-
公开(公告)号：CN1903372A
公开(公告)日：2007-01-31
申请号：CN200510021356.4
申请日：2005-07-29
IPC分类号： A61K48/00 , A61K39/215 , A61P31/14
摘要： 本发明涉及动物医药生物工程研究领域，是一种禽传染性支气管炎三基因组合DNA疫苗及应用。本发明的目的是将构建并保存的禽传染性支气管炎病毒中国分离株的S1、M、N结构基因的真核表达质粒pIBS1、pIBM和pIBN，按照一定的比例进行组合，研制成禽传染性支气管炎三基因组合的DNA疫苗，并对其免疫原性进行了研究。本发明进行了真核表达质粒生产的培养基和培养条件筛选，确定出含有质粒IBS1、pIBM和pIBN的工程菌的最优化培养基和培养条件。
-
公开(公告)号：CN1903370A
公开(公告)日：2007-01-31
申请号：CN200510021325.9
申请日：2005-07-27
摘要： 本发明涉及动物医药生物工程研究领域，是一种禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBS1及应用。本发明根据Genbank中注册的禽传染性支气管炎病毒S1基因序列设计引物，以S1基因的重组质粒pUCS1为模板，用PCR方法扩增禽冠状病毒中国分离株SAIBk株的S1基因，并将PCR产物经HindIII和XhoI双酶切定向插入以HindIII和XhoI双酶切处理的真核表达载体pcDNA3.1(+)中，经双酶切和PCR鉴定，成功的构建了禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBk株的S1基因真核表达质粒，研制出禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBS1。该禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBS1可用于预防禽传染性支气管炎。
-
公开(公告)号：CN1904054A
公开(公告)日：2007-01-31
申请号：CN200510021324.4
申请日：2005-07-27
摘要： 本发明涉及动物医药生物工程研究领域，是一种禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBM及应用。本发明根据Genbank中注册的禽传染性支气管炎病毒M基因序列设计引物，以M基因的重组质粒pUCM为模板，用PCR方法扩增禽冠状病毒中国分离株SAIBk株的M基因，并将PCR产物经HindIII和XhoI双酶切定向插入以HindIII和XhoI双酶切处理的真核表达载体pcDNA3.1(+)中，经双酶切和PCR鉴定，成功的构建了禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBk株的M基因真核表达质粒，研制出禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBM。该禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBM可用于预防禽传染性支气管炎。
-
公开(公告)号：CN1903371A
公开(公告)日：2007-01-31
申请号：CN200510021326.3
申请日：2005-07-27
摘要： 本发明涉及动物医药生物工程研究领域，是一种禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBN及应用。本发明根据Genbank中注册的禽传染性支气管炎病毒N基因序列设计引物，以N基因的重组质粒pUCN为模板，用PCR方法扩增禽冠状病毒中国分离株SAIBk株的N基因，并将PCR产物经HindIII和XhoI双酶切定向插入以HindIII和XhoI双酶切处理的真核表达载体pcDNA3.1(+)中，经双酶切和PCR鉴定，成功的构建了禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBk株的N基因真核表达质粒，研制出禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBN。该禽传染性支气管炎DNA疫苗pIBN可用于预防禽传染性支气管炎。
-
公开(公告)号：CN1313478C
公开(公告)日：2007-05-02
申请号：CN200410081443.4
申请日：2004-12-10
摘要： 本发明涉及分子生物学研究领域，为一种简易快速大规模提纯质粒DNA的新方法。本方法所用试剂包括菌体清洗液、菌体重悬缓冲液、菌体裂解液、裂解中和液、异丙醇、硅藻土悬液、蛋白洗涤液、80%乙醇、DNA稀释液九种试剂和50ml-l00ml离心管。本发明与现有提纯方法比较操作简便，一次提取仅需90分钟。本发明结果稳定，得量高，纯度好，无蛋白质和RNA污染，与应用Qiagen柱式纯化试剂盒和国产赛百盛树脂型试剂盒提取相同的质粒DNA比较，所得DNA的电泳条带同样清晰，无RNA混杂。本发明价格低廉，不需用酚和氯仿等有毒试剂，经放大可用于DNA疫苗的制备。
-
公开(公告)号：CN1660878A
公开(公告)日：2005-08-31
