公开(公告)号：CN118546907A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410861827.5

申请日：2024-06-28

申请人： 南京工业大学

发明人： 江凌 ,  施旖 ,  陈耀 ,  帅文静 ,  汪乐飞 ,  孙杨 ,  朱丽英

IPC分类号： C12N9/24 ,  C07K19/00

摘要： 本发明公开一种pH开关酶及其应用，所述pH开关酶包括结合配偶体融合的N‑端EXINU，和肽标签融合的C‑端EXINU，所述结合配偶体融合的N‑端EXINU是由结合配偶体通过连接子连接N‑端EXINU得到的，所述肽标签融合的C‑端EXINU是由肽标签通过连接子连接C‑端EXINU得到的，所述连接子的氨基酸序列为GGGGSGGGGS，所述N‑端EXINU的序列如SEQ ID NO：1所示，所述C‑端EXINU的序列如SEQ ID NO：2所示。N‑端EXINU和C‑端EXINU为菊粉外切酶EXINU的两个片段。该开关酶利用结合配偶体和肽标签分别融合菊粉外切酶EXINU的碳水化合物识别域和催化域，实现了通过pH的调节使酯键反复地形成和水解，从而进一步使得酯键形成时具有菊粉外切酶活性，酯键水解后失去外切酶活性，最终达到利用pH开关酶催化反应的效果。

公开(公告)号：CN117417459A

公开(公告)日：2024-01-19

申请号：CN202311362208.3

申请日：2023-10-20

申请人： 南京工业大学

发明人： 江凌 ,  陈耀 ,  施旖 ,  李闯 ,  刘伟 ,  朱丽英

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  C07K1/14

摘要： 本发明涉及一种高酯键形成效率的Catcher/Tag肽连接体，包括结合配偶体（ReverseCatcher）和肽标签（ReverseTag），所述结合配偶体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述肽标签的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明的ReverseTag和ReverseCatcher有着非常高的共价结合效率，且结合达到100%的速度很快，在170 s内即可完成。