一种获得海藻糖合成酶突变体的方法及其应用

    公开(公告)号:CN108588062A

    公开(公告)日:2018-09-28

    申请号:CN201810599106.6

    申请日:2018-06-12

    IPC分类号: C12N9/90 C12P19/24 C12P19/12

    摘要: 本发明公开了一种获得海藻糖合成酶突变体的方法及其应用。具体是对来源于弯曲高温单孢菌(Thermomonospora curvata)的海藻糖合成酶活性位点附近的氨基酸进行饱和突变,以含有葡萄糖的麦芽糖溶液为底物,快速筛选海藻糖得率高的突变体酶。用此方法获得的突变体酶包括第286位的组氨酸突变为谷氨酰胺H286Q,第286位的组氨酸突变为天冬酰胺H286N和第339位的谷氨酸突变为精氨酸E339R。突变体酶能够利用常规生物工程的方法制备,并用于海藻糖的生产。本发明利用快速检测方法筛选海藻糖合成酶突变体,获得的突变体酶能够大幅降低葡萄糖对海藻糖合成酶活性的抑制作用,提高海藻糖合成酶转化效率,有很高的利用价值。

    一种对透明质酸钠进行分子量分级的方法

    公开(公告)号:CN103319627A

    公开(公告)日:2013-09-25

    申请号:CN201310286415.5

    申请日:2013-07-10

    IPC分类号: C08B37/08

    摘要: 本发明涉及一种根据分子量对透明质酸钠分级的方法。该方法采用两阶段的膜分离技术将透明质酸钠粗品分子量分级。先将透明质酸钠粗品溶于水中,调节溶液pH到所需的数值,用微滤膜截留浓缩高分子量透明质酸钠,再用超滤膜截留浓缩低分子量透明质酸钠,然后将两种浓缩液用95%乙醇沉淀,沉淀物真空冷冻干燥得到成品。该方法可以用于制备不同分子量规格的HA成品,操作简单便捷,同时,提供了一种获得高分子量HA的新方法。