一种杨树耐盐有关基因PeHKT1及其表达蛋白和应用

    公开(公告)号:CN104946664B

    公开(公告)日:2018-05-04

    申请号:CN201510360679.X

    申请日:2015-06-26

    摘要: 本发明公开了一种杨树耐盐有关基因PeHKT1及其表达蛋白和应用,该杨树耐盐重要基因PeHKT1,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该杨树耐盐重要基因PeHKT1的表达蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明以南林895杨初生不定根为材料,通过RACE技术克隆了PeHKT1基因。同时,采用通路克隆技术构建其杨树过量表达载体pH35GS‑PeHKT1,该基因位于启动子P35S之后,在启动子P35S的驱动下,PeHKT1可在杨树体内高效表达,从而可提高杨树的抗盐性,所以PeHKT1基因是杨树响应盐胁迫的重要基因,在林木基因工程领域有重要应用价值。

    一种删除转基因杨树选择标记基因的方法

    公开(公告)号:CN102181476B

    公开(公告)日:2012-06-13

    申请号:CN201110063438.0

    申请日:2011-03-16

    IPC分类号: C12N15/82 C12N15/09

    摘要: 本发明公开了一种删除转基因杨树选择标记基因的方法,该方法首先将转基因杨树试管苗置于培养基M上以根部萌蘖芽方式继代繁殖,剪取叶盘培养,然后浸入带有pX6-GFP质粒的农杆菌EHA105菌液浸泡10~15min,去除菌液后培养至完整植株,剪取完整植株茎段,在含有β-雌二醇的培养基中培养至植株再生。本发明的方法利用培养基中添加的β-雌二醇,通过诱导转基因植株茎段形成愈伤至植株再生过程删除选择标记基因,利用Cre/lox系统具有的重组删除功能,建立无选择标记基因的杨树转基因体系,为培育具生物安全的转基因杨树新品种提供一个新途径,为安全、高效的林木转基因育种提供基础。

    一种调控杨树根系构型的转录因子基因PeSHR2及其应用

    公开(公告)号:CN103757031B

    公开(公告)日:2015-07-29

    申请号:CN201410039361.7

    申请日:2014-01-27

    发明人: 胥猛 宣磊 黄敏仁

    摘要: 本发明公开了一种调控杨树根系构型的转录因子基因PeSHR2及其应用,该转录因子基因PeSHR2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明以南林895杨初生不定根为材料,通过RACE技术克隆了PeSHR2基因。同时,采用通路克隆技术构建其杨树过量表达载体pH35GS-PeSHR2,该基因位于启动子P35S之后,在启动子P35S的驱动下,PeSHR2可在杨树体内高效表达,从而调控根系构型的重塑。其中,PeSHR2基因是调控杨树根系形态检测的关键基因。本发明通过将PeSHR2基因转入杨树,过量表达PeSHR2的转基因杨产生单一粗壮不定根,似主根,同时伴有大量次级不定根和不定芽,且该类根生不定芽可以生长发育为新植株,说明PeSHR2基因是控制杨树根系构型重塑的关键调节因子,在林木基因工程领域有重要应用价值。

    一种杨树根原基特异表达启动子ProWOX11a及其应用

    公开(公告)号:CN102559682A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201210018319.8

    申请日:2012-01-19

    摘要: 本发明公开了一种杨树根原基特异表达启动子ProWOX11a,其核苷酸序列如SEQNO1所示。本发明以南林895杨DNA为材料,参考杨树基因组序列信息,设计特异性引物,扩增出启动子ProWOX11a序列。采用通路克隆技术构建植物启动子表达载体pBGGUS-ProWOX11a,该启动子序列后接GUS报告基因,在启动子ProWOX11a的驱动下,报告基因GUS可在植物体根原基及根尖分生组织处特异表达。因此,应用本发明提供的启动子,可以在植物基因工程中,诱导相应目的基因在根原基和根尖分生组织中特异表达,具有很好的实用性。

    一种删除转基因杨树选择标记基因的方法

    公开(公告)号:CN102181476A

    公开(公告)日:2011-09-14

    申请号:CN201110063438.0

    申请日:2011-03-16

    IPC分类号: C12N15/82 C12N15/09

    摘要: 本发明公开了一种删除转基因杨树选择标记基因的方法,该方法首先将转基因杨树试管苗置于培养基M上以根部萌蘖芽方式继代繁殖,剪取叶盘培养,然后浸入带有pX6-GFP质粒的农杆菌EHA105菌液浸泡10~15min,去除菌液后培养至完整植株,剪取完整植株茎段,在含有β-雌二醇的培养基中培养至植株再生。本发明的方法利用培养基中添加的β-雌二醇,通过诱导转基因植株茎段形成愈伤至植株再生过程删除选择标记基因,利用Cre/lox系统具有的重组删除功能,建立无选择标记基因的杨树转基因体系,为培育具生物安全的转基因杨树新品种提供一个新途径,为安全、高效的林木转基因育种提供基础。