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公开(公告)号:CN113234710A
公开(公告)日:2021-08-10
申请号:CN202110501473.X
申请日:2021-05-08
申请人: 南京工业大学
摘要: 本发明公开了一种异色瓢虫多巴脱羧酶DDC及其在催化5‑羟色胺上的应用。本发明通过克隆具有如SEQ ID No.1所示核苷酸序列的异色瓢虫多巴脱羧酶基因片段,获得了高活性多巴脱羧酶。利用该酶首次实现了对5‑羟基色氨酸的催化脱羧作用,获得5‑羟色胺。另外,该酶专一性催化5‑羟基色氨酸而对色氨酸无催化作用对于生物法催化色氨酸生成5‑羟色胺具有重要指导意义。本发明转化率高,生产成本低,工艺简单,反应条件温和,环境友好,在工业化生产5‑羟色胺的应用中具有重要的借鉴价值。
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公开(公告)号:CN112708589B
公开(公告)日:2023-12-22
申请号:CN202110067356.7
申请日:2021-01-19
申请人: 南京工业大学
摘要: 本发明公开了一种基因工程菌及其构建方法与在发酵产5‑羟基色氨酸上的应用。该工程菌株是利用已有报道的曼氏吸血虫(Schistosoma mansoni)色氨酸羟化酶基因截短片段SmT5H与已报道的辅因子BH4循环系统进行共表达构建的重组菌株。本发明首次以大肠杆菌Ecoli.BL21(DE3)为宿主实现了色氨酸羟化酶SmT5H利用可循环再生的辅因子BH4产5‑羟基色氨酸。利用该菌株进行发酵工艺优化,在无需外源添加辅因子的条件下,只添加底物色氨酸即可获得最终产物5‑羟基色氨酸。该工艺简单,成本低,原料易得,转化率高。(56)对比文件Lisa Pan et al.,.“GTP-cyclohydrolasedefi ciency responsive to sapropterin and5-HTP supplementation: relief oftreatment-refractory depression andsuicidal behaviour”《.BMJ Case Reports》.2011,第1-3页.
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公开(公告)号:CN112708589A
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN202110067356.7
申请日:2021-01-19
申请人: 南京工业大学
摘要: 本发明公开了一种基因工程菌及其构建方法与在发酵产5‑羟基色氨酸上的应用。该工程菌株是利用已有报道的曼氏吸血虫(Schistosoma mansoni)色氨酸羟化酶基因截短片段SmT5H与已报道的辅因子BH4循环系统进行共表达构建的重组菌株。本发明首次以大肠杆菌Ecoli.BL21(DE3)为宿主实现了色氨酸羟化酶SmT5H利用可循环再生的辅因子BH4产5‑羟基色氨酸。利用该菌株进行发酵工艺优化,在无需外源添加辅因子的条件下,只添加底物色氨酸即可获得最终产物5‑羟基色氨酸。该工艺简单,成本低,原料易得,转化率高。
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