公开(公告)号：CN117904255A

公开(公告)日：2024-04-19

申请号：CN202311596815.6

申请日：2023-11-28

Applicant: 吉林大学

Inventor： 李占军 ,  韩杨 ,  周佳乐 ,  张仁泉 ,  梁玉茹

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/68

Abstract: 一种基于脱氨酶的RNAm5C修饰的检测方法，属于生物工程技术领域。本发明的目的是将脱氨酶与m5C结合蛋白融合，利用m5C结合蛋白的靶向功能，将脱氨酶招募到m5C位点周围，使脱氨酶对单链RNA上的胞嘧啶和腺嘌呤实现脱氨基作用，最后通过检测C‑to‑U/A‑to‑G的转化就可以确定m5C区域，开发一种基于脱氨酶的RNAm5C修饰的检测方法。本发明将m5C结合蛋白ALYREF和YBX1分别与脱氨酶APOBEC1和TadA‑8e的C端融合，利用m5C结合蛋白的靶向功能，将脱氨酶招募到m5C位点附近，利用脱氨酶的脱氨活性改变m5C位点附近的序列，通过分析C‑to‑U/A‑to‑G的转换，确定m5C的区域。本发明新型的脱氨酶检测方法不依赖于抗体和化学试剂，显著增强检测的特异性和准确性。