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公开(公告)号：CN116478836A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310380789.7
申请日：2023-04-11
摘要： 本申请公开了一种液态产孢的黑曲霉工程菌株及其构建方法和应用，属于生物工程技术领域。本申请液态产孢的黑曲霉工程菌株包括以原始黑曲霉为模板，使该原始黑曲霉模板中的brlA基因的原始启动子原位替换为木糖诱导启动子Pxylp，其中，brlA基因的基因ID为ASPNIDRAFT2_1171592；木糖诱导启动子Pxylp的基因ID为PCH_Pc20g07020。本申请黑曲霉工程菌株能够利用木糖诱导启动子Pxylp控制负责黑曲霉无性产孢的C2H2锌指转录因子BrlA表达，从而实现以木糖为诱导信号强制黑曲霉在液态介质中大量产生无性分生孢子，用于黑曲霉发酵生产可以快速提高无性分生孢子的生物量。
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公开(公告)号：CN110499312B
公开(公告)日：2022-10-04
申请号：CN201910715781.5
申请日：2019-08-05
摘要： 本发明提供了提高酶的可溶性表达的标签及方法，设计了可提高酶可溶性表达的标签序列，通过基因工程手段在原酶核苷酸序列C末端上连接融合标签label的核苷酸序列，导入表达载体，将重组表达载体转化至重组菌进行表达，可将酶的可溶性表达提高10～20倍左右。
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公开(公告)号：CN110079487B
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN201910476990.9
申请日：2019-06-03
IPC分类号： C12N1/20 , C02F3/34 , C02F101/22 , C02F101/20 , C12R1/07
摘要： 本发明提供一株矿化沉淀重金属铅离子及还原六价铬离子的细菌及其应用，属于生物技术领域。该细菌分类命名为苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）HM‑311株，保藏编号为：GDMCC NO：60592。HM‑311株具有矿化沉淀重金属铅离子及还原六价铬离子的能力，可用于重金属污染治理。该菌株对铅离子的最高耐受浓度为2100 mg/L，对六价铬离子的最高耐受浓度为600 mg/L。在含有1500mg/L铅离子的培养基中发酵培养两天，可去除培养基中97%的铅离子；在含有100 mg/LCr6+的培养基中发酵培养两天，可还原培养基中70%的六价铬离子离子。
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公开(公告)号：CN110499312A
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201910715781.5
申请日：2019-08-05
摘要： 本发明提供了提高酶的可溶性表达的标签及方法，设计了可提高酶可溶性表达的标签序列，通过基因工程手段在原酶核苷酸序列C末端上连接融合标签label的核苷酸序列，导入表达载体，将重组表达载体转化至重组菌进行表达，可将酶的可溶性表达提高10～20倍左右。
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公开(公告)号：CN116732083A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310380760.9
申请日：2023-04-11
摘要： 本申请公开了一种高表达gstA基因质粒、其构建方法、含高表达gstA基因质粒的曲霉工程菌株及其构建方法与应用，属于生物工程领域。本申请高表达gstA基因质粒的构建方法包括：从曲霉菌株的基因组扩增gstA基因片段，并利用引物heigpd‑F/L‑Zero‑R扩增合成载体pEASY‑Cre‑LoxP‑gpd获得线性化质粒载体；将gstA基因片段与线性化质粒载体连接，并将连接产物转化至DH5α感受态细胞培养，挑取单克隆并经菌落PCR验证及测序。本申请高表达gstA基因质粒能够通过PgpdA控制gstA高表达，从而可以使含有高表达gstA基因质粒的曲霉工程菌株能够在发酵培养中大幅增加糖耗速率，显著缩短发酵周期。
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公开(公告)号：CN110079487A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910476990.9
申请日：2019-06-03
IPC分类号： C12N1/20 , C02F3/34 , C02F101/22 , C02F101/20 , C12R1/07
摘要： 本发明提供一株矿化沉淀重金属铅离子及还原六价铬离子的细菌及其应用，属于生物技术领域。该细菌分类命名为苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）HM-311株，保藏编号为：GDMCC NO：60592。HM-311株具有矿化沉淀重金属铅离子及还原六价铬离子的能力，可用于重金属污染治理。该菌株对铅离子的最高耐受浓度为2100 mg/L，对六价铬离子的最高耐受浓度为600 mg/L。在含有1500mg/L铅离子的培养基中发酵培养两天，可去除培养基中97%的铅离子；在含有100 mg/LCr6+的培养基中发酵培养两天，可还原培养基中70%的六价铬离子离子。
