一种用于单增李斯特菌快速检测的荧光生物传感器构建方法

    公开(公告)号:CN113984728A

    公开(公告)日:2022-01-28

    申请号:CN202111266864.4

    申请日:2021-10-28

    IPC分类号: G01N21/64

    摘要: 本发明涉及一种基于双位点识别策略和荧光内滤效应构建的荧光生物传感器。通过构建一种上转换纳米粒子(UCNPs)介导的荧光生物传感器,并用于单增李斯特菌的快速、灵敏检测。将万古霉素(Van)作为第一识别分子,制备MNPs‑Van磁纳米探针;以生物素化的核酸适配体(aptamer)作为第二识别分子,可与单增李斯特菌细胞壁上的内化蛋白A结合。利用两种识别分子分别靶标目标菌上的不同位点,从而特异性捕获目标菌,形成三明治型复合物(MNPs‑Van/单增李斯特菌/aptamer)。通过辣根过氧化物酶标记物(HRP‑SA),引入HRP‑TMB酶催化系统而产生蓝色物质,结合UCNPs的荧光内滤效应,导致UCNPs荧光强度的降低,从而实现对单增李斯特菌的定量检测。

    野生茄子5型丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶基因StPP5的应用

    公开(公告)号:CN103320454A

    公开(公告)日:2013-09-25

    申请号:CN201310144439.7

    申请日:2013-04-23

    摘要: 本发明公开野生茄子5型丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶基因StPP5的应用。本发明从野生茄子中克隆出StPP5基因。经SA和大丽轮枝菌诱导后,与对照相比,野生茄子StPP5基因表达量显著上升。将StPP5基因插入植物表达载体pCMBIA1304的Nco Ⅰ和Spe Ⅰ酶切位点间构建转烟草表达载体,并进一步获得的再生植株经PCR、q-RT-PCR检测出转基因植株,在此基础上,提取转基因烟草的粗蛋白进行进行抑菌试验,结果表明过量表达StPP5的转基因烟草粗蛋白提取物能降低大丽轮枝菌得生长率。因此,该基因转化烟草等作物的感病品种,有望提高其黄萎病抗性。

    一种基于上转换-金纳米荧光共振能量转移的志贺氏菌快速检测方法

    公开(公告)号:CN115684104A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202211142690.5

    申请日:2022-09-20

    摘要: 本发明公开了一种食品中志贺氏菌快速检测的方法,属于微生物快速检测领域。本检测方法包括以下步骤:对油溶性上转换荧光材料进行氨基修饰、羧基修饰,将志贺氏菌适配体和互补链分别修饰在金纳米和上转换荧光材料表面,利用适配体和互补链之间碱基互补配对作用,构建上转换‑金纳米荧光检测体系;利用上转换材料和金纳米之间的荧光共振能量转移作用探究志贺氏菌菌液浓度和荧光信号强度之间的关系。本发明建立的检测体系具有较宽的检测范围和较低的检测限,其中线性检测范围为1.2×102CFU/mL‑1.2×108CFU/mL,检测限为30CFU/mL,灵敏度较高,并且能够特异性地检测食品中的志贺氏菌。