用于样品在线预处理的微流控芯片及其制法和使用方法

    公开(公告)号:CN114130436A

    公开(公告)日:2022-03-04

    申请号:CN202111261489.4

    申请日:2021-10-28

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于样品在线预处理的微流控芯片及其制法和使用方法,包括依次连通的自动提取和过滤模块、通过式净化模块和在线渗透蒸发模块;所述自动提取和过滤模块用于去除样品中颗粒杂质,所述通过式净化模块用于去除样品中的脂肪和磷脂;所述在线渗透蒸发模块用于去除自动提取和过滤模块产生的溶剂。本发明无需任何离线人工操作,整个分析检测时间不到30分钟,比传统的LC‑MS/MS方法缩短了约10倍;本发明制备的微流控集成芯片可与生物芯片和质谱(chip‑MS)等平台结合,可实现同时对多种兽药进行全自动多类多残留分析。

    一种利用微阵列微流控芯片筛选适配体的方法

    公开(公告)号:CN106480039B

    公开(公告)日:2019-11-12

    申请号:CN201610894672.0

    申请日:2016-10-13

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种新型微阵列微流控芯片应用于适配体筛选的方法。该筛选芯片综合应用微阵列和微流控技术,将正负筛过程集合在一块微流控芯片上,筛选7轮后即获得高亲和力的适配体。同时本发明还公开了乳铁蛋白适配体筛选的具体步骤,包括芯片制备、正负筛过程、PCR扩增等详细过程。该方法筛选出的适配体对靶标蛋白的特异性好,亲和性高;且该适配体较抗体更容易获得,可以大量、快速的体外合成;制备方法更为简单快捷,因此该适配体在许多领域将有望成为抗体技术有益的补充。此外,该正负筛集合的芯片模式方便、快捷、高效,可以用于其它蛋白的适配体筛选,为其他适配体筛选工作者提供了很好的思路设计和参考。

    基于双信号放大的荧光偏振适配体传感器及其应用

    公开(公告)号:CN106770138B

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201710068601.X

    申请日:2017-02-08

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了基于双信号放大的荧光偏振适配体传感器,包括信号产生探针和捕获探针,所述信号产生探针和捕获探针的核苷酸序列如SEQ ID ON.1~15所示,该传感器用于均相溶液中乳铁蛋白的高灵敏性检测。本发明在不改变适配体高亲和力和特异性的前提下优化了适配体的结构。在该方法中,两段截断适配体分别修饰异硫氰酸荧光素(FITC)和银纳米粒子(Ag10NPs),加入乳铁蛋白后三者组装成截断适配体‑乳铁蛋白的复合物,缩短了Ag10NPs和FITC的空间距离。因此,Ag10NPs可以产生重量扩增效应和荧光表面增强效应,最终引起荧光偏振信号急剧增加。结果表明该传感器相对于传统的均相溶液检测限可以降低三个数量级,达到1.25pM。

    纳米银增强的比率型FRET探针及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN105606580A

    公开(公告)日:2016-05-25

    申请号:CN201610150965.8

    申请日:2016-03-16

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 许丹科 李慧

    CPC classification number: G01N21/6486

    Abstract: 本发明公开了纳米银增强的比率型FRET探针,它以十面体的纳米银球为内核,银球外表面键合有三种不同的核酸链形成荧光共振能量转移探针。本发明还公开了上述探针的制备方法和应用。此探针的特点是当存在目标物时,515nm和565nm处的荧光强度会同时发生变化,而两个波长下荧光强度的比值与目标物的浓度存在一定的线性关系。此种定量检测的方式不仅可以提高检测的灵敏度而且可以避免假阳性信号和外界环境的干扰。本发明还公开了包含上述探针的试剂盒及其在检测PDGF-BB中的应用。本方法检测PDGF-BB的线性范围为3.12ng/mL-200ng/mL,检测限低,特异性好。

