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公开(公告)号：CN118006498A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410220480.6
申请日：2024-02-28
Abstract: 本发明涉及一种细胞分离纯化技术领域，具体涉及从小细胞形成体系中分离出小细胞的方法。解决了现有技术中小细胞分离细胞成本高，分离技术十分复杂等问题，所述低成本小细胞纯化方法，包括以下步骤：将菌液通过差速离心、PBS清洗、再经混合纤维酯膜过滤，即得纯化的小细胞。根据不同需求，可省略PBS清洗和/或过膜步骤，进行简化版小细胞分离纯化方法，即将菌液超声2min，然后在离心机中800×g、5min离心收集上清液，然后根据实验需求选择是否过混合纤维酯膜，收集纯化后的小细胞。本发明操作简单方便，成本低，对设备要求低，不需要加抗生素来抑制菌体的生长，并且采用营养更丰富的降磷TB培养基增加了细胞的生物量。
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公开(公告)号：CN117947020A
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410253065.0
申请日：2024-03-06
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，公开了一种从大肠杆菌中产生dsRNA以抑制灰霉菌的方法及dsRNA的提取方法和应用。本发明公开的RNAi的靶标基因是灰葡萄孢菌中的BcSAS1，因为它在灰霉病菌的毒力中发挥关键作用。具体来说，BcSAS1编码灰霉菌中菌丝发育和毒力所需的小GTP酶Rab家族的成员。本发明以灰霉菌BcSAS1基因为基础，获得的dsRNA能有效降低灰霉菌的侵染能力从而防控植物和水果的灰霉病。本发明利用大肠杆菌实现了在短时间内大规模合成dsRNA，并显著提高了dsRNA的提取效率，克服现有技术难以大规模生产dsRNA的缺点。
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公开(公告)号：CN118307774A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410261827.1
申请日：2024-03-07
Applicant: 南京工业大学
IPC: C08G73/06 , B01J31/06 , C07D317/36 , C07D317/46
Abstract: 本发明提供了一种含苯类超交联离子聚合物催化剂及其制备方法和应用，属于催化技术领域。所述催化剂由1,8‑二氮杂环(5,4,0)‑7‑十一碳烯(DBU)和对二氯苄(DCX)反应得到离子单体氯化1‑(4‑(氯甲基)苄基)‑2,9‑二氮杂双环(6,5,1)‑8‑十一碳烯，并在活泼金属氯化物催化下自聚并得到含苯类超交联离子聚合物催化剂。将催化剂用于催化二氧化碳环加成合成环状碳酸酯，目标产物环状碳酸酯的收率≥97.6％，选择性≥99.23％。本方法制备的含苯类超交联离子聚合物催化剂离子位点浓度高、易分离回收、操作过程简单，具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN118028203A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410221575.X
申请日：2024-02-28
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N1/21 , C12N9/04 , C12N9/02 , C12N9/16 , C12N15/53 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12P7/18 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，公开了一种用于制备1,3‑丁二醇(1,3‑BDO)的同工酶共表达重组菌的构建及其应用，所述重组菌是将编码硫解酶、乙酰乙酰辅酶A脱氢酶和醛脱氢酶的基因共同导入宿主细胞中，后再次分别导入编码硫解酶和醛(醇)脱氢酶的同工酶基因实现同工酶共表达，并筛选匹配效果较好的同工酶组合来进行1,3‑丁二醇的生产。利用本发明的重组菌在优化发酵条件、筛选不同效应物及其浓度后，经补料分批发酵1,3‑丁二醇的产量达到16.18g/L，转化率为0.36mol/mol，具有重要的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN111088202A
公开(公告)日：2020-05-01
申请号：CN201911354539.6
申请日：2019-12-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种通过生物成膜连续化发酵生产赖氨酸的重组谷氨酸棒杆菌及其构建方法，所述的重组谷氨酸棒杆菌是通过在谷氨酸棒杆菌中过表达蛋白酶基因FtsH构建得到的；所述的构建方法包括如下步骤：(1)对谷氨酸棒杆菌的基因组进行PCR，扩增FtsH基因，得到扩增的FtsH基因片段；(2)将FtsH基因片段克隆到过表达质粒上，得到重组质粒；(3)将重组质粒导入谷氨酸棒杆菌中，筛选得到过重组谷氨酸棒杆菌。有益效果：本发明构建了一株过表达蛋白酶FtsH的谷氨酸棒杆菌，加强了谷氨酸棒杆菌的成膜能力，使得谷氨酸棒杆菌固定化连续发酵的产量比游离发酵的原始菌提高了38.2％，且发酵周期缩短了26.4％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110628835A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201911071026.4
