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公开(公告)号：CN114213535A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111529808.5
申请日：2021-12-14
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 南京岚轩生物科技有限公司
IPC分类号： C07K16/26 , C07K16/06 , G01N33/535 , G01N33/78
摘要： 本发明公开了一种混合抗原的抗体筛选方法，包括以下步骤：S1：饲养及处理：饲养的小鼠观察无异样后，取小鼠阴性血清保存备用；S2：免疫：对所述步骤S1中分组的小鼠，分别于第1d、14d、28d、42d各注射抗原一次；S3：抗血清的分离与保存：每次免疫抗原后的第7天，小鼠断尾采集血样，收集血清，备用；S4：抗体筛选。筛选得到针对多种抗原的抗体，通过评价混合免疫制备的抗体与单一抗原免疫制备的抗体效价来探讨一次反应同时检测多种抗原的可能性，可达到提高检测效率和节约检测成本的目的；对小鼠进行混合抗原免疫，缩短了免疫时间，提高了免疫效率，同时与单一抗原免疫得到的抗体在性质上没有显著区别。
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公开(公告)号：CN114307788A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111669387.6
申请日：2021-12-31
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 南京岚轩生物科技有限公司
IPC分类号： B01F33/501 , B01F35/30
摘要： 本发明公开了一种抗原乳化装置及其使用方法，抗原乳化装置包括有电源、电机和搅拌针，其中，所述搅拌针一端可拆卸的插入所述电机的输出轴内，另一端为自由搅拌端；所述自由搅拌端的针头尖端部分为圆环；还包括有注射器针筒。采用本发明的抗原乳化装置，搅拌针可更换，结构部件少，电动操作，省力；自由搅拌端的针头尖端部分为圆环，采用圆环结构，能够在搅拌的体系中形成涡旋，搅拌充分，乳化时间控制在5～10min内，耗时短；另外，采用医用注射器针筒用来装载抗原，搅拌也是在针筒内，杜绝了抗原浪费的现象。
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公开(公告)号：CN114324854A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111508326.1
申请日：2021-12-10
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 南京岚轩生物科技有限公司
IPC分类号： G01N33/543 , G01N33/558 , G01N33/533
摘要： 本发明公开了一种用于免疫层析检测的复合型生物阻断剂及其制备方法和试剂条，阻断剂包括有阻断剂缓冲液，阻断剂缓冲液中稀释有鼠单克隆抗体IgG‑1、鼠单克隆抗体IgG‑2、羊抗人IgM/RF多克隆抗体和兔多抗IgG；在所述阻断剂缓冲液还添加有BSA；其中，所述阻断剂缓冲液为三羟甲基氨基甲烷‑盐酸Tris‑HCl缓冲液或磷酸盐PBS缓冲液。阻断剂能有效减少或者排除内源干扰物质对荧光免疫层析检测的不良影响，预防假阳性和假阴性检测结果的出现；将几种不同的鼠单克隆抗体、羊多抗、兔多抗混合后，用于免疫层析检测，能够有效预防、控制样本中内源干扰物质对免疫层析检测的影响，提高免疫层析定量检测试剂检测结果的准确性。
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公开(公告)号：CN114316020A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111626199.5
申请日：2021-12-28
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 南京岚轩生物科技有限公司
IPC分类号： C07K14/58 , C12N15/70 , G01N33/74 , G01N33/558
摘要： 本发明公开了一种BNP重组蛋白及其制备方法和应用，该制备方法包括以下步骤：S1重组质粒、转化与培养：将具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列对应的核苷酸序列的BNP重组质粒转化至BLR(DE3)菌，培养获得活化菌株，然后1:1000接种到LB培养基中，恒温振荡培养，进行摇瓶实验，诱导，离心得菌体；S2纯化：将所述步骤S1中离心得到的菌体沉淀进行细胞裂解，获得上清，His柱过柱纯化，260mM咪唑洗脱获得BNP重组蛋白。BNP重组质粒转化大肠杆菌，进行BNP重组蛋白的表达，获得BNP重组蛋白，与天然BNP蛋白相同的免疫原性，而且纯度高，有更好的稳定性，可代替天然BNP多肽，用作BNP免疫诊断试剂标准品和BNP检测试剂盒。
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公开(公告)号：CN114291820A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202111629274.3
申请日：2021-12-28
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 南京岚轩生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种单分散二氧化硅胶乳微球的制备方法，包括以下步骤：S1合成单分散SiO2微球种子：在醇、水和氨水溶剂体系中，加入四乙氧基硅烷‑醇溶液反应得到单分散SiO2微球种子；S2制备单分散SiO2微球：将所述步骤S1中得到的单分散SiO2微球种子与氨水和醇配成SiO2种子液，再加入氨水‑醇溶液和四乙氧基硅烷醇溶液反应得到单分散SiO2微球悬浮液；S3精处理：将所述步骤S2得到的单分散SiO2微球悬浮液经过离心、洗涤数次得到单分散SiO2微球。可获得高圆度、窄分布、且粒径可控的单分散SiO2微球，通过反应溶剂的选择及反应温度的控制，得到的SiO2微球分布更均匀，粒径分布偏差不大于2％。
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公开(公告)号：CN114195880A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111669367.9
