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公开(公告)号：CN111929438B
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202010806738.2
申请日：2020-08-12
Inventor： 刘斐 , 冯志新 , 李嘉豪 , 白昀 , 陈蓉 , 张越 , 谢青云 , 张磊 , 李悦 , 韦艳娜 , 刘蓓蓓 , 华利忠 , 熊祺琰 , 邵国青 , 王丽 , 单衍可 , 陆雨楠
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/543 , G01N33/533
Abstract: 本发明提供一种检测非洲猪瘟病毒抗体的量子点微球免疫层析试纸条及其应用，属于兽医生物诊断制品的生产和技术领域。该试纸条包括底板，所述底板上依次设有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；结合垫上包被有量子点微球标记的重组蛋白P30V和重组多肽串联蛋白R10；硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，检测线处包被有羊抗猪IgG多抗，检测线靠近所述结合垫一侧设置；质控线处包被有非洲猪瘟病毒P30单抗，质控线靠近所述吸水垫一侧设置。配合所述试纸条使用的样本稀释液，是含有BSA和Tween20的PBS缓冲液。本发明检测方法，可用于非洲猪瘟病毒抗体的快速、高特异性、高灵敏度的定性或定量检测。
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公开(公告)号：CN111912984B
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202010806185.0
申请日：2020-08-12
Inventor： 冯志新 , 刘斐 , 白昀 , 李嘉豪 , 陈蓉 , 张磊 , 韦艳娜 , 张越 , 李悦 , 刘蓓蓓 , 华利忠 , 谢青云 , 熊祺琰 , 邵国青 , 单衍可 , 陆雨楠 , 王丽
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/543 , G01N33/52
Abstract: 本发明提供一种检测非洲猪瘟病毒CD2v与MGF360黏膜抗体的试纸条及其应用，属于兽医生物诊断制品的生产和技术领域。该试纸条包括设有检测线和质控线的硝酸纤维素膜，检测线处包被有鼠抗猪SC蛋白单克隆抗体；质控线处包被有非洲猪瘟阳性血清的纯化蛋白。样本稀释液含有量子点微球标记的重组蛋白MGF360和重组蛋白CD2v；重组蛋白MGF360的序列如SEQ ID NO:4；重组蛋白CD2v的序列如SEQ ID NO:2。采用本发明试纸条和样本稀释液检测非洲猪瘟病毒CD2v与MGF360黏膜抗体，可用于非洲猪瘟感染的早期检测，且特异性强，灵敏度高，稳定性好。
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公开(公告)号：CN111206030B
公开(公告)日：2022-08-16
申请号：CN202010098589.9
申请日：2020-02-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种基于玻纤滤纸的病毒核酸提取方法，包括以下几个步骤：步骤一，在生物样本中加入蛋白酶K，快速混匀，得混合溶液；步骤二，加入结合缓冲液和Carrier RNA，上下颠倒充分混匀；步骤三，将混合液滴加在玻纤滤纸上，玻纤滤纸以双圈滤纸为支撑物固定，过滤的废液用吸水纸吸去；步骤四，用洗涤缓冲液清洗，再用吸水纸吸去废液；步骤五，在玻纤滤纸上滴加洗脱缓冲液，收集洗脱液即获得所需核酸。本方法将玻纤滤纸引入核酸抽提方法中，可以用于生物样本中核酸的富集和提取。该方法简化了核酸抽提的步骤和所需仪器设备，节省了操作时间，降低了提取成本，同时保证了高效的核酸回收率。
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公开(公告)号：CN113984728A
公开(公告)日：2022-01-28
申请号：CN202111266864.4
申请日：2021-10-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一种基于双位点识别策略和荧光内滤效应构建的荧光生物传感器。通过构建一种上转换纳米粒子(UCNPs)介导的荧光生物传感器，并用于单增李斯特菌的快速、灵敏检测。将万古霉素(Van)作为第一识别分子，制备MNPs‑Van磁纳米探针；以生物素化的核酸适配体(aptamer)作为第二识别分子，可与单增李斯特菌细胞壁上的内化蛋白A结合。利用两种识别分子分别靶标目标菌上的不同位点，从而特异性捕获目标菌，形成三明治型复合物(MNPs‑Van/单增李斯特菌/aptamer)。通过辣根过氧化物酶标记物(HRP‑SA)，引入HRP‑TMB酶催化系统而产生蓝色物质，结合UCNPs的荧光内滤效应，导致UCNPs荧光强度的降低，从而实现对单增李斯特菌的定量检测。
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公开(公告)号：CN111912991A
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN202010806186.5
申请日：2020-08-12
Inventor： 刘斐 , 冯志新 , 李佳豪 , 白昀 , 陈蓉 , 张磊 , 韦艳娜 , 张越 , 李悦 , 刘蓓蓓 , 华利忠 , 谢青云 , 熊祺琰 , 邵国青 , 单衍可 , 陆雨楠 , 王丽
IPC: G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/558 , G01N33/543 , G01N21/78
