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公开(公告)号:CN106967742A
公开(公告)日:2017-07-21
申请号:CN201710232127.X
申请日:2017-04-11
Applicant: 吉林大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K16/18 , C07K2317/14 , C07K2317/622 , C08B37/0039 , C08H1/00
Abstract: 本发明提供了一种绿色荧光蛋白结合蛋白偶联的琼脂糖的制备方法,以pcr扩增的方式获得GBP基因产物,回收后和线性化的PET 28a载体连接,转化DH5a,菌落pcr验证大小正确的克隆送测序,测序正确的单菌落提取质粒并保菌;将取得的质粒用于目的蛋白的诱导表达及纯化;NHS偶联获得绿色荧光蛋白结合蛋白偶联的琼脂糖。获得琼脂糖能够高效特异地结合绿色荧光蛋白GFP,其结合效率可高达4微克/10微升,相比于直接运用GFP抗体和proteinA/G偶联的Beads,其效率要高很多。
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公开(公告)号:CN106591339A
公开(公告)日:2017-04-26
申请号:CN201710029440.3
申请日:2017-01-16
Applicant: 吉林大学
CPC classification number: C12N15/63 , C12N15/85 , C12N2800/107
Abstract: 本发明提供了一种瞬时转染试剂及其应用方法。其转染试剂转染效率高而且稳定,与Lipofectamine3000(后文简称lipo3000)转染效率相当,无论是质粒单转染还是共转染,都有相当高的转染效率;对细胞毒性极小;操作相当简便,比起lipo3000省略了分别稀释质粒和转染试剂的步骤,10分钟之内就可完成转染。溶液稳定性高,在4℃下可长期保存。该转染试剂成本低,转染效率极高,稳定性高,操作简便,适应宿主细胞范围广,培养基中抗生素对其转染效率没有影响,所以,该转染试剂对于大量做瞬时转染的实验室是一种绝佳的选择。
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