申请日：2021-12-31
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 南京岚轩生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种重组IL‑6蛋白的制备方法及其应用，制备方法包括以下步骤：S1重组人IL‑6基因片段扩增；S2IL‑6表达载体pCDNA3.1(+)‑IL6的构建；S3将表达载体pCDNA3.1(+)‑IL6转染至HEK293细胞株：S4重组IL‑6表达：筛选不同克隆的细胞株培养基上清，收集经过表达的细胞株培养基上清，得重组IL‑6蛋白。原核表达系统表达的IL‑6不能与天然蛋白形成完全一致的蛋白折叠，可能导致表达出的蛋白活性及抗原表位与天然蛋白有较大差距；使用人胚肾细胞(HEK293)作为表达宿主，表达出折叠准确、修饰正确的重组蛋白。
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公开(公告)号：CN114279778A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111468315.5
申请日：2021-12-04
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 南京岚轩生物科技有限公司
IPC分类号： G01N1/28
摘要： 本发明公开了一种复合高值参考品的制备方法，包括以下步骤：S1：向混合血清加入氯化钙溶液和硫酸葡聚糖溶液，4℃静置过夜，次日离心去除上清，向沉淀中加入草酸钾缓冲液，混匀充分，二次离心去除沉淀，收集上清透析，获得复合高值参考品的粗品；S2：加入保护剂，混匀，保护剂成份为柠檬酸三钠，海藻糖，硫代硫酸钠，山梨醇和丙氨酸；S3：利用冻干机内冻干，得复合高值参考品最终产物。复合高值参考品添加了保护剂，使复合物在液体状态下或者冻干后稳定后更加好，冻融不易出现沉淀，且无基质效应；用于配制对应的载脂蛋白A1、载脂蛋白B和脂蛋白a三项的检测校准品或参考品，在试剂检测的应用中具有良好的检测性能，检测精度高，响应效果好。
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公开(公告)号：CN114349848B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202111629271.X
申请日：2021-12-28
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC分类号： C07K14/775 , C07K1/22 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种SAA重组蛋白及其制备方法和应用，该制备方法，包括以下步骤：S1重组质粒、转化与培养：将具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列对应的核苷酸序列的SAA重组质粒转化至BLR(DE3)菌，培养获得活化菌株，然后1:1000接种到LB培养基中，恒温振荡培养，进行摇瓶实验，诱导，离心得菌体；S2纯化：将所述步骤S1中离心得到的菌体沉淀进行细胞裂解，获得包涵体蛋白，His柱过柱纯化，8M尿素和260mM咪唑洗脱，获得SAA重组蛋白，透析复性获得最终SAA重组蛋白。本发明的制备方法可大幅提高重组血清淀粉样蛋白SAA抗原的产量和活性，且SAA重组蛋白在液体状态下稳定性好，能满足作为临床诊断的校准品要求，用作SAA免疫诊断试剂校准品和SAA检测试剂盒的制备。
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公开(公告)号：CN114702572B
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202111443928.3
申请日：2021-11-30
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC分类号： C07K14/795 , C07K1/107 , G01N33/82 , G01N33/558 , G01N33/548 , G01N33/531 , G01N33/58
摘要： 本发明公开了一种25‑羟基维生素D3抗原制备方法及免疫层析试纸条，该方法包括以下步骤：取25‑羟基维生素D3、载体蛋白KLH、EDC和NHS；其中，25‑羟基维生素D3和NHS分别用DMF充分溶解分别得到小分子溶液和NHS溶液，载体蛋白KLH用PBS溶解得到载体蛋白KLH溶液，EDC用CHCl3溶解得到EDC溶液；将小分子溶液、EDC溶液和NHS溶液依次加入到混合容器中；向蒸干后的容器内加入DMF溶液充分溶解容器内壁上所有的干燥颗粒物，然后将容器内的DMF溶液缓慢滴加到载体蛋白溶液内；将过夜放置的溶液进行透析；得到25‑羟基维生素D3抗原。本发明的合成步骤简洁有效，得率高，抗原免疫原性强。
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公开(公告)号：CN114349848A
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202111629271.X
申请日：2021-12-28
申请人： 南京岚煜生物科技有限公司 , 江苏华控生物科技有限公司
IPC分类号： C07K14/775 , C07K1/22 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种SAA重组蛋白及其制备方法和应用，该制备方法，包括以下步骤：S1重组质粒、转化与培养：将具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列对应的核苷酸序列的SAA重组质粒转化至BLR(DE3)菌，培养获得活化菌株，然后1:1000接种到LB培养基中，恒温振荡培养，进行摇瓶实验，诱导，离心得菌体；S2纯化：将所述步骤S1中离心得到的菌体沉淀进行细胞裂解，获得包涵体蛋白，His柱过柱纯化，8M尿素和260mM咪唑洗脱，获得SAA重组蛋白，透析复性获得最终SAA重组蛋白。本发明的制备方法可大幅提高重组血清淀粉样蛋白SAA抗原的产量和活性，且SAA重组蛋白在液体状态下稳定性好，能满足作为临床诊断的校准品要求，用作SAA免疫诊断试剂校准品和SAA检测试剂盒的制备。
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