公开(公告)号：CN102181476B

公开(公告)日：2012-06-13

申请号：CN201110063438.0

申请日：2011-03-16

申请人： 南京林业大学

发明人： 诸葛强 ,  陶玉峰 ,  周洁 ,  王立科 ,  潘惠新 ,  黄敏仁 ,  陈英 ,  王光萍

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N15/09

摘要： 本发明公开了一种删除转基因杨树选择标记基因的方法，该方法首先将转基因杨树试管苗置于培养基M上以根部萌蘖芽方式继代繁殖，剪取叶盘培养，然后浸入带有pX6-GFP质粒的农杆菌EHA105菌液浸泡10~15min，去除菌液后培养至完整植株，剪取完整植株茎段，在含有β-雌二醇的培养基中培养至植株再生。本发明的方法利用培养基中添加的β-雌二醇，通过诱导转基因植株茎段形成愈伤至植株再生过程删除选择标记基因，利用Cre/lox系统具有的重组删除功能，建立无选择标记基因的杨树转基因体系，为培育具生物安全的转基因杨树新品种提供一个新途径，为安全、高效的林木转基因育种提供基础。

公开(公告)号：CN102181476A

公开(公告)日：2011-09-14

申请号：CN201110063438.0

申请日：2011-03-16

申请人： 南京林业大学

发明人： 诸葛强 ,  陶玉峰 ,  周洁 ,  王立科 ,  潘惠新 ,  黄敏仁 ,  陈英 ,  王光萍

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N15/09

摘要： 本发明公开了一种删除转基因杨树选择标记基因的方法，该方法首先将转基因杨树试管苗置于培养基M上以根部萌蘖芽方式继代繁殖，剪取叶盘培养，然后浸入带有pX6-GFP质粒的农杆菌EHA105菌液浸泡10~15min，去除菌液后培养至完整植株，剪取完整植株茎段，在含有β-雌二醇的培养基中培养至植株再生。本发明的方法利用培养基中添加的β-雌二醇，通过诱导转基因植株茎段形成愈伤至植株再生过程删除选择标记基因，利用Cre/lox系统具有的重组删除功能，建立无选择标记基因的杨树转基因体系，为培育具生物安全的转基因杨树新品种提供一个新途径，为安全、高效的林木转基因育种提供基础。