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公开(公告)号：CN118755750A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202411239470.3
申请日：2024-09-05
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： C12N15/80 , C12N15/113 , C12N9/22 , G01N30/02 , C12Q1/6869 , C12Q1/6895 , C12P7/42 , C12N1/15 , C12R1/645
摘要： 本发明涉及微生物基因改造技术，公开了一种微生物基因改造靶点的鉴定方法及其应用。该鉴定方法包括以下步骤：将外源Cas效应蛋白表达框整合到原始菌株中得到改造工程菌，合成靶向原始菌株的基因组编码区的sgRNA文库；将所述sgRNA文库导入所述改造工程菌中获得多个突变菌株；将多个所述突变菌株进行发酵筛选得到目标产物产量高于原始菌株的突变菌株作为目标菌株；对目标菌株进行基因测序，鉴定提高原始菌株合成目标产物能力的基因组靶点。该靶点鉴定方法能够方便、快捷地鉴定出微生物的新靶点，获得高产目标产物的突变菌株，为微生物菌株的代谢工程改造提供了新的平台。
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公开(公告)号：CN117821417B
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202410058726.4
申请日：2024-01-16
IPC分类号： C12N9/14 , C12N15/55 , C12N1/21 , C12N15/70 , C12P41/00 , C12P7/22 , C12P17/02 , C12P17/14 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种卤醇脱卤酶突变体、编码基因、质粒、基因工程菌及其应用，本发明制得的基因工程菌在催化合成(R)‑1‑氯‑3‑苯氧基‑2‑丙醇、(S)‑邻硝基苯基缩水甘油醚、(S)‑对硝基苯基缩水甘油醚、(S)‑4‑(苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮，(S)‑4‑(2‑硝基苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮，(S)‑4‑(4‑硝基苯氧基甲基)‑2‑恶唑烷酮时的立体选择性较高，相较卤醇脱卤原始酶的催化合成拆分的纯度和收率更高，反应时间更快，有利于工业生产。
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公开(公告)号：CN118294661B
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410726479.0
申请日：2024-06-06
申请人： 南京师范大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58 , B01L3/00 , C12N15/115
摘要： 本发明涉及微生物筛选技术，公开了一种基于双乳液体系的高通量筛选微生物菌株的方法及其应用。该方法包括：建立微生物突变体库，构建微流控双乳液芯片；利用微流控双乳液芯片对微生物突变体库中的菌株进行包埋形成双乳液液滴，液滴的内相含有微生物突变体库菌株的培养液与具有生物相容性的溶液的混合物、中间相含有能够特异性结合目标产物的靶标结合元件、外相为含有表面活性剂的氟化油；将双乳液液滴固化成核壳微球后进行培养，利用微球中靶标结合元件与目标产物结合形成指示信号，以对微球进行微流控分选。该高通量筛选方法保证了菌株生长的环境，筛选信号稳定准确，大大提高了筛选的精确性，且适用于小分子有机物的检测。
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公开(公告)号：CN118256577A
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202410278351.2
申请日：2024-03-12
申请人： 南京师范大学
摘要： 本发明公开了一种将槲皮素生物转化为槲皮素‑7‑O‑琥珀酰葡糖苷的方法，该方法槲皮素作为底物，通过产糖基转移酶和琥珀酰基加合酶的微生物转化为槲皮素‑7‑O‑琥珀酰葡糖苷，也可利用产糖苷酶微生物将芦丁、槲皮苷、金丝桃苷去糖苷后进一步在产糖基转移酶和琥珀酰基加合酶的微生物转化得到槲皮素‑7‑O‑琥珀酰葡糖苷。本发明将成本低廉、来源广泛的槲皮素通过产糖基转移酶和琥珀酰基加合酶的微生物转化为生物利用度更好、稳定性更好，价值更高的槲皮素‑7‑O‑琥珀酰葡糖苷，具有工艺简单、转化率高、副产物少、有机试剂使用少、绿色环保等优点。
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