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公开(公告)号：CN105441400A
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201610053307.7
申请日：2016-01-25
申请人： 南阳师范学院
CPC分类号： C12N9/0065 , C02F3/342 , C12Y111/01007
摘要： 本发明公开了一种突变灰盖鬼伞过氧化物酶、制备方法和应用，属于基因工程及环境技术领域。本发明利用基因合成定点突变平台合成CIPmt4，经3轮易错PCR，抗性筛选得到含5个氨基酸突变(I49S、V53A、T121A、M166F和Y272F)的灰盖鬼伞过氧化物酶CIPmt5，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。该突变酶的最适反应温度由野生型的25℃提高到45℃，最适反应pH由原来的5.0提高到6.5，高活性反应pH变宽，稳定性增强，更适于工业化应用。除次甲基蓝外，突变酶CIPmt5对染料氨基黑、甲基橙、刚果红、苯胺蓝、结晶紫、溴酚蓝的降解最适pH均向中性、碱性方向偏移，并且对7种染料的降解能力均显著高于野生型酶。
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公开(公告)号：CN106947748B
公开(公告)日：2019-06-14
申请号：CN201710271640.X
申请日：2017-04-24
申请人： 南阳师范学院
摘要： 本发明涉及一种超耐Mn2+的细菌漆酶、重组载体、重组菌、酶制剂、复合酶系及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明来源于宏基因组的细菌漆酶lac1542，编码该漆酶的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该细菌漆酶以ABTS为底物时最适pH为4.0；最适反应温度为75℃且高温下稳定性强；100mmol/L的Mn2+仍能对该酶起激活作用；该细菌漆酶和锰过氧化物酶、灰盖鬼伞过氧化物酶组成复合酶系在低浓度下即可降解木质素达71.5％；该细菌漆酶和灰盖鬼伞过氧化物酶复合酶系对甲基橙的脱色率达到54.8％。本发明的细菌漆酶可作为一种新的酶源用于造纸、染织和环保领域，具有广阔的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN108251393A
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201810048296.2
申请日：2018-01-18
申请人： 南阳师范学院
摘要： 本发明公开了一种具有多种功能尤其是可以降解苯并芘的具有过氧化物酶、过氧化氢酶酶、卤代酶和酯酶活性的无辅基氯过氧化物酶CPO822的基因、蛋白及其应用。本发明的有益效果为：本发明通过宏基因组技术，从土壤宏基因组中得到一种新的尚未有功能研究的DNA序列，对该DNA序列所编码的蛋白的结构和功能研究结果表明，该DNA序列表达的重组蛋白具有多功能性，催化反应范围比现有的已分离卤过氧化物酶更广，可作为一种新的酶源用于洗涤、废水处理、消毒、脱除木质素、生产环氧衍生物、降解苯并芘等领域，具有广阔的工业应用前景。另外，通过研究发现，该酶在宽范围的PH下都稳定，高温下稳定性强，对其广泛推广应用具有很大的意义。
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公开(公告)号：CN106947748A
公开(公告)日：2017-07-14
申请号：CN201710271640.X
申请日：2017-04-24
申请人： 南阳师范学院
CPC分类号： C12N9/0061 , C02F3/342 , C02F2101/308 , C02F2101/40 , C12N9/0065 , C12Y110/03001 , C12Y111/01013 , D21C5/005
摘要： 本发明涉及一种超耐Mn2+的细菌漆酶、重组载体、重组菌、酶制剂、复合酶系及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明来源于宏基因组的细菌漆酶lac1542，编码该漆酶的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该细菌漆酶以ABTS为底物时最适pH为4.0；最适反应温度为75℃且高温下稳定性强；100mmol/L的Mn2+仍能对该酶起激活作用；该细菌漆酶和锰过氧化物酶、灰盖鬼伞过氧化物酶组成复合酶系在低浓度下即可降解木质素达71.5％；该细菌漆酶和灰盖鬼伞过氧化物酶复合酶系对甲基橙的脱色率达到54.8％。本发明的细菌漆酶可作为一种新的酶源用于造纸、染织和环保领域，具有广阔的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN105441400B
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201610053307.7
申请日：2016-01-25
申请人： 南阳师范学院
摘要： 本发明公开了一种突变灰盖鬼伞过氧化物酶、制备方法和应用，属于基因工程及环境技术领域。本发明利用基因合成定点突变平台合成CIPmt4，经3轮易错PCR，抗性筛选得到含5个氨基酸突变(I49S、V53A、T121A、M166F和Y272F)的灰盖鬼伞过氧化物酶CIPmt5，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。该突变酶的最适反应温度由野生型的25℃提高到45℃，最适反应pH由原来的5.0提高到6.5，高活性反应pH变宽，稳定性增强，更适于工业化应用。除次甲基蓝外，突变酶CIPmt5对染料氨基黑、甲基橙、刚果红、苯胺蓝、结晶紫、溴酚蓝的降解最适pH均向中性、碱性方向偏移，并且对7种染料的降解能力均显著高于野生型酶。
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公开(公告)号：CN108251393B
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201810048296.2
申请日：2018-01-18
申请人： 南阳师范学院
摘要： 本发明公开了一种具有多种功能尤其是可以降解苯并芘的具有过氧化物酶、过氧化氢酶酶、卤代酶和酯酶活性的无辅基氯过氧化物酶CPO822的基因、蛋白及其应用。本发明的有益效果为：本发明通过宏基因组技术，从土壤宏基因组中得到一种新的尚未有功能研究的DNA序列，对该DNA序列所编码的蛋白的结构和功能研究结果表明，该DNA序列表达的重组蛋白具有多功能性，催化反应范围比现有的已分离卤过氧化物酶更广，可作为一种新的酶源用于洗涤、废水处理、消毒、脱除木质素、生产环氧衍生物、降解苯并芘等领域，具有广阔的工业应用前景。另外，通过研究发现，该酶在宽范围的PH下都稳定，高温下稳定性强，对其广泛推广应用具有很大的意义。
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