可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌及利用其制备乙酰酯酶的方法

    公开(公告)号:CN104762245A

    公开(公告)日:2015-07-08

    申请号:CN201510077815.4

    申请日:2015-05-03

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌,菌株中包括一种可表达乙酰酯酶的重组载体pKK223-3-ybaC,及利用该菌株液态发酵制备乙酰酯酶的方法为:将大肠埃希氏菌JM110(pKK223-3-ybaC)接种于氨苄LB液体培养基中于37℃、150rpm全温振荡培养箱中活化培养3d,吸取200μL菌悬液接种于氨苄LB液体培养基中于37℃、180rpm全温振荡培养箱中进行发酵,37℃过夜培养后加入终浓度为0.6mmol/L的IPTG,共计发酵5d,将发酵产物1000g,4℃低温离心8min,上清液即为乙酰酯酶粗酶液。本方法所需培养基简单,发酵条件为好氧发酵,易于控制,所制备的乙酰酯酶粗酶液酶活力高,最高可达42.66U/mL,此外,本发明所制备的乙酰酯酶有较高的温度耐受性,最适反应温度为51℃。

    可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌及利用其制备乙酰酯酶的方法

    公开(公告)号:CN104762245B

    公开(公告)日:2018-09-11

    申请号:CN201510077815.4

    申请日:2015-05-03

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开了一种可表达乙酰酯酶的大肠埃希氏菌,菌株中包括一种可表达乙酰酯酶的重组载体pKK223‑3‑ybaC,及利用该菌株液态发酵制备乙酰酯酶的方法为:将大肠埃希氏菌JM110(pKK223‑3‑ybaC)接种于氨苄LB液体培养基中于37℃、150rpm全温振荡培养箱中活化培养3d,吸取200µL菌悬液接种于氨苄LB液体培养基中于37℃、180rpm全温振荡培养箱中进行发酵,37℃过夜培养后加入终浓度为0.6mmol/L的IPTG,共计发酵5d,将发酵产物1000g,4℃低温离心8min,上清液即为乙酰酯酶粗酶液。本方法所需培养基简单,发酵条件为好氧发酵,易于控制,所制备的乙酰酯酶粗酶液酶活力高,最高可达42.66U/mL,此外,本发明所制备的乙酰酯酶有较高的温度耐受性,最适反应温度为51℃。

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