    一种抗体修饰的纳米银及其试剂盒与应用

    公开(公告)号:CN104237501B

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201410398798.X

    申请日:2014-08-13

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种抗体修饰的纳米银(AgNPs),它以直径为10~30nm的纳米银球为内核,银球外表面静电吸附有羊抗鼠IgG抗体。本发明还公开了上述抗体修饰的纳米银的制备方法、包含该抗体修饰的纳米银的试剂盒、及该抗体修饰的纳米银在制备检测鼠IgG的试剂中的应用。本发明的抗体修饰的纳米银(纳米银-抗体)相比商品化的纳米金-抗体具有与目标物反应时间快,显色时间短,检测浓度范围宽且价格便宜的优势。此种纳米银-抗体具有取代纳米金-抗体的能力。

    一种适配体修饰的纳米银及其试剂盒与应用

    公开(公告)号:CN102539738B

    公开(公告)日:2014-05-21

    申请号:CN201110419608.4

    申请日:2011-12-15

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种适配体修饰的纳米银,它以直径为10~30nm的纳米银球为内核,银球外表面键合有适配体链和寡核苷酸链。本发明还公开了上述适配体修饰的纳米银的制备方法、包含该适配体修饰的纳米银的试剂盒、及该适配体修饰的纳米银在制备检测IgE的试剂中的应用。利用本发明的纳米银材料进行IgE的检测,灵敏度高,检测时间短(大约2-3h),操作简单易行,检测结果可视化,无需特殊昂贵的检测仪器,目视即可达到孔内半定量检测。成本低廉,可实现大批量检测,适于推广使用。

    一种适配体筛选用多腔室微流控PCR芯片及其制造方法与应用

    公开(公告)号:CN106867882A

    公开(公告)日:2017-06-20

    申请号:CN201710071570.3

    申请日:2017-02-09

    Applicant: 南京大学

    CPC classification number: B01L3/502769 B01L3/50851 B01L2200/027 B01L2300/18

    Abstract: 本发明公开一种适配体筛选用多腔室微流控PCR芯片,该多腔室微流控PCR芯片包括微流PCR反应片、温度循环加热板、玻璃基底、芯片夹具,所述PDMS反应片上反应液注入孔、Z型混合单元、流入微流通道、PCR扩增室、流出微流通道、反应液流出孔依次联通。该微流控PCR芯片采用多个反应腔室,可保证次级文库的高质、足量获取及核酸种类多样性;该微流控PCR芯片通过荧光实时扩增曲线可以快速获取最优扩增条件,将适配体筛选的核酸序列进行最优条件下扩增。本发明还公开了利用多腔室微流控PCR芯片适筛选配体的方法,该方法可以用于各类靶标适配体筛选的PCR扩增,为其他适配体筛选工作者提供了很好的思路设计和参考。

    适配体修饰的纳米金探针及其试剂盒与在检测PDGF-BB中的应用

    公开(公告)号:CN103529197B

    公开(公告)日:2015-10-07

    申请号:CN201310517588.3

    申请日:2013-10-28

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种适配体修饰的纳米金探针,它以直径为20-30nm的纳米金球为内核,金球外表面键合有适配体链和寡核苷酸链。本发明还公开了包含上述探针的试剂盒及其在检测PDGF-BB中的应用。本发明的纳米金探针与显色剂联用能提高显色可视化检测的灵敏度,检测PDGF-BB的线性范围为6.25ng/mL-100ng/mL,检测限低,特异性好。纳米金探针的合成及修饰方法成熟,显色剂性能好,两者的联合可以使检测PDGF-BB的灵敏度大大提高,检测过程大大简化。

    荧光分子修饰的纳米银探针及其试剂盒与在检测链霉亲和素中的应用

    公开(公告)号:CN102796737A

    公开(公告)日:2012-11-28

    申请号:CN201210303189.2

    申请日:2012-08-23

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种荧光分子修饰的纳米银探针。纳米银探针以直径为10~30nm的纳米银球为内核,银球外表面键合有荧光分子链和寡核苷酸链。本发明还公开了包含上述探针的试剂盒与在检测链霉亲和素中的应用。本发明的纳米银探针耦合荧光增强液的方法能大大提高荧光检测的灵敏度,不需要通过改变仪器的结构来提高检测性能,巧妙地提高了检测能力。此种探针的合成及修饰方法成熟,荧光增强液廉价易得,两者的联合使用可以得到惊人的结果。为蛋白质的荧光分析检测提供了一种极好的信号放大的方法。

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