申请号：CN200410081443.4
申请日：2004-12-10
摘要： 本发明涉及分子生物学研究领域，为一种简易快速大规模提纯质粒DNA的新方法。本方法所用试剂包括菌体清洗液、菌体重悬缓冲液、菌体裂解液、裂解中和液、异丙醇、硅藻土悬液、蛋白洗涤液、80％乙醇、DNA稀释液九种试剂和50ml－100ml离心管。本发明与现有提纯方法比较操作简便，一次提取仅需90分钟。本发明结果稳定，得量高，纯度好，无蛋白质和RNA污染，与应用Qiagen柱式纯化试剂盒和国产赛百盛树脂型试剂盒提取相同的质粒DNA比较，所得DNA的电泳条带同样清晰，无RNA混杂。本发明价格低廉，不需用酚和氯仿等有毒试剂，经放大可用于DNA疫苗的制备。
-
公开(公告)号：CN1644676A
公开(公告)日：2005-07-27
申请号：CN200410081442.X
申请日：2004-12-10
摘要： 本研究属于生物技术领域。采用PCR技术对来源于自主分离隆的黑曲霉(Arpergillusniger)N25的植酸酶phyA基因(GenBank注册号AF218813)的表达片段进行定点突变，构建含突变基因phyAm的酵母表达载体pPIC9k－phyAm，转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，获得重组基因工程酵母菌株PP－NPm－8。该菌种经传代实验证实具有良好的遗传稳定性。本实验室以植酸酶phyAm基因重组酵母菌株PP－NPm－8工程菌为对象。研究了麦芽汁培养基和麦芽高温浸提培养基。培养基成本比BMGY/BMMY降低了218倍。对基因工程菌PP－NPm－8的培养方法进行研究，获得最佳种龄、接种量、诱导时间、培养基pH、甲醇诱导浓度。在此条件下所培养的工程菌酶活可达85067U/ml(在37℃、pH4.6的条件下，1分钟内从0.0051mol/L的植酸钠溶液中释放出1nmol无机磷所需要的植酸酶量为一个酶活性单位)。
-
公开(公告)号：CN104774864A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201410015978.5
申请日：2014-01-15
申请人： 四川农业大学
摘要： 一种拓宽基因工程酶pH作用范围的方法。从GenBank中下载不同pH值作用范围的酶基因A及酶基因B，并进行优化设计，获得在酵母中表达的优化基因。将优化酶基因A的上游5’及下游3’端分别插入XbaI/NdeI/KasI/SnaBI等酶切位点，将酶基因B的上游5’及下游3’端分别插入NsiI/NspI/KpnI/NotI等酶切位点后，分别构建酶基因A、B的克隆载体pUCm-A和pUCm-B。经酶切及测序后构建了融合表达中间载体pPIC9KpP-B，再经酶切及测序后构建融合表达载体pPIC9KpP-AB。将重组质粒线性化后，电击转化酵母宿主细胞。经MD和MM平板筛选及酶活性测定，获得融合酵母阳性菌株。
-
公开(公告)号：CN104694565A
公开(公告)日：2015-06-10
申请号：CN201310653776.9
申请日：2013-12-09
申请人： 四川农业大学
摘要： 一种提高酶基因在酵母中高效表达的方法Genbank中获得酶基因，用Lasergene软件分析酶基因的碱基含量、密码子、编码氨基酸数量等生物学信息，判断密码子偏爱性。根据酵母相对同义密码子数(RSCU)值，优化设计酶基因，选用酵母高频密码子，减少基因中低频密码子。调整优化基因，消除AT富含区。分析酶基因的mRNA5’及3’端非翻译区，优化设计起始密码子的旁侧序列，避免起始密码子包裹于发夹结构中。用RNAstructure5.4，GeneBeeservice(http://www.genebee.mus.su)软件分析优化基因mRNA二级结构，计算mRNA自由能ΔG值。合成最终优化基因，用相同方法分析优化基因，在合成基因上游5’端加入XbaI/NdeI/KasI/SnaBI等酶切位点，下游3’端加入NsiI/NspI/KpnI/NotI等酶切位点后连接入pPIC9K/pPIC3.5K，获得重组表达载体pP-B，电转酵母中诱导表达，鉴定后获取转化子。
-
公开(公告)号：CN103820951A
公开(公告)日：2014-05-28
申请号：CN201410076613.3
申请日：2014-03-04
申请人： 王红宁
发明人： 王红宁
摘要： 本发明公开了一种全自动绕底线机，用于向线芯上卷绕底线，它包括底座、容置所述底线的绕线工位、推芯装置、设置在推芯装置上方的的线芯滑槽、内腔设有切线轮的固定架、绕线装置，其中推芯装置包括由进线电机驱动且端部在绕线工位和线芯滑槽之间做往复运动的推芯杆，绕线装置包括与固定架平行的支架、与推芯杆垂直的滑动装置、沿滑动装置往复滑动的绕线电机和顶线板，支架和固定架分别位于绕线工位的两侧，且切线轮的径向与推芯杆平行，轴向与绕线电机同轴，当绕线电机转轴端部位于固定架内时，绕线电机启动；绕线工位内设有与绕线电机和进线电机分别电连接的红外感应开关。本发明结构简单，通过往复运动实现连续的卷线切线，使用方便，安全可靠。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
搜索结果
19 条记录 (耗时 0.038 秒)