Abstract: 本发明提供一种检测非洲猪瘟病毒血清抗体的试纸条及其应用，属于兽医生物诊断制品的生产和技术领域。该试纸条包括底板，底板上依次设有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；结合垫上包被有量子点微球标记的SPA；硝酸纤维素膜上设有第一检测线和质控线，第一检测线处包被有重组蛋白CD2v和重组蛋白MGF360，第一检测线靠近所述结合垫一侧设置；质控线处包被有鸡抗SPA多抗，质控线靠近所述吸水垫一侧设置。配合该试纸条使用的样本稀释液，是含有BSA和Tween20的硼酸缓冲液。本发明试纸条，可快速、高特异性、高灵敏度地检测非洲猪瘟病毒血清抗体。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111781363A
公开(公告)日：2020-10-16
申请号：CN202010806754.1
申请日：2020-08-12
Inventor： 冯志新 , 刘斐 , 白昀 , 李佳豪 , 陈蓉 , 谢青云 , 张越 , 张磊 , 李悦 , 韦艳娜 , 刘蓓蓓 , 华利忠 , 熊祺琰 , 邵国青 , 王丽 , 单衍可 , 陆雨楠
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/52
Abstract: 本发明提供一种检测非洲猪瘟病毒黏膜sIgA抗体的量子点微球免疫层析试纸条及其应用，属于兽医生物诊断制品领域。该试纸条包括底板，底板上依次设有样品垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，检测线处包被有鼠抗猪SC蛋白单克隆抗体，检测线靠近样品垫一侧设置；质控线处包被有非洲猪瘟阳性血清的纯化蛋白，质控线靠近所述吸水垫一侧设置。本发明的样本稀释液含有量子点微球标记的重组多肽串联蛋白R10和重组蛋白P30V；R10和P30V的序列如SEQ ID NO:2和4所示。本发明试纸条配合样本稀释液，可用于非洲猪瘟病毒黏膜sIgA抗体的快速、高特异性、高灵敏度的定性检测。
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公开(公告)号：CN117126946A
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202311161388.9
申请日：2023-09-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与海门山羊繁殖性状相关的SNP分子标记及其应用，属于生物技术与家畜育种领域。所述SNP分子标记命名为PRKCA g.62086257C>G。本发明以海门山羊血液基因组DNA为模板，通过PCR和产物直接测序的方法，判定基因型。其中GG基因型和CC基因型与海门山羊产羔数存在显著性关联，可以作为提高海门山羊繁殖性状的有效分子标记。本发明检测方法简单快速、准确性高且价格低廉，可提升海门山羊的育种效率，具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN117025793A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311158949.X
申请日：2023-09-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与海门山羊繁殖性状相关的InDel分子标记及其应用，属于生物技术与家畜育种领域。所述InDel分子标记包含AKT3 25bp InDel和AKT3 29bp InDel两处位点。本发明以海门山羊血液基因组DNA为模板，通过PCR和琼脂糖凝胶电泳的方法，判定基因型。其中AKT3 25bp InDel的DD基因型、II基因型以及AKT3 29bp InDel的II基因型与海门山羊的产羔数或/和羔羊初生重存在显著性关联，可以作为提高海门山羊繁殖性状的有效分子标记。本发明检测方法简单快速、准确性高且价格低廉，可提升海门山羊的育种效率，具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN117025792A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311158948.5
申请日：2023-09-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与海门山羊初生重繁殖性状相关的InDel分子标记及其应用，属于生物技术与家畜育种领域。所述InDel分子标记命名为LGR4 61bp InDel。本发明以海门山羊血液基因组DNA为模板，通过PCR和琼脂糖凝胶电泳的方法，判定基因型。其中II基因型与海门山羊羔羊初生重存在显著性关联，可以作为提高海门山羊繁殖性状的有效分子标记。本发明检测方法简单快速、准确性高且价格低廉，可提升海门山羊的育种效率，具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN113984728B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202111266864.4
申请日：2021-10-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一种用于单增李斯特菌快速检测的荧光生物传感器构建方法。通过构建一种上转换纳米粒子(UCNPs)介导的荧光生物传感器，并用于单增李斯特菌的快速、灵敏检测。将万古霉素(Van)作为第一识别分子，制备MNPs‑Van磁纳米探针；以生物素化的核酸适配体(aptamer)作为第二识别分子，可与单增李斯特菌细胞壁上的内化蛋白A结合。利用两种识别分子分别靶标目标菌上的不同位点，从而特异性捕获目标菌，形成三明治型复合物(MNPs‑Van/单增李斯特菌/aptamer)。通过辣根过氧化物酶标记物(HRP‑SA)，引入HRP‑TMB酶催化系统而产生蓝色物质，结合UCNPs的荧光内滤效应，导致UCNPs荧光强度的降低，从而实现对单增李斯特菌的定量检测。
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