供一种可以拆分的紧凑型CRISPR/Cas系统。所述系统包括依次连接的以下单元:(a)Cas12j2‑STU.v4‑N:依次设置的玉米Ubi启动子、nCas12j2的N端、内含肽的N端、连接序列(SGGS linker)、核定位信号(BpNLS);和(b)Cas12j2‑STU.v4‑C:依次设置的玉米Ubi启动子、内含肽的的C端、nCas12j2的C端、连接序列(SGGS linker)、核定位信号(BpNLS)、PolyA、Cas12j2的pre‑crRNA变体、间隔区Spacer、Cas12j2的crRNA变体、豌豆rbcS‑E9终止子(E9ter)。Cas12j2系统相比于常见的Cas9和Cas12a,体积小、结构简单且特异性较强,在细胞间递送效率上更有优势,有更广泛的适用场景。本方案在高效Cas12j2系统的基础上,选择Cas12j2蛋白上的关键氨基酸残基对Cas12j2基因编辑工具进行进一步拆分,在尽量不影响其效率的基础上缩小系统的整体体积,拓宽系统的递送方式。