公开(公告)号：CN106084063B

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN201610356325.2

申请日：2016-05-26

Applicant: 吉林大学

Inventor： 于彬 ,  于湘晖 ,  孔维 ,  闫晶怡 ,  王真

IPC: C07K19/00 ,  A61K38/17 ,  A61K38/16 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种利用腺病毒纤维蛋白片段作为三聚体模序与TRAIL融合表达，获得稳定性和活性提高的重组蛋白，作为抗肿瘤治疗药物。还提供融合蛋白表达纯化及活性检测的方法。具体为：第一步；设计并构建融合基因，利用大肠杆菌系统低温诱导表达；第二步：采用镍柱亲和层析的方法纯化目的蛋白，利用凝血酶酶切位点切除His标签，获得最终目的蛋白；第三步：体外检测融合蛋白对肿瘤细胞的杀伤活性和对正常细胞的毒性，第四步：不同条件下检测融合蛋白的稳定性，第五步：裸鼠模型上检测融合蛋白的体内抗肿瘤活性。有益效果：发明了2个腺病毒纤维蛋白片段作为三聚体模序的TRAIL融合蛋白。提供了一种简单，快速的获得高稳定性TRAIL蛋白的方法，可应用于TRAIL蛋白的抗肿瘤研究和应用。解决了TRAIL蛋白稳定性差，活性低的弊端。

公开(公告)号：CN106047931B

公开(公告)日：2019-08-23

申请号：CN201610356356.8

申请日：2016-05-26

Applicant: 吉林大学

Inventor： 于彬 ,  于湘晖 ,  孔维 ,  王真

IPC: C12N15/861 ,  A61K38/17 ,  A61K48/00 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明涉及生物医学领域，涉及一种新型衣壳蛋白修饰的重组腺病毒载体。具体涉及到一种不影响包装、对人体正常细胞无毒害作用、并且对肿瘤或癌症细胞具有特异性高杀伤力的靶向性腺病毒载体及其用途。

公开(公告)号：CN104419717B

公开(公告)日：2018-04-27

申请号：CN201310372658.0

申请日：2013-08-23

Applicant: 长春百克生物科技股份公司 ,  吉林大学

Inventor： 于彬 ,  孔维 ,  于湘晖 ,  王真 ,  吴昊 ,  王储

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/861 ,  A61K48/00 ,  A61K39/235

Abstract: 本发明涉及生物医学领域，涉及一种用于基因治疗和疫苗载体的重组腺病毒及其构建方法和应用。具体涉及一种易于包装、免疫水平较高且能很好的避免人体针对5型腺病毒预存免疫的重组腺病毒载体及其构建方法和应用。

公开(公告)号：CN106047931A

公开(公告)日：2016-10-26

申请号：CN201610356356.8

申请日：2016-05-26

Applicant: 吉林大学

Inventor： 于彬 ,  于湘晖 ,  孔维 ,  王真

IPC: C12N15/861 ,  A61K38/17 ,  A61K48/00 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明涉及生物医学领域，涉及一种新型衣壳蛋白修饰的重组腺病毒载体。具体涉及到一种不影响包装、对人体正常细胞无毒害作用、并且对肿瘤或癌症细胞具有特异性高杀伤力的靶向性腺病毒载体及其用途。

公开(公告)号：CN104634978A

公开(公告)日：2015-05-20

申请号：CN201310571030.3

申请日：2013-11-13

Applicant: 长春百克生物科技股份公司 ,  吉林大学

Inventor： 于彬 ,  孔维 ,  于湘晖 ,  董嘉宁 ,  王真 ,  王晓丽

IPC: G01N33/68

CPC classification number: G01N33/68 ,  G01N2333/075

Abstract: 本发明涉及一种分型检测腺病毒中和抗体的方法以及用于分型检测腺病毒中和抗体的试剂盒。本发明提供了一种分型检测腺病毒中和抗体的方法，其特征在于利用不同血清型腺病毒的分型中和抗原分型检测样品中腺病毒中和抗体，其中所述分型中和抗原为所述血清型腺病毒的三聚体形式的knob蛋白。还提供了以三聚体形式的knob蛋白为中和抗原检测腺病毒中和抗体的试剂盒。该方法与当前标准的病毒中和试验相比，操作更简单，检测耗时少，具有较高的安全性，而且成本低廉，对操作环境没有严格要求。另外，本发明中采用的抗原蛋白易于纯化，经过一步纯化即可达到检测需要的纯度。

公开(公告)号：CN104419717A

公开(公告)日：2015-03-18

申请号：CN201310372658.0

申请日：2013-08-23

Applicant: 长春百克生物科技股份公司 ,  吉林大学

Inventor： 于彬 ,  孔维 ,  于湘晖 ,  王真 ,  吴昊 ,  王储

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/861 ,  A61K48/00 ,  A61K39/235

Abstract: 本发明涉及生物医学领域，涉及一种用于基因治疗和疫苗载体的重组腺病毒及其构建方法和应用。具体涉及一种易于包装、免疫水平较高且能很好的避免人体针对5型腺病毒预存免疫的重组腺病毒载体及其构建方法和应用。

公开(公告)号：CN106084063A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610356325.2

申请日：2016-05-26

Applicant: 吉林大学

Inventor： 于彬 ,  于湘晖 ,  孔维 ,  闫晶怡 ,  王真

IPC: C07K19/00 ,  A61K38/17 ,  A61K38/16 ,  A61P35/00

CPC classification number: C07K14/70575 ,  A61K38/00 ,  C07K14/005 ,  C07K2319/00 ,  C12N2710/10022

Abstract: 本发明公开了一种利用腺病毒纤维蛋白片段作为三聚体模序与TRAIL融合表达，获得稳定性和活性提高的重组蛋白，作为抗肿瘤治疗药物。还提供融合蛋白表达纯化及活性检测的方法。具体为：第一步；设计并构建融合基因，利用大肠杆菌系统低温诱导表达；第二步：采用镍柱亲和层析的方法纯化目的蛋白，利用凝血酶酶切位点切除His标签，获得最终目的蛋白；第三步：体外检测融合蛋白对肿瘤细胞的杀伤活性和对正常细胞的毒性，第四步：不同条件下检测融合蛋白的稳定性，第五步：裸鼠模型上检测融合蛋白的体内抗肿瘤活性。有益效果：发明了2个腺病毒纤维蛋白片段作为三聚体模序的TRAIL融合蛋白。提供了一种简单，快速的获得高稳定性TRAIL蛋白的方法，可应用于TRAIL蛋白的抗肿瘤研究和应用。解决了TRAIL蛋白稳定性差，活性低的弊端。