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公开(公告)号:CN1904054A
公开(公告)日:2007-01-31
申请号:CN200510021324.4
申请日:2005-07-27
摘要: 本发明涉及动物医药生物工程研究领域,是一种禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBM及应用。本发明根据Genbank中注册的禽传染性支气管炎病毒M基因序列设计引物,以M基因的重组质粒pUCM为模板,用PCR方法扩增禽冠状病毒中国分离株SAIBk株的M基因,并将PCR产物经HindIII和XhoI双酶切定向插入以HindIII和XhoI双酶切处理的真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经双酶切和PCR鉴定,成功的构建了禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBk株的M基因真核表达质粒,研制出禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBM。该禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBM可用于预防禽传染性支气管炎。
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公开(公告)号:CN1903371A
公开(公告)日:2007-01-31
申请号:CN200510021326.3
申请日:2005-07-27
摘要: 本发明涉及动物医药生物工程研究领域,是一种禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBN及应用。本发明根据Genbank中注册的禽传染性支气管炎病毒N基因序列设计引物,以N基因的重组质粒pUCN为模板,用PCR方法扩增禽冠状病毒中国分离株SAIBk株的N基因,并将PCR产物经HindIII和XhoI双酶切定向插入以HindIII和XhoI双酶切处理的真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经双酶切和PCR鉴定,成功的构建了禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBk株的N基因真核表达质粒,研制出禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBN。该禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBN可用于预防禽传染性支气管炎。
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公开(公告)号:CN1903372A
公开(公告)日:2007-01-31
申请号:CN200510021356.4
申请日:2005-07-29
IPC分类号: A61K48/00 , A61K39/215 , A61P31/14
摘要: 本发明涉及动物医药生物工程研究领域,是一种禽传染性支气管炎三基因组合DNA疫苗及应用。本发明的目的是将构建并保存的禽传染性支气管炎病毒中国分离株的S1、M、N结构基因的真核表达质粒pIBS1、pIBM和pIBN,按照一定的比例进行组合,研制成禽传染性支气管炎三基因组合的DNA疫苗,并对其免疫原性进行了研究。本发明进行了真核表达质粒生产的培养基和培养条件筛选,确定出含有质粒IBS1、pIBM和pIBN的工程菌的最优化培养基和培养条件。
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公开(公告)号:CN1903370A
公开(公告)日:2007-01-31
申请号:CN200510021325.9
申请日:2005-07-27
摘要: 本发明涉及动物医药生物工程研究领域,是一种禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBS1及应用。本发明根据Genbank中注册的禽传染性支气管炎病毒S1基因序列设计引物,以S1基因的重组质粒pUCS1为模板,用PCR方法扩增禽冠状病毒中国分离株SAIBk株的S1基因,并将PCR产物经HindIII和XhoI双酶切定向插入以HindIII和XhoI双酶切处理的真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经双酶切和PCR鉴定,成功的构建了禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBk株的S1基因真核表达质粒,研制出禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBS1。该禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBS1可用于预防禽传染性支气管炎。
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公开(公告)号:CN1644676A
公开(公告)日:2005-07-27
申请号:CN200410081442.X
申请日:2004-12-10
