一种重组9°N DNA聚合酶及其在DNA信息存储中的应用

    公开(公告)号:CN117535265A

    公开(公告)日:2024-02-09

    申请号:CN202311522803.9

    申请日:2023-11-15

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 一种重组9°N DNA聚合酶及其在DNA信息存储中的应用,属于生物化学及分子生物学技术领域。本发明通过化学合成大肠杆菌偏好密码子优化后的重组聚合酶基因,然后构建到原核表达载体上,进行蛋白表达菌株转化及抗性筛选,结合镍柱亲和层析和阳离子交换层析两步纯化制备得到高纯度重组聚合酶;再以含有存储信息的寡核苷酸为模板,优化扩增体系,系统评价该重组聚合酶的酶学性质及其在DNA信息存储中的应用效果。结果表明重组聚合酶能够实现存储信息的完整解码,有效减少错误数量,尤其是碱基替换类型的错误,降低嘌呤及嘧啶间的错误发生概率,提高信息存储编解码的精度和效率,降低信息存储的成本,在DNA信息存储中具有广阔的应用前景。

    DNA聚合酶-DNA结合蛋白构建的PLS DNA聚合酶及在DNA信息存储中的应用

    公开(公告)号:CN119751704A

    公开(公告)日:2025-04-04

    申请号:CN202510026580.X

    申请日:2025-01-08

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 一种DNA聚合酶‑DNA结合蛋白构建的PLS DNA聚合酶及在DNA信息存储中的应用,属于生物化学与分子生物学技术领域。本发明通过柔性短肽将Sso7dDNA结合蛋白连接在9°N DNA聚合酶的C端构建融合蛋白PLS DNA聚合酶。通过化学合成密码子优化后的PLS DNA聚合酶基因,纯化制备得到高纯度PLS DNA聚合酶;系统评价该PLS DNA聚合酶的酶学性质及其在体外DNA信息存储中寻址和体内DNA信息存储中组装DNA活字块的应用效果。结果表明,融合DNA结合蛋白后,显著提升了PLS DNA聚合酶的持续合成能力、保真性和PCR效率等性能,能够从混合文件池中恢复特定文件,实现随机寻址。

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