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公开(公告)号:CN1706953A
公开(公告)日:2005-12-14
申请号:CN200410055553.3
申请日:2004-08-04
Applicant: 南京大学生物制药工程研究中心
Abstract: 本发明属于生物制药领域中应用基因工程技术生产蛋白质药物的范畴。本发明公开了一种新的具有快速溶栓效果的人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体蛋白K2tPA的制备方法和应用。其制备方法是用基因工程技术构建了表达K2tPA的重组质粒,并实现了在大肠杆菌中的高效表达。将含有人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)重组表达质粒的工程菌经10L种子罐培养及100L发酵,每100L发酵液得重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)纯品4g,纯度达95%以上,比活大于50万IU/mg,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准,可用于心、脑血管疾病的血栓形成的治疗。
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公开(公告)号:CN101900725A
公开(公告)日:2010-12-01
申请号:CN200910027214.7
申请日:2009-05-25
Applicant: 南京大学生物制药工程研究中心
IPC: G01N33/543 , G01N33/72 , G01N33/577 , G01N21/64 , C12N9/72
Abstract: 本发明属于蛋白质或多肽检测领域,公开了利用正反馈酶反应放大体系检测痕量蛋白质或多肽的方法。该方法为对待测痕量蛋白质或多肽采用结合了正反馈酶促反应放大体系和酶反应动力学分析方法的酶联免疫吸附检测方法。该方法检测灵敏度可达1~50fmol/L,比常规ELISA的灵敏度提高4~5个数量级。
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公开(公告)号:CN1706943A
公开(公告)日:2005-12-14
申请号:CN200410055551.4
申请日:2004-08-04
Applicant: 南京大学生物制药工程研究中心
Abstract: 本发明涉及一种抑制尿激酶原(proUK)/尿激酶原受体(uPAR)相互作用的重组蛋白的制备方法和活性鉴定。由于uPA/uPAR在许多病理生理过程中发挥了重要的作用,阻断这一通路将会对疾病的发生和发展起到阻滞作用。本发明中制备的人尿激酶原氨基末端片段(ATF)通过体外活性鉴定表明其能够抑制尿激酶原与位于细胞表面的尿激酶原受体的结合。同时也能抑制尿激酶(UK)对纤溶酶原(plasminogen)以及纤溶酶(plasmin)对proUK的激活。这预示着rhATF可能在抑制uPA/uPAR参与的病理生理过程中发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN1887296A
公开(公告)日:2007-01-03
申请号:CN200610040863.7
申请日:2006-07-31
Applicant: 南京大学生物制药工程研究中心
Abstract: 本发明公开了一种诱导抗肿瘤免疫的方法及其在制药中的应用。该方法利用103~104剂量活骨髓瘤FO细胞诱导抗肿瘤免疫;或者,利用GM-CSF转染的骨髓瘤FO细胞冻干粉诱导抗肿瘤免疫;或者,利用原代人脐静脉血管内皮细胞诱导抗肿瘤免疫;或者,利用肿瘤血管内皮细胞膜表面蛋白提取物诱导抗肿瘤免疫的方法。该方法可用于制备抗肿瘤药物。该方法操作简单,诱导抗肿瘤免疫效果好。
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公开(公告)号:CN101900725B
公开(公告)日:2015-05-27
申请号:CN200910027214.7
申请日:2009-05-25
Applicant: 南京大学生物制药工程研究中心
IPC: G01N33/543 , G01N33/72 , G01N33/577 , G01N21/64 , C12N9/72
Abstract: 本发明属于蛋白质或多肽检测领域,公开了利用正反馈酶反应放大体系检测痕量蛋白质或多肽的方法。该方法为对待测痕量蛋白质或多肽采用结合了正反馈酶促反应放大体系和酶反应动力学分析方法的酶联免疫吸附检测方法。该方法检测灵敏度可达1~50fmol/L,比常规ELISA的灵敏度提高4~5个数量级。
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公开(公告)号:CN1887296B
公开(公告)日:2011-05-25
申请号:CN200610040863.7
申请日:2006-07-31
Applicant: 南京大学生物制药工程研究中心
Abstract: 本发明公开了一种诱导抗肿瘤免疫的方法及其在制药中的应用。该方法利用103~104剂量活骨髓瘤FO细胞诱导抗肿瘤免疫;或者,利用GM-CSF转染的骨髓瘤FO细胞冻干粉诱导抗肿瘤免疫;或者,利用原代人脐静脉血管内皮细胞诱导抗肿瘤免疫;或者,利用肿瘤血管内皮细胞膜表面蛋白提取物诱导抗肿瘤免疫的方法。该方法可用于制备抗肿瘤药物。该方法操作简单,诱导抗肿瘤免疫效果好。
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公开(公告)号:CN1706947A
公开(公告)日:2005-12-14
申请号:CN200410055552.9
申请日:2004-08-04
Applicant: 南京大学生物制药工程研究中心
IPC: C12N15/16 , C12N15/70 , C07K14/635 , A61K38/29
Abstract: 本发明涉及医药生物工程技术领域,是包括涉及编码人甲状旁腺激素小肽的cDNA,和利用其表达载体制备人甲状旁腺激素的方法。本发明将化学合成的重组人甲状旁腺激素(1-34)基因用PCR扩增后,克隆至表达载体pET-35b(+),使重组人甲状旁腺激素(1-34)融合于纤维素结合结构域(CBDclos)的羧基端,并得到高效表达。融合蛋白经纤维素树脂亲和层析纯化后,经Factor Xa裂解释放出rhPTH(1-34),再通过纤维素树脂亲和层析、C4反向高效液相色谱纯化得到rhPTH(1-34)纯品。每升培养液可获取3mg高纯度的rhPTH(1-34)。经质谱测定,所得样品的分子量为4117.0道尔顿,与rhPTH(1-34)理论分子量一致。本发明极大程度上丰富了该多肽在医药生物工程技术领域的研究和开发。
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