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公开(公告)号:CN104862291B
公开(公告)日:2018-02-06
申请号:CN201510230022.1
申请日:2015-05-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了cupin蛋白结构域在制备α‑淀粉酶抑制剂中的应用。本发明中发现了植物贮藏蛋白cupin结构具有α‑淀粉酶抑制剂功能,它是通过鹰嘴豆种子中α‑淀粉酶抑制剂的纯化及鉴定、蛋白原核表达并测定其抑制活性、cupin结构域缺失及氨基酸突变、来源于其他作物具有cupin结构域蛋白的原核表达并测定α‑淀粉酶抑制剂活性、测定cupin结构域蛋白生物学特性等手段实现的,并发现cupin结构域影响蛋白的α‑淀粉酶抑制活性具有普遍性。本发明可操作性强、重复性好、效率高、适用性强,对进一步发掘植物中贮藏蛋白类型α‑淀粉酶抑制剂具有广泛而深远的意义。
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公开(公告)号:CN104862330B
公开(公告)日:2018-05-01
申请号:CN201510230195.3
申请日:2015-05-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有Cupin结构功能域的贮藏蛋白类型α‑淀粉酶抑制剂的生产和纯化方法;包括(1)原核表达体系构建及菌液培养诱导表达;(2)原核表达可溶性蛋白纯化;和/或(3)原核表达包涵体蛋白纯化及蛋白复性。目前,经过多次反复实验证明,采用本发明工艺流程,对此种α‐淀粉酶抑制剂进行工艺生产,得到的蛋白产量高、纯度高,生产工艺简单方便,生产周期短,无需价格昂贵设备,是一种适合于此α‐淀粉酶抑制剂生产纯化的优良生物工艺方法。
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公开(公告)号:CN104862330A
公开(公告)日:2015-08-26
申请号:CN201510230195.3
申请日:2015-05-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有Cupin结构功能域的贮藏蛋白类型α-淀粉酶抑制剂的生产和纯化方法;包括(1)原核表达体系构建及菌液培养诱导表达;(2)原核表达可溶性蛋白纯化;和/或(3)原核表达包涵体蛋白纯化及蛋白复性。目前,经过多次反复实验证明,采用本发明工艺流程,对此种α‐淀粉酶抑制剂进行工艺生产,得到的蛋白产量高、纯度高,生产工艺简单方便,生产周期短,无需价格昂贵设备,是一种适合于此α‐淀粉酶抑制剂生产纯化的优良生物工艺方法。
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公开(公告)号:CN104862291A
公开(公告)日:2015-08-26
申请号:CN201510230022.1
申请日:2015-05-07
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12N9/2414 , A01N65/20 , C12Y302/01001
Abstract: 本发明公开了cupin蛋白结构域在制备α-淀粉酶抑制剂中的应用。本发明中发现了植物贮藏蛋白cupin结构具有α-淀粉酶抑制剂功能,它是通过鹰嘴豆种子中α-淀粉酶抑制剂的纯化及鉴定、蛋白原核表达并测定其抑制活性、cupin结构域缺失及氨基酸突变、来源于其他作物具有cupin结构域蛋白的原核表达并测定α-淀粉酶抑制剂活性、测定cupin结构域蛋白生物学特性等手段实现的,并发现cupin结构域影响蛋白的α-淀粉酶抑制活性具有普遍性。本发明可操作性强、重复性好、效率高、适用性强,对进一步发掘植物中贮藏蛋白类型α-淀粉酶抑制剂具有广泛而深远的意义。
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