申请日：2019-11-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用pH自平衡催化体系制备木糖醇的方法，其特征在于，木糖、葡萄糖、甲酸类化合物、木糖还原酶、葡萄糖脱氢酶、甲酸脱氢酶、电子载体和水形成生物催化体系，催化木糖反应生成木糖醇。与现有技术相比，本发明通过耦合反应过程，实现反应体系中酸性和碱性产物的相互中和，能够稳定反应过程的pH中和，省去了生产过程pH的调控，因此反应过程更简单、稳定、高效，可以在纯水中进行，从而提高了生产效率、降低了生产成本和操作难度；同时，采用由甲酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶和木糖还原酶构成的酶偶合反应系统催化生产木糖醇，24小时内从2M木糖中获得了278.4g/L的木糖醇产量，产率高达11.6g/L/h。
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公开(公告)号：CN106906503B
公开(公告)日：2018-10-26
申请号：CN201710225739.6
申请日：2017-04-07
Applicant: 南京工业大学浦江学院
Abstract: 本发明公开了一种基于电镀制备ZnO纳米阵列的方法。本发明通过谷胱甘肽与金离子进行络合，在导电玻璃上沉积金纳米簇，然后利用沉积了金纳米簇的导电玻璃作为电极，对Zn2+进行电镀，制备得到排列整齐，分布均匀的ZnO纳米阵列。本发明方法克服了现有技术中ZnO排列难以控制、分布不均等缺陷。本发明可以有序控制ZnO纳米阵列的厚度，粒径，长度等，以得到符合预期结果的ZnO纳米阵列。ZnO纳米阵列在环境保护、节能、生物传感器等方面有着广泛的应用。因此，本发明对ZnO纳米阵列的制备及应用具有重大意义。
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公开(公告)号：CN119193643A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411339403.9
申请日：2024-09-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种增大细菌尺寸的方法、重组大肠杆菌及其应用。本发明通过调控微生物细胞形态相关蛋白，对微生物细胞形态及分裂方式进行改造，从而优化微生物细胞的特性，以提高其在生物制造等领域的应用价值。具体的，以强化了minE基因或弱化了mreB、minC、minD、dacA、ftsZ基因中的任意一个或几个蛋白基因表达的大肠杆菌为底盘菌株，通过异源表达DivIVA增大了细胞尺寸。本发明获得了可分裂、培养、遗传的大尺寸细胞，为生产一些胞内/外产物提供了更大的生产空间，并可应用于多种生物大分子生产，为增强目标产物生产效率提供了一种新的解决方案。同时，增大的细胞形态有利于细胞截留、吸附、沉淀、产物分离等过程，提高了整体生产效率。
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公开(公告)号：CN118291510A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410536013.4
申请日：2024-04-30
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种基于凝聚‑割离技术生产目标分子的方法、重组菌株及其应用。本发明通过调控生物凝聚态的形成，实现目标分子在细胞端的高浓度富集。经过这一步骤，获得了高度富集的目标分子，并可通过细胞分裂的方式进一步累积。这一创新方法为提高目标分子的产量和积累率开辟了新途径。相较于传统方法，本方法不仅有效地提高了细胞内目标分子在特定区域的浓度，还通过细胞分裂机制，实现了这些富集分子的进一步积累。通过精确调控生物凝聚态的生成，本发明克服了目标分子在细胞内稳定积累的难题，为增强目标分子生产效率提供了一种创新解决方案。这一方法在生物工艺、医药制造及其他相关领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN118240729A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410253061.2
申请日：2024-03-06
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/113 , C12N15/70 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，揭示了一种提高双链RNA产量的创新方法。该方法涉及构建一个能够高效产生双链RNA的大肠杆菌底盘BL21(DE3)△rnc△minC，并通过外源添加脂肪酸来进一步提升双链RNA的生产量。在这项研究中，我们成功敲除了大肠杆菌BL21(DE3)中编码细胞分裂Min系统中隔膜抑制蛋白的minC基因以及编码内切核糖核酸酶RNase III的rnc基因，并将其与含有单个T7启动子的RNAi表达载体相匹配，以实现高效的双链RNA生产。同时，我们提出在培养基中外源添加脂肪酸的策略，以进一步提高双链RNA的产量。这一创新系统不仅显著提升了双链RNA的产量，还加速了基于RNAi的害虫防治技术的发展。这一技术不仅为生物农业领域提供了先进的工具，而且为可持续农业的发展做出了积极贡献。
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