摘要: 本研究属于生物技术领域。采用PCR技术对来源于自主分离隆的黑曲霉(Arpergillusniger)N25的植酸酶phyA基因(GenBank注册号AF218813)的表达片段进行定点突变,构建含突变基因phyAm的酵母表达载体pPIC9k-phyAm,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,获得重组基因工程酵母菌株PP-NPm-8。该菌种经传代实验证实具有良好的遗传稳定性。本实验室以植酸酶phyAm基因重组酵母菌株PP-NPm-8工程菌为对象。研究了麦芽汁培养基和麦芽高温浸提培养基。培养基成本比BMGY/BMMY降低了218倍。对基因工程菌PP-NPm-8的培养方法进行研究,获得最佳种龄、接种量、诱导时间、培养基pH、甲醇诱导浓度。在此条件下所培养的工程菌酶活可达85067U/ml(在37℃、pH4.6的条件下,1分钟内从0.0051mol/L的植酸钠溶液中释放出1nmol无机磷所需要的植酸酶量为一个酶活性单位)。
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公开(公告)号:CN104694565A
公开(公告)日:2015-06-10
申请号:CN201310653776.9
申请日:2013-12-09
申请人: 四川农业大学
摘要: 一种提高酶基因在酵母中高效表达的方法Genbank中获得酶基因,用Lasergene软件分析酶基因的碱基含量、密码子、编码氨基酸数量等生物学信息,判断密码子偏爱性。根据酵母相对同义密码子数(RSCU)值,优化设计酶基因,选用酵母高频密码子,减少基因中低频密码子。调整优化基因,消除AT富含区。分析酶基因的mRNA5’及3’端非翻译区,优化设计起始密码子的旁侧序列,避免起始密码子包裹于发夹结构中。用RNAstructure5.4,GeneBeeservice(http://www.genebee.mus.su)软件分析优化基因mRNA二级结构,计算mRNA自由能ΔG值。合成最终优化基因,用相同方法分析优化基因,在合成基因上游5’端加入XbaI/NdeI/KasI/SnaBI等酶切位点,下游3’端加入NsiI/NspI/KpnI/NotI等酶切位点后连接入pPIC9K/pPIC3.5K,获得重组表达载体pP-B,电转酵母中诱导表达,鉴定后获取转化子。
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公开(公告)号:CN103952325A
公开(公告)日:2014-07-30
申请号:CN201410195490.5
申请日:2014-05-09
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明公开了一种热稳定性高的重组产植酸酶工程菌及其制备方法,本发明采用突变菌株和经点突变改造得到的突变菌株的植酸酶工程菌为模板进行DNA改造,构建植酸酶工程菌突变体库,获得重组的基因工程菌,其酶活及热稳定性均有所提高。
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公开(公告)号:CN102174196A
公开(公告)日:2011-09-07
申请号:CN201110058271.9
申请日:2011-03-11
申请人: 四川农业大学
IPC分类号: C08G73/02
摘要: 本发明公开了一种合成高分子量导电聚苯胺的新方法,将对苯二胺与1,4-二氧六环-醋酸/醋酸钠缓冲液有机互溶体系混合,并在N2气氛,40℃水浴下搅拌至完全溶解;在缓慢加入Fe3O4磁性纳米粒子和引发剂过氧化氢溶液后继续反应12h,待聚合产物沉淀出来后,抽滤,洗涤,重析,利用强磁体除去Fe3O4磁性纳米粒子,过滤悬液,将沉淀溶解于DMF,缓慢滴加到无水乙醇中使聚合物析出,过滤,将沉淀真空干燥得到高分子量的本征态黑色产物导电聚苯胺。该方法合成条件简单,易于控制,分离提纯等后处理过程简便,且磁性纳米粒子易于磁分离、本征态导电聚苯胺具有超高分子量易溶于普通有机溶剂,具有良好的氧化还原可逆性和热稳定性的特性。
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公开(公告)号:CN115005099A
公开(公告)日:2022-09-06
申请号:CN202210646308.8
申请日:2022-06-09
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明涉及植物组织培养及遗传转化领域,具体是一种苦荞的遗传转化方法,该方法包括:(1)无菌苗的制备(2)农杆菌的培养(3)外植体制备(4)侵染与共培养(5)不定芽诱导培养(6)生根培养。该方法利用子叶节为起始外植体,通过直接器官发生途径建立一种快速有效的再生体系,不经由愈伤组织的诱导及分化,简化了培养流程,在短时间内便可获得苦荞再生植株;该方法培养的组培苗植株表型一致性高,稳定地保持母体的优良特性。
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公开(公告)号:CN109022344B
公开(公告)日:2022-08-02
申请号:CN201810907969.5
申请日:2018-08-10
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明公开了一种金龙胆草离体细胞的培养方法,包括以下步骤:外植体的选择与灭菌;金龙胆草叶片单细胞分离;建立金龙胆草悬浮细胞系;稳定继代培养。本发明周期较组织培养更短,同时不需要栽培金龙胆草,不受地理